本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种软骨胶原蛋白肽的制备方法。
背景技术：
中国畜牧业自上世纪90年代开始高速发展，主要畜种尤其生猪存栏量增长势头强劲，截至2016年末生猪存栏量高达4.5亿头。随着老百姓肉质摄入需求提高，软骨在牲畜屠宰过程中被大量单独剔除。软骨组织无血管分布，无病变风险，富含丰富的胶原蛋白和多糖，是生产高品质胶原蛋白肽的优质软骨来源。软骨中特有的二型胶原蛋白中含有丰富的羟脯氨酸、脯氨酸和甘氨酸，是人体健康所需氨基酸的重要补充。现在市面上极少有用软骨制备胶原蛋白肽产品，主要是工艺上无法有效分离多糖，生产出的胶原蛋白肽纯度较低不利于人体的消化吸收。
技术实现要素：
为解决现有技术存在的不足，本发明提供一种软骨胶原蛋白肽的制备方法，本方法制备的胶原蛋白肽纯度高，有利于人体的消化吸收。
本发明的技术方案为：
一种软骨胶原蛋白肽的制备方法，包括如下步骤：
1)软骨预处理：将软骨放入水中，搅拌1-2h，除去软骨表面附着杂质，将去除杂质的软骨粉碎至粒径为8-20mm；
2)脱糖：按照料液重量比1:4-12向粉碎后的软骨中加水，然后加入软骨重量1-5％的碱和软骨重量1-6％的盐，搅拌浸泡12-16h，浸泡完后固液分离；
3)净化处理：按照料液重量比1:5-8向分离后的软骨中加入水，浸泡清洗1-2h，浸泡清洗完后固液分离；
4)复合水解：按照料液重量比1:3-6向分离后的软骨中加入水，边搅拌边加热至45-60℃，调节ph至7.5-9.5，再加入软骨重量1-5‰的酶制剂，反应1-2h；
5)灭酶：水解结束后，调节ph至5.0-7.0，加热至75-85℃，持温10-20min；
6)过滤：将灭酶后的料液经过滤机循环过滤；
7)吸附脱糖：将过滤后的澄清料液经换热器降温至30-50℃，降温后的料液以2-3m/h的流速经大孔树脂吸附脱糖；
8)超滤浓缩：脱糖后的料液进入超滤设备，将脱糖后的料液浓缩至原体积的15-35％；
9)灭菌：将浓缩后的料液经灭菌机灭菌后进入干燥工序；
10)喷雾干燥：浓缩液降温至40-55℃，经高压泵输送至干燥塔，控制进风温度为160-190℃，排风温度为85-100℃，干燥成粉后过筛、包装。
进一步的，所述软骨为哺乳动物软骨。
进一步的，所述步骤2)中的碱为氢氧化钠或氢氧化钙或氢氧化钾；所述步骤2)中的盐为氯化钠。
进一步的，所述步骤4)中的酶制剂为复合酶制剂，由蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶混合而成。
更进一步的，所述蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶在复合酶制剂所占的比重为：80％、15％、5％。
进一步的，所述步骤7)中的大孔树脂的类型为：d290阴离子树脂。
进一步的，所述步骤8)中，所述超滤设备的压力≤5bar。
进一步的，所述步骤9)中，所述灭菌的温度为135℃，时间为15s。
本发明的有益效果是：
本发明在软骨胶原蛋白肽的制备过程中进行了两步脱糖，先通过盐碱法将软骨中大量的多糖去除，再对软骨进行水解，提取胶原蛋白肽，然后再经由大孔树脂对肽液中少量的多糖进行吸附去除，整个工艺过程更加便捷，且操作相对简单，成品品质更高。
本发明通过盐碱法将软骨中的多糖去除，在进行后续的复合水解过程中，脱糖后的软骨复合水解只需要1-2h，极大的缩短了复合水解时间，并且脱糖后后续的过滤步骤也更加顺畅，缩短了过滤时间，提高了整体工艺的效率。
本发明通过独立的多糖分离步骤，再对软骨进行复合水解得到高含量的小分子胶原蛋白肽，有利于提升产品纯度和人体吸收水平。
具体实施方式
以下对本发明进行更加详细的说明。
实施例1
本实施例中所采用的软骨为猪软骨。
将饮用水加入软骨中，没过软骨面20cm，搅拌1h，除去软骨表面附着杂尘。称取除杂尘后的软骨100kg进入粉碎机粉碎成粒径为8mm。向粉碎后的软骨中加入400kg纯化水，再加入1kg的氢氧化钠和1kg的氯化钠，搅拌浸泡12h后固液分离。分离后的料液可单独回收多糖，软骨颗粒则进入净化工序。将分离后的软骨加500kg纯化水，浸泡清洗2h后固液分离，回收清洗水至下批次净化工序，软骨颗粒进入水解工序。将分离后的软骨加300kg纯化水，边搅拌边加热至45℃，加入盐酸调节ph至7.5，再将复合酶制剂加入，复合酶制剂的添加量为0.1kg，其中蛋白酶0.08kg、脂肪酶0.015kg和纤维素酶0.005kg，搅拌下反应2h。水解结束后，加入盐酸调节ph至7.0，升温至75℃，持温10min。料液经过滤机循环过滤至澄清。过滤后的料液经换热器降温至30℃，降温后的料液以2-3m/h的速度经d290阴离子树脂吸附脱糖。脱糖后的料液进入超滤设备，在≤5bar的压力下浓缩至剩余料液体积的15％，料液经灭菌机135℃下持稳15s杀菌后进入干燥工序。料液温度降至40℃时，经高压泵输送至干燥塔塔顶，控制进风温度160℃，排风温度85℃，干燥成粉后过筛、包装。制备的胶原蛋白肽的重量为：46kg,纯度为：97.5％。
实施例2
本实施例中所采用的软骨为牛软骨。
将饮用水加入软骨中，没过软骨面30cm，搅拌2h，除去软骨表面附着杂尘。称取除杂尘后的软骨100kg进入粉碎机粉碎成粒径为20mm。向粉碎后的软骨中加入1200kg纯化水，再加入5kg的氢氧化钾和6kg的氯化钠，搅拌浸泡16h后固液分离。分离后的料液可单独回收多糖，软骨颗粒则进入净化工序。将分离后的软骨加600kg纯化水，浸泡清洗2h后固液分离，回收清洗水至下批次净化工序，软骨颗粒进入水解工序。将分离后的软骨加600kg纯化水，边搅拌边加热至60℃，加入盐酸调节ph至9.5，再将复合酶制剂加入，复合酶制剂的添加量为0.5kg，其中蛋白酶0.4kg、脂肪酶0.075kg和纤维素酶0.025kg，搅拌下反应2h。水解结束后，加入盐酸调节ph至6.0，升温至85℃，持温20min。料液经过滤机循环过滤至澄清。过滤后的料液经换热器降温至50℃，降温后的料液以2-3m/h的速度经d290阴离子树脂吸附脱糖。脱糖后的料液进入超滤设备，在≤5bar的压力下浓缩至剩余料液体积的35％，料液经灭菌机135℃下持稳15s杀菌后进入干燥工序。料液温度降至55℃时，经高压泵输送至干燥塔塔顶，控制进风温度190℃，排风温度100℃，干燥成粉后过筛、包装。制备的胶原蛋白肽的重量为：52kg纯度为：96.8％。
实施例3
本实施例中所采用的软骨为羊软骨。
将饮用水加入软骨中，没过软骨面20cm，搅拌1h，除去软骨表面附着杂尘。称取除杂尘后的软骨100kg进入粉碎机粉碎成粒径为10mm。向粉碎后的软骨中加入600kg纯化水，再加入3kg的氢氧化钠和4kg的氯化钠，搅拌浸泡15h后固液分离。分离后的料液可单独回收多糖，软骨颗粒则进入净化工序。将分离后的软骨加800kg纯化水，浸泡清洗1.5h后固液分离，回收清洗水至下批次净化工序，软骨颗粒进入水解工序。将分离后的软骨加400kg纯化水，边搅拌边加热至50℃，加入盐酸调节ph至8.5，再将复合酶制剂加入，复合酶制剂的添加量为0.4kg，其中蛋白酶0.32kg、脂肪酶0.06kg和纤维素酶0.02kg，搅拌下反应1h。水解结束后，加入盐酸调节ph至5.0，升温至85℃，持温15min。料液经过滤机循环过滤至澄清。过滤后的料液经换热器降温至40℃，降温后的料液以2-3m/h的速度经d290阴离子树脂吸附脱糖。脱糖后的料液进入超滤设备，在≤5bar的压力下浓缩至剩余料液体积的20％，料液经灭菌机135℃下持稳15s杀菌后进入干燥工序。料液温度降至30℃时，经高压泵输送至干燥塔塔顶，控制进风温度180℃，排风温度90℃，干燥成粉后过筛、包装。制备的胶原蛋白肽的重量为：55kg纯度为：97.2％。
以上所述的本发明实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何在本发明的精神和原则之内所作的修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的权利要求保护范围之内。