胶原蛋白肽的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种胶原蛋白肽的制备方法，所述胶原蛋白肽的制备方法包括以下步骤：(1)将鱼皮与水按质量比为1：(2?6)混合，在92?98℃下提取1?3小时，得到提取液，并调节pH至5?10；(2)将胰蛋白酶和酶保活剂加入到48?72℃的提取液中水解1.5?4.5小时，灭酶活，得到酶解液；(3)将酶解液用活性炭进行脱腥、脱色，过滤，得到脱色液；(4)将脱色液与抗氧剂按按质量比为(95?105)：(0.05?0.5)混合均匀得到混合液；(5)将混合液超滤、冻干。本发明胶原蛋白肽的制备方法，产品得率高，抑菌性能好，工序合理，操作性强，生产周期短，生产过程无污染，适合工业化生产。
【专利说明】
胶原蛋白化的制备方法
技术领域
[0001] 本发明设及保健食品技术领域，具体设及一种胶原蛋白肤的制备方法。
【背景技术】
[0002] 胶原蛋白是一种广泛分布于动物的皮、毛、骨骼及血管中的纤维性蛋白质，能够对 机体起到支撑、修复、保护的作用。胶原蛋白是由氨基酸构成的，在一定条件下会水解产生 胶原蛋白肤和氨基酸。胶原蛋白肤，胶原蛋白的酶解产物，是一种天然的生物产品，具有胶 原蛋白诸多的生理活性和胶原蛋白所不具有的特性，因其显著的生理活性广泛应用于功能 性食品、保健食品、化妆品和药品。
[0003] 与胶原蛋白相比，胶原蛋白肤由于分子量较小，极性基团增加进而溶解性增强。将 胶原蛋白降解为胶原蛋白肤后，由于大量亲水基团外漏，胶原蛋白肤的吸水性和持水性明 显高于胶原蛋白，将其用于化妆品中可W保持皮肤水分，提高了皮肤的保湿效果。胶原蛋白 肤的乳化性和起泡性也使其可W作为食品添加剂改善食品的质量，使产品不但口感好，而 且营养丰富。胶原蛋白肤除了具有蛋白质的一般功能特性外还具有很多生物活性，如抗氧 化活性、抑制血管紧张素转化酶活性、抑制血小板凝结活性、抗肿瘤活性等。
[0004] 本发明提供了一种胶原蛋白肤的制备方法，易于吸收，并且蛋白的活性高。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种胶原蛋白肤的制备 方法。
[0006] 为实现上述目的，本发明所采用的技术解决方案是：
[0007] -种胶原蛋白肤的制备方法，包括W下步骤：
[000引（1)将鱼皮与水按质量比为1: (2-6)混合，在92-98°C下提取1-3小时，得到提取液， 并调节抑至6-9;
[0009] (2)将膜蛋白酶和酶保活剂加入到48-72 °C的提取液中水解1.5-4.5小时，灭酶活， 得到酶解液；
[0010] (3)将酶解液用活性炭进行脱腥、脱色，过滤，得到脱色液；
[0011] (4)将脱色液与抗氧剂按质量比为(95-105): (0.05-0.5)混合均匀得到混合液；
[0012] (5)将混合液超滤、冻干。
[OOU]所述的步骤(1)中调节抑值可W采用NaOH溶液、肥1溶液等。
[0014] 优选地，所述步骤(2)中膜蛋白酶的加入量为鱼皮质量的1-10%，酶保活剂的加入 量为鱼皮质量的0.2-2%。
[0015] 优选地，所述步骤(2)中的酶保活剂由丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖混合而成，所述丙 Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖的质量比为(1-3) :(1-3): (1-3)。
[0016] 优选地，所述步骤(4)中的抗氧剂由澄皮素、银杏黄酬、姜黄素混合而成，所述澄皮 素、银杏黄酬、姜黄素的质量比为(1-3): (1-3): (1-3)。
[0017] 优选地，所述步骤(3)中的活性炭与酶解液的固液比(0.01-0. l)g/ml。
[0018] 优选地，所述步骤(3)中的过滤为板框过滤机过滤，采用150-200目的滤布。
[0019] 优选地，所述步骤(5)中的超滤为用截留分子量50-150kD的超滤膜超滤。
[0020] 本发明胶原蛋白肤的制备方法，产品得率高，抑菌性能好，工序合理，操作性强，生 产周期短，生产过程无污染，适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0021] 实施例中各原料介绍：
[0022] 鱼皮采用轄鱼鱼皮，具体采用大西洋轄鱼的鱼皮。
[0023] 丙 Ξ醇，CAS 号：56-81-5。
[0024] 壳 Ξ 糖，CAS 号：41708-93-4。
[0025] 薦果四糖，CAS 号：13133-07-8。
[0026] 澄皮素 ，CAS 号：520-33-2。
[0027] 银杏黄酬，CAS 号:22910-60-7。
[002引姜黄素 ，CAS 号:458-37-7。
[0029] 膜蛋白酶，CAS号:9002-07-7，郑州好兄弟化工产品有限公司提供，酶活200U/mg。
[0030] 活性炭，CAS号:64365-11-3,采用青岛嘉德滤料有限公司生产的50目活性炭。
[0031] 实施例1
[0032] 胶原蛋白肤的制备方法，包括W下步骤：
[0033] (1)将鱼皮与去离子水按质量比为1:4混合加入反应蓋内，加热到95°C保溫提取2 小时，得到提取液，并用2mol/L的氨氧化钢溶液调节抑至8.0;
[0034] (2)将膜蛋白酶和酶保活剂加入到50°C的提取液中揽拌混合均匀，其中膜蛋白酶 的加入量为鱼皮质量的4.5%，酶保活剂的加入量为鱼皮质量的0.6% (即每100克鱼皮加入 膜蛋白酶4.5克、酶保活剂0.6克），保持溫度为60°C，水解2小时，得到水解后产物，然后将水 解后产物置于98°C水浴下10分钟灭酶，得到酶解液；
[0035] (3)将活性炭与酶解液按固液比为0.02混合（即每100ml酶解液加入2克活性炭）， 得到混合液;将混合液300转/分揽拌20分钟进行脱腥、脱色，然后采用板框过滤机过滤，滤 布为180目，得到脱色液；
[0036] (4)将脱色液与抗氧剂按按质量比为100:0.3混合均匀得到混合液；
[0037] (5)取脱色液用截留分子量lOOkD的超滤膜超滤，收集滤液，在-30°C下冻干，得到 实施例1制备的胶原蛋白肤。
[0038] 所述步骤(2)中的酶保活剂由丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖按质量比为1:1:1揽拌混 合均匀得到。
[0039] 所述步骤(4)中的抗氧剂由澄皮素、银杏黄酬、姜黄素按质量比为1:1:1揽拌混合 均匀得到。
[0040] 实施例2
[0041] 与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的酶保活剂由丙Ξ醇、壳Ξ糖按质量比 为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例2的胶原蛋白肤。
[0042] 实施例3
[0043] 与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的酶保活剂由丙Ξ醇、薦果四糖按质量 比为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例3的胶原蛋白肤。
[0044] 实施例4
[0045] 与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的酶保活剂由壳Ξ糖、薦果四糖按质量 比为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例4的胶原蛋白肤。
[0046] 实施例5
[0047] 与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的抗氧剂由澄皮素、银杏黄酬按质量比 为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例5的胶原蛋白肤。
[0048] 实施例6与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的抗氧剂由银杏黄酬、姜黄素 按质量比为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例6的胶原蛋白肤。
[0049] 实施例7
[0050] 与实施例1基本相同，区别仅仅在于:所述的酶保活剂由澄皮素、姜黄素按质量比 为1:1揽拌混合均匀得到。即可制得实施例7的胶原蛋白肤。
[00引]测试例1
[0052] 对实施例1-7中步骤（1)的鱼皮和步骤(5)制备的胶原蛋白肤进行称重，计算产品 得率，产品得率（％)=胶原蛋白肤的质量/鱼皮的质量X 100%，具体结果见表1。
[0053] 表1:产品得率测试表
[0化4]
[0化5]
[0056]比较实施例1与实施例2-4，实施例1 (丙；醇、壳；糖、薦果四糖复配)产品得率明 显高于实施例2-4(丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖中任意两种复配）。比较实施例1与实施例5-7， 实施例1(澄皮素、银杏黄酬、姜黄素)产品得率明显高于实施例2-4(澄皮素、银杏黄酬、姜黄 素中任意两种复配）。
[0化7] 测试例2
[005引将实施例1-7制备的胶原蛋白肤的制备方法，置于25°C，相对湿度85%环境下保藏 半年，采用《GB/T 4789.2-2010食品卫生微生物学检验菌落总数测定》进行菌落总数测试。 具体测试结果见表2。
[0化9]表2:菌落总数测试表cfu/g
[0060]_
[0061] 发明人意外的发现，在添加酶和酶保活剂后，菌落总数明显下降，产品的抑菌性能 明显提高，保质期得W大幅延长。比较实施例1和实施例2-4,实施例1(丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果 四糖复配)抑菌性能明显高于实施例2-4(丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖中任意两种复配）。比较 实施例1与实施例5-7,实施例1(澄皮素、银杏黄酬、姜黄素复配)抑菌性能明显高于实施例 2-4(澄皮素、银杏黄酬、姜黄素中任意两种复配）。
[0062] 测试例3
[0063] 对实施例1-7进行养颜润肤效果测试。
[0064] 每组对象:50名临床观察病例，症状表现为:皮肤松弛、油腻、颜色暗淡、出现雀斑、 红痘，其中男性25名，女性25名(年龄20-60岁）。
[0065] 测试对象每日早上9点、下午5点两次饮用，每组分别使用实施例1-4制备的胶原蛋 白肤的制备方法3克，取300mL溫度为45°C的水冲泡，连续一个月，进行测试。
[0066] 疗效标准：
[0067] (1)显效:皮肤更水润，出油量明显减少，白暫度提高30%;
[0068] (2)有效:皮肤水润，出油量减少，白暫度提高10% ;
[0069] (3)无效:治疗前后无明显症状改善，或加重。
[0070] 具体测试数据见表3。
[0071 ]表3:治疗效果测试结果表
[0072] ____
[0073] 实验证明，本发明的胶原蛋白肤的制备方法茶能够有效改善皮肤松弛、油腻、颜色 暗淡症状。比较实施例1与实施例2-4，实施例1 (丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖复配)治疗效果明 显优于实施例2-4(丙Ξ醇、壳Ξ糖、薦果四糖中任意两种复配）。比较实施例1与实施例5-7， 实施例1(澄皮素、银杏黄酬、姜黄素复配)治疗效果明显优于实施例2-4(澄皮素、银杏黄酬、 姜黄素中任意两种复配）。
【主权项】
1. 一种胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 将鱼皮与水按质量比为1: (2-6)混合，在92-98°C下提取1-3小时，得到提取液，并调 节pH至5-10; (2) 将胰蛋白酶和酶保活剂加入到48-72°C的提取液中水解1.5-4.5小时，灭酶活，得到 酶解液； (3) 将酶解液用活性炭进行脱腥、脱色，过滤，得到脱色液； (4) 将脱色液与抗氧剂按质量比为(95-105) :(0.05-0.5)混合均匀得到混合液； (5) 将混合液超滤、冻干； 所述的抗氧剂由橙皮素、银杏黄酮、姜黄素混合而成，所述橙皮素、银杏黄酮、姜黄素的 质量比为（1_3): (1-3): (1-3)。 所述的酶保活剂由丙三醇、壳三糖、蔗果四糖混合而成，所述丙三醇、壳三糖、蔗果四糖 的质量比为（1_3): (1-3): (1-3)。2. 如权利要求1所述的胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于:活性炭与酶解液的固液比 (0.01-0.l)g/ml〇3. 如权利要求1所述的胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于:所述的超滤为用截留分子 量50-150kD的超滤膜超滤。4. 如权利要求1所述的胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于:所述步骤(2)中酶的加入 量为鱼皮质量的1-10%，酶保活剂的加入量为鱼皮质量的0.2-2%。
【文档编号】C12P21/06GK106011209SQ201610564967
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年7月18日
【发明人】王斐芬
【申请人】王斐芬