本发明涉及一种金霉素的发酵培养基，尤其涉及一种利用米渣替代部分玉米浆干粉的金霉素发酵培养基。
背景技术：
：金霉素(chlortetracyclin)，又称氯四环素，其抗菌谱与四环素相似，因具有抑菌、促生长、饲料利用率高及在肌体内残留量低等优点，作为药物饲料添加剂广泛应用于畜牧业，是目前药物饲料添加剂中使用量最大的品种。近年来由于禽畜养殖规模的扩大和集约化、舍饲化程度的提高，国内外市场对药物饲料添加剂产品的需求日益增加，目前我国已经成为世界上最大的金霉素生产国。金霉素的发酵生产方法，是由金色链霉菌(streptomycesaureofaciens)做为出发菌株，经过纯种培养、发酵生产金霉素。金霉素发酵生产中主要使用玉米浆干粉做为氮源，其市场价格较高。米渣是大米制作淀粉糖或生产味精的过程中产生的下脚料，其蛋白质含量丰富，高达60％以上(干基)。目前，米渣大部分只是被用作饲料。福建地区具有年产味精80000吨的江南最大的味精生产基地，米渣产量巨大，价格低廉。技术实现要素：本发明的目的在于，提供一种利用米渣替代部分玉米浆干粉的金霉素发酵培养基，既提高金霉素生产水平，降低金霉素生产成本，又解决了部分味精生产过程中产生的环保问题。为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明提供了一种利用米渣替代部分玉米浆干粉的金霉素发酵培养基，以米渣替代80％-90％质量比例的玉米浆干粉。所述金霉素发酵培养基，每升培养基水溶液中含有：玉米粉28～32g、玉米淀粉12～16g、玉米浆干粉2～4g、米渣16～20g、kh2po40.02～0.04g、mgso40.04～0.06g、豆油0.4～0.6g。更优选地，所述金霉素发酵培养基，每升培养基水溶液中含有：玉米粉30g、玉米淀粉15g、玉米浆干粉3g、米渣18g、kh2po40.03g、mgso40.05g、豆油0.5g。其中，所述米渣来源于味精生产中制糖工艺阶段产生的新鲜米渣经烘干后得到的固体产物，质量要求为：蛋白质含量≥60％，水分≤10％，总糖≤20％，脂肪≤12％，灰分≤5％，干渣颗粒通过60目筛的数量≥90％。利用米渣替代部分玉米浆干粉发酵生产金霉素的方法，是由金色链霉菌(streptomycesaureofaciens)作为出发菌株，经过纯种培养、二级发酵生产金霉素。具体工艺步骤包括了砂土孢子制备工序、母瓶斜面孢子制备工序、子瓶斜面孢子制备工序、子瓶孢子液制备工序、种子制备工序和发酵制备工序。所述发酵制备工序中发酵工艺如下：将培养基灭菌，灭菌完成后温度降至30～35℃时，将培养好的一级种子移入发酵罐，移种后发酵生产采取变温发酵，接种后培养温度控制在30～33℃，培养48h后降温至28～30℃，培养压力控制在0.01～0.04mpa，发酵周期120～144小时。本发明具有以下有益效果：1.本发明通过调整培养基的营养成分达到提高金霉素生产水平、降低金霉素生产成本的目的，以米渣替代部分玉米浆干粉做为发酵培养基中的氮源，金霉素放罐效价平均提高14.12％，且原料投入成本降低。2.本发明利用福建省地域优势，以味精生产过程中产生的米渣做为金霉素发酵生产中的原材料，既提高金霉素生产水平、降低金霉素生产成本，又解决了部分味精生产过程中产生的环保问题。具体实施方式实施例1本发明的一种金霉素发酵培养基，1000升培养基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米淀粉15kg、玉米浆干粉3kg、米渣18kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。其中米渣的质量要求为：蛋白质含量≥60％，水分≤10％，总糖≤20％,脂肪≤12％，灰分≤5％，干渣颗粒通过60目筛的数量≥90％。利用米渣替代部分玉米浆干粉的金霉素发酵生产方法，是由金色链霉菌(streptomycesaureofaciens)做为出发菌株，经过纯种培养、二级发酵生产金霉素。具体工艺步骤包括砂土孢子制备工序、母瓶斜面孢子制备工序、子瓶斜面孢子制备工序、种子制备工序、发酵制备工序。砂土孢子制备工序的步骤为：取河沙加入10％稀盐酸，加热煮沸30分钟，倒去酸水，用自来水冲洗至中性，烘干过40目筛。另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。烘干碾碎，过100目筛。砂和土以3:1的比例混合均匀，装入10×100mm的小试管中，每管装1g左右，塞上棉塞，灭菌烘干。将金霉素产生菌的斜面孢子在无菌条件下接入合格的砂土管中，标识菌株名称及保藏日期，置于放有干燥剂的容器中，盖紧密封，于4℃冰箱冷藏保存。母瓶孢子斜面制备工序的步骤为：在无菌条件下从砂土管中挑取适量砂土接于母瓶斜面培养基上，标识后，放于温度34±1℃，湿度30％～50％的恒温室培养7天，成熟后放于4℃冰箱冷藏备用。子瓶孢子斜面制备工序的步骤为：在无菌条件下用接种铲从母瓶孢子菌种斜面上刮取一定量孢子，划线接至子瓶孢子斜面培养基上，同时做露碟和肉汤无试检查，接好的斜面标识后放于温度34±1℃，湿度30％～50％的恒温室培养6天，成熟后放于4℃冰箱冷藏备用。子瓶孢子液制备工序的步骤为：选取生长合格的5个子瓶孢子斜面，在无菌条件下用接种铲将子瓶孢子斜面上的菌层刮下碾散后各加入20ml无菌水，搅拌均匀后过滤得到子瓶孢子液，标识后放于4℃冰箱保存。其中，种子制备工序的步骤为：在无菌条件下，将合格的100ml子瓶孢子液以火焰法接种到一级种子罐中，温度控制在26～28℃，罐压控制在0.04～0.06mpa，搅拌转速120～140r/min条件下进行培养，培养时间24～28小时，种子生长良好可移入发酵罐。发酵制备工序中发酵工艺如下：将培养基灭菌，灭菌完成后温度降至30～35℃时，将培养好的一级种子移入发酵罐，移种后发酵生产采取变温发酵，接种后培养温度控制在30～33℃，培养48h后降温至28～30℃，培养压力控制在0.01～0.04mpa，发酵周期120～144小时。实施例2为验证本发明中利用米渣替代部分玉米浆干粉的培养基配方对金霉素发酵产生的有益影响，采用米渣替代部分玉米浆干粉的培养基(以下简称米渣组)及全部使用玉米浆干粉的培养基(以下简称玉米浆干粉组)按照实施例1的生产方法分别进行金霉素发酵生产，测定金霉素效价。米渣组发酵制备工序中发酵罐内1000升培养基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米淀粉15kg、玉米浆干粉3kg、米渣18kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。其中米渣的质量要求为：蛋白质含量≥60％，水分≤10％，总糖≤20％,脂肪≤12％，灰分≤5％，干渣颗粒通过60目筛的数量≥90％。玉米浆干粉组发酵制备工序中发酵罐内1000升培养基水溶液中含有：玉米粉30kg、玉米淀粉15kg、玉米浆干粉21kg、kh2po40.03kg、mgso40.05kg、豆油0.5kg。上述培养基按照实施例1的生产方法分别进行5批次的发酵。表1米渣组及玉米浆干粉组的金霉素效价项目玉米浆干粉组发酵效价(μg/ml)米渣组发酵效价(μg/ml)1224612576822276524700321488257544220172533152208924917平均值2216425294相对效价(％)100.00114.12如表1所示，以利用米渣替代部分玉米浆干粉的培养基配方发酵生产金霉素比完全使用玉米浆干粉，其发酵效价提高14.12％，有效地提高了产量。目前市场价格玉米浆干粉3000-4000元/吨，而米渣系味精生产的废弃下脚料，价格低廉，降低了发酵原料投入成本。本发明提高金霉素生产产量，降低生产成本，并解决了部分味精生产过程中产生的环保问题。实施例3本发明的一种金霉素发酵培养基，每1000升培养基水溶液中含有：玉米粉28kg、玉米淀粉12kg、玉米浆干粉4kg、米渣16kg、kh2po40.02kg、mgso40.04kg、豆油0.4kg。其余条件同实施例1。实施例4本发明的一种金霉素发酵培养基，每1000升培养基水溶液中含有：玉米粉32kg、玉米淀粉16kg、玉米浆干粉2kg、米渣20kg、kh2po40.04kg、mgso40.06kg、豆油0.6kg。其余条件同实施例1。虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是熟悉本
技术领域：
的技术人员应当理解，我们所描述的具体的实施例只是说明性的，而不是用于对本发明的范围的限定，熟悉本领域的技术人员在依照本发明的精神所作的等效的修饰以及变化，都应当涵盖在本发明的权利要求所保护的范围内。当前第1页12