一种低分子量海带岩藻多糖的制作方法

文档序号:13438794阅读:411来源:国知局

本发明属于多糖提取技术领域,具体涉及一种低分子量海带岩藻多糖。



背景技术:

我国是海带生产大国,经过数十年的发展已成为全球最大的海带生产国。据统计2009年中国海藻产量已经达到100万吨,其中海带产量占全球总产量的70%以上。已成为我国海洋经济重要的支柱产业之一,具有巨大的社会和经济效益。海带是一种营养丰富的食用褐藻,每100g海带中含有营养成分为:蛋白质8.2g,碳水化合物56.2g,钙117mg,铁150mg,碘25mg,还含有胡萝卜素、硫胺素、核黄素、尼克酸等维生素。营养丰富,特别是低热量、中蛋白、高矿物质,具有帮助消化、防止肥胖等食用功能,是一种理想的天然食品。

大分子量的岩藻多糖虽然具有一定的生物学活性,但由于其分子量大、溶解性差、不容易被吸收,所以在应用方面受到很大的限制。

现有技术如,中国发明授权专利文献,授权公告号cn103980370b,该发明涉及海藻多糖的回收,具体的说是一种从海带中回收岩藻多糖的方法。将海带加工废水进行过滤,滤液中加入聚阳离子液体使其充分沉淀;收集沉淀并溶于ph为2-6的酸性水溶液中充分混合,混合后经超滤截留并纯化即得到岩藻多糖。该发明中利用绿色环保型的离子液体从废水中回收得到岩藻多糖,离子液体用量少,并且可以重复利用,回收过程中乙醇的用量很少,避免了现有技术中存在的利用大量乙醇沉淀岩藻多糖的缺点,从而降低了生产成本,但是该方法的多糖得率还具有进一步提升空间。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种低分子量海带岩藻多糖,提取的多糖分子量低,易吸收,抗肿瘤和保健效果好,通过活性多肽提高海带岩藻多糖的破碎率,提高多糖得率和纯度,多糖制备成本低。

本发明为实现上述目的所采取的方案为:一种低分子量海带岩藻多糖,岩藻多糖制备步骤包括:细胞壁破碎;多糖粗提取;多糖提取和分离纯化,具体操作步骤如下:

1)细胞壁破碎:取岩藻粉末20-34份过50-60目网筛,用无水乙醇浸泡脱脂,固体残渣用水提取料液比1:8~10m/v,搅拌20-35min,密封静置2-4h,加入活性多肽,活性多肽加入量为岩藻粉末重量的0.03%~0.05%,活性多肽的氨基酸序列为:hshacasyycsknfchgscthsylcrvlhpgkncsr搅拌5-8min,蒸汽爆破处理,压力为2-2.8mpa,维持35-48s,得细胞破碎液;

2)多糖粗提取:将细胞破碎液中加入7-16份去离子水,于62℃~65℃条件下提取2~3h,提取2~4次,合并提取液,5000-6000r/min下离心7-10分钟,浓缩上清液,加入无水乙醇,至所含乙醇的体积分数为25%~28%,过滤,上清液中再加无水乙醇至体积分数为61%~63%,5800-7000r/min下离心10-14分钟,收集沉淀,真空干燥得岩藻粗多糖;

3)多糖提取:取干燥的粗多糖配成水溶液液料比5~8:100,溶液中加入4~6mol/l的cacl2纯化处理,8000-10000r/min下离心10-15分钟,取上清液,加入乙醇至其体积分数为60%~65%,用乙醇和丙酮浸洗沉淀,39℃~43℃干燥得到岩藻多糖;

4)分离纯化:将岩藻多糖制成水溶液,经deae-纤维素柱1.5×50cm初步分离,用去离子水和nacl溶液洗脱,将洗脱液浓缩,用透析袋3000-4500da透析去离子水45~50h,换洗3~4次,蒸馏水20~25h,透析物浓缩干燥得海带岩藻多糖。

作为优选,海带岩藻多糖作为抗肿瘤保健品添加剂的应用,海带岩藻多糖具有显著的促进机体免疫力和抗肿瘤的作用,海带岩藻多糖营养丰富,特别是低热量、中蛋白、高矿物质,具有帮助消化、防止肥胖的功能,利于提升加入的保健品的功效和经济价值。

与现有技术相比,本发明的有益效果为:1)在海带岩藻多糖提取前对岩藻粉进行蒸汽爆破处理,利用活性多肽提高蒸汽爆破的细胞破壁率;2)蒸汽爆破过程中,细胞壁的空隙中渗入的蒸汽有限,会导致破壁程度不高,通过加入活性多肽,活性多肽作用于海带岩藻细胞壁表面使其破裂,提高了岩藻破壁效果,使破壁时间大大缩短,细胞内容物释放的多,有利于提高多糖得率;3)利用酸水解法降解岩藻多糖,实现了多糖降解度显著提高,低分子量的多糖产率高,所得多糖的抗肿瘤活性高,尤其是对kb细胞生长的抑制作用效果明显;4)本发明的多糖提取方法操作简单,提取率高,提取成本低,提取的多糖分子量低,溶解性好,易吸收,抗肿瘤和保健效果好。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述:

实施例1:

一种低分子量海带岩藻多糖,岩藻多糖制备步骤包括:细胞壁破碎;多糖粗提取;多糖提取和分离纯化,具体操作步骤如下:

1)细胞壁破碎:取岩藻粉末29份过54目网筛,用无水乙醇浸泡脱脂,固体残渣用水提取料液比1:10m/v,搅拌28min,密封静置3h,加入活性多肽,活性多肽加入量为岩藻粉末重量的0.04%,活性多肽的氨基酸序列为:hshacasyycsknfchgscthsylcrvlhpgkncsr搅拌6min,蒸汽爆破处理,压力为2.2mpa,维持36s,得细胞破碎液;

2)多糖粗提取:将细胞破碎液中加入10份去离子水,于64℃条件下提取2h,提取2次,合并提取液,5400r/min下离心8分钟,浓缩上清液,加入无水乙醇,至所含乙醇的体积分数为26%,过滤,上清液中再加无水乙醇至体积分数为62%,6300r/min下离心12分钟,收集沉淀,真空干燥得岩藻粗多糖;

3)多糖提取:取干燥的粗多糖配成水溶液液料比6:100,溶液中加入5mol/l的cacl2纯化处理,9000r/min下离心12分钟,取上清液,加入乙醇至其体积分数为64%,用乙醇和丙酮浸洗沉淀,40℃干燥得到岩藻多糖;

4)分离纯化:将岩藻多糖制成水溶液,经deae-纤维素柱1.5×50cm初步分离,用去离子水和nacl溶液洗脱,将洗脱液浓缩,用透析袋3500da透析去离子水48h,换洗4次,蒸馏水24h,透析物浓缩干燥得海带岩藻多糖。

海带岩藻多糖作为抗肿瘤保健品添加剂的应用,海带岩藻多糖具有显著的促进机体免疫力和抗肿瘤的作用,海带岩藻多糖营养丰富,特别是低热量、中蛋白、高矿物质,具有帮助消化、防止肥胖的功能,利于提升加入的保健品的功效和经济价值。

实施例2:

一种低分子量海带岩藻多糖,岩藻多糖制备步骤包括:细胞壁破碎;多糖粗提取;多糖提取和分离纯化,具体优选操作步骤如下:

1)细胞壁破碎:取岩藻粉末30份过58目网筛,用无水乙醇浸泡脱脂,固体残渣用水提取料液比1:8m/v,搅拌30min,密封静置2h,加入活性多肽,活性多肽加入量为岩藻粉末重量的0.04%,活性多肽的氨基酸序列为:hshacasyycsknfchgscthsylcrvlhpgkncsr搅拌6min,蒸汽爆破处理,压力为2.6mpa,维持36s,得细胞破碎液;

2)多糖粗提取:将细胞破碎液中加入10份去离子水,于64℃条件下提取2h,提取3次,合并提取液,5800r/min下离心10分钟,浓缩上清液,加入无水乙醇,至所含乙醇的体积分数为26%,过滤,上清液中再加无水乙醇至体积分数为61%,7000r/min下离心12分钟,收集沉淀,真空干燥得岩藻粗多糖;

3)多糖提取:取干燥的粗多糖配成水溶液液料比6:100,溶液中加入4mol/l的cacl2纯化处理,10000r/min下离心14分钟,取上清液,加入乙醇至其体积分数为63%,用乙醇和丙酮浸洗沉淀,42℃干燥得到岩藻多糖;

4)分离纯化:将岩藻多糖制成水溶液,经deae-纤维素柱1.5×50cm初步分离,用去离子水和nacl溶液洗脱,将洗脱液浓缩,用透析袋3000da透析去离子水47h,换洗3次,蒸馏水20h,透析物浓缩干燥得海带岩藻多糖。

海带岩藻多糖作为抗肿瘤保健品添加剂的应用,海带岩藻多糖具有显著的促进机体免疫力和抗肿瘤的作用,海带岩藻多糖营养丰富,特别是低热量、中蛋白、高矿物质,具有帮助消化、防止肥胖的功能,利于提升加入的保健品的功效和经济价值。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知,在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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