本发明涉及生物领域，具体地，本发明涉及培养基及其制备方法。
背景技术：
益生菌是能够通过消化道定植于肠道的具有益生作用的活性微生物，双歧杆菌是现今普遍认可的益生菌。在食品领域，卫生部将双歧杆菌列入《可用于食品的菌种名单》、《可用于保健食品的菌种名单》及《可用于婴幼儿食品的菌种名单》中，市场上多种益生菌发酵饮料、益生菌酸奶、益生菌奶粉奶片等大多含双歧杆菌。
科学研究发现，健康人体消化道中的细菌有100余种，其数量达100兆以上，人体肠道微生物菌群种类和比例的失衡会带来许多健康问题。双歧杆菌存在于人体肠道中，在长期进化过程中与宿主形成了互惠共存的关系。婴幼儿肠道中双歧杆菌的数量较高，可以有效地减少婴幼儿肠道感染的发病率，但随着人年龄的增加变化显著，大量研究证明肠道菌群的紊乱会导致各种疾病的发生，而肠道菌群中益生菌数量充足可以预防和缓解一些疾病。如肠道中的双歧杆菌具有预防腹泻和减少便秘的双向调节功能，具有调整肠道功能紊乱作用。此外，肠道双歧杆菌可以抑制其它有害菌的生长，代谢乳糖缓解乳糖不耐症状，生成维生素、氨基酸等人体必需的营养物质，提高钙、磷、铁的利用率，促进维生素d的吸收。临床试验证明，补充双歧杆菌具有增强机体免疫力，降血压、降血脂，抗炎症、抗过敏、抗肿瘤等多种保健功能。在临床上，双歧杆菌活菌制剂已经广泛应用于腹泻和便秘等肠胃疾病的治疗。
目前已经发现的双歧杆菌有30多个亚型，大多数分离自婴儿粪便样品。但由于双歧杆菌是严格厌氧菌，对生长环境和营养条件的要求苛刻，从菌群复杂的粪便样品中分离获得双歧杆菌困难极大，分离效率低且容易丢失目标菌。因此分离双歧杆菌时，通常会在培养基中添加特定抗生素来抑制一些其它肠道细菌(大肠埃希氏菌、肠球菌等)的生长，以保证双歧杆菌的营养。目前用于双歧杆菌分离的培养基中，大多含莫匹罗星、丙酸钠、硫酸新霉素、巴龙霉素、硫霉素、硫入龙霉素等抗生素的一种或多种，在分离过程中容易增强菌株的耐药性，而双歧杆菌携带的抗生素耐药基因可能会转移给宿主肠道中的致病菌，给宿主健康带来隐患。双歧杆菌作为一种大众认可的益生菌，已经广泛的应用在食品工业和医疗卫生领域。外源性双歧杆菌进入人体肠道发挥益生功效的同时，其安全性问题尤其重要。
紫甘薯，又称紫薯，是旋花科番薯属一年生草本植物，富含维生素、矿物质、碳水化合物和花青素等，具有栽培简单、适应性广、产量高等优点。目前主要集中应用在食用、药用和食品研发中。紫薯淀粉是选用新鲜优质的紫薯，经去皮、分离、提取、干燥等工艺加工而成，保留了紫薯中的碳水化合物、维生素、矿物质、花青素等，对双歧杆菌的增殖有促进作用。紫薯花青素，是一种天然色素，在酸性条件下颜色偏红，在碱性条件下显蓝色，也是理想的指示剂。冻干紫薯花青素是采用冻干工艺制备的，没有经过长时间高温处理，活性成分高，功效性理想。
技术实现要素：
本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：
发明人发现，紫薯淀粉对双歧杆菌的增殖有促进作用，冻干紫薯花青素可以替代抗生素起到抑制杂菌的作用，同时随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用。基于上述问题的发现，发明人提出了一种培养基，该培养基不含抗生素，通过添加冻干紫薯花青素可替代抗生素起到抑制杂菌的作用，同时巧妙地利用花青素随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用，避免添加碳酸钙或指示剂(刃天青、溴甲酚紫、溴甲酚绿、石蕊、mtt、ttc等)；且紫薯淀粉对双歧杆菌增殖有促进作用，从而利用该培养基能够从粪便样品中更方便、更安全地分离获得双歧杆菌。
在本发明的第一方面，本发明提出了一种培养基。根据本发明的实施例，所述培养基包括：抑菌剂，所述抑菌剂包括盐和花青素。发明人发现，花青素可替代抗生素起到抑制杂菌的作用，同时巧妙地利用花青素随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用，避免了使用刃天青、溴甲酚紫、溴甲酚绿、石蕊、mtt、ttc等指示剂。根据本发明实施例的培养基能够从粪便样品中更方便、更安全地分离获得双歧杆菌。
根据本发明的实施例，上述培养基还可以包括下列技术特征至少之一：
根据本发明的实施例，所述花青素为冻干紫薯花青素。发明人发现，不同来源的花青素对肠道菌的抑制程度不同，其中冻干紫薯花青素的对于对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、肠球菌、链球菌等一些好氧菌的抑制效果更好。
盐无特别要求，只要具有抑菌效果即可。根据本发明的具体实施例，所述盐包括氯化锂。氯化锂与花青素一起起到抑菌的作用。
根据本发明的实施例，进一步包括淀粉，所述淀粉为紫薯淀粉。发明人发现，紫薯淀粉对双歧杆菌的增殖有促进作用。
根据本发明的实施例，所述培养基包括：紫薯淀粉10重量份～20重量份；冻干紫薯花青素1重量份～4重量份；胰蛋白胨5重量份～15重量份；酪蛋白磷酸肽5重量份～10重量份；大豆低聚糖5重量份～15重量份；氯化钠5重量份；氯化锂3重量份；琼脂15重量份。发明人发现，上述成分在上述重量份的条件下，冻干紫薯花青素能抑制其他细菌的生长，并不会对双歧杆菌的生长造成抑制，且紫薯淀粉对双歧杆菌的增殖有促进作用，且上述重量份的花青素能够随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用，避免了使用碳酸钙或指示剂(刃天青、溴甲酚紫、溴甲酚绿、石蕊、mtt、ttc等)。
根据本发明的实施例，所述培养基进一步包括吐温80，所述吐温80的含量为1重量份。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备培养基的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：1)将紫薯淀粉、水、胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂以及琼脂进行第一混合、ph调节、杀菌处理，得到混合料液a；2)将花青素与水进行第二混合，得到溶液b；3)将混合料液a与溶液b进行第三混合处理，以便得到所述培养基，其中，所述花青素为冻干紫薯花青素，所述冻干紫薯花青素的用量为1重量份～4重量份，所述紫薯淀粉的用量为10重量份～20重量份；所述胰蛋白胨的用量为5重量份～15重量份；所述酪蛋白磷酸肽的用量为5重量份～10重量份；所述大豆低聚糖的用量为5重量份～15重量份；所述氯化钠的用量为5重量份；所述氯化锂的用量为3重量份；所述琼脂的用量为15重量份，基于1000ml的培养基，所述吐温80的用量为1ml。发明人发现，上述成分在上述重量份的条件下，冻干紫薯花青素能抑制其他细菌的生长，并不会对双歧杆菌的生长造成抑制，且紫薯淀粉对双歧杆菌的增殖有促进作用，且上述重量份的冻干紫薯花青素能够随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用，避免了使用碳酸钙或指示剂(刃天青、溴甲酚紫、溴甲酚绿、石蕊、mtt、ttc等)。根据本发明实施例的方法制备得到的培养基能够从粪便样品中更方便、更安全(即不需要添加抗生素避免了在分离过程中容易增强菌株的耐药性，进而避免了双歧杆菌携带的抗生素耐药基因可能会转移给宿主肠道中的致病菌)地分离获得双歧杆菌。
根据本发明的实施例，上述方法还可以包括下列技术特征至少之一：
根据本发明的实施例，所述第一混合处理是通过如下方式进行的：将紫薯淀粉进行糊化处理；糊化后的紫薯淀粉与所述胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂以及琼脂进行第四混合处理；用所述水将第四混合处理后的料液进行定容处理，定容至1000ml。在常温下淀粉不溶于水，直接与其他原料混合容易发生结团、分散不均匀的现象；发明人发现，将紫薯淀粉预先进行糊化处理，再与胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂以及琼脂进行混合，可使淀粉与其它营养成分溶解分散得更均匀。
根据本发明的实施例，所述糊化处理是将紫薯淀粉溶解在75-80℃的水中，搅拌溶解糊化。发明人发现，在上述温度下，紫薯淀粉溶解和糊化更彻底。
根据本发明的实施例，所述ph调节处理后的ph为6.5-7.0。双歧杆菌生长的最适ph为6.5-7.0，发明人发现，当ph<6.5时，培养基颜色偏红，挑选菌落时区分不明显；ph>7.0时，培养基颜色很深，呈蓝紫色，观察菌落形态受影响。
根据本发明的实施例，所述杀菌处理是在温度为115℃的条件下进行15min。发明人发现，上述温度上述时间下进行高压灭菌，能最大程度杀灭不需要菌种。
根据本发明的实施例，将混合料液a与溶液b进行第三混合处理前，所述混合料液a预先冷却至40-45℃。发明人发现，将温度降至40-45℃再与溶液b混合，不会破坏花青素的结构。
根据本发明的实施例，所述溶液b预先经过滤膜过滤除菌。发明人发现，过滤膜过滤除菌能最大程度地除去溶液b中的微生物。
根据本发明的实施例，所述将混合料液a与溶液b进行第三混合处理，所述混合料液a与溶液b的体积比为19:1。
根据本发明的实施例，所述溶液b预先配置成浓度为20、40、60、80mg/ml的溶液。
根据本发明的实施例，所述培养基中冻干紫薯花青素的浓度为1～4mg/ml。发明人发现，在上述浓度条件下，冻干紫薯花青素能抑制其他菌种的生长，并不会对双歧杆菌的生长造成抑制。
在本发明的第三方面，本发明提出了一种制备培养基的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：1)将紫薯淀粉与75-80℃蒸馏水进行搅拌溶解糊化；2)在步骤1)中得到的淀粉糊化液中加入胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂和琼脂；3)用蒸馏水将步骤2)得到的混合料液定容至1000ml；4)将步骤3)得到的混合料液ph调节至6.5-7.0；5)将步骤4)得到的混合料液在温度为115℃的条件下杀菌15min；之后冷却至40～45℃，以便得到混合料液a；6)将冻干紫薯花青素溶解于蒸馏水，得到浓度为20、40、60、80mg/ml的溶液，进行滤膜过滤除菌，以便得到溶液b；7)将所述混合料液a与溶液b按体积比为19:1进行第五混合处理，配置成浓度为1～4mg/ml的溶液，静置冷却，以便得到所述培养基；其中，所述冻干紫薯花青素的用量为1重量份～4重量份，所述紫薯淀粉的用量为10重量份～20重量份；所述胰蛋白胨的用量为5重量份～15重量份；所述酪蛋白磷酸肽的用量为5重量份～10重量份；所述大豆低聚糖的用量为5重量份～15重量份；所述氯化钠的用量为5重量份；所述氯化锂的用量为3重量份；所述琼脂的用量为15重量份；基于1000ml的培养基，所述吐温80的用量为1ml。发明人发现，上述成分在上述重量份的条件下，冻干紫薯花青素能抑制其他细菌的生长，并不会对双歧杆菌的生长造成抑制，且紫薯淀粉对双歧杆菌的增殖有促进作用，且上述重量份的冻干紫薯淀粉能够随乳酸菌产酸发生颜色变化起到指示剂的作用，避免了使用碳酸钙或指示剂(刃天青、溴甲酚紫、溴甲酚绿、石蕊、mtt、ttc等)。根据本发明实施例的方法制备得到的培养基能够从粪便样品中分离获得双歧杆菌。
在本发明的第四方面，本发明提出了一种分离肠道双歧杆菌的方法。根据本发明的实施例，将待分离样品接种在前面所述的培养基或通过前面所述的方法制备获得的培养基中进行分离纯化处理，将分离纯化后所获得菌落进行耐氧筛选，以便获得厌氧菌，将所述厌氧菌接种于富集培养基进行富集培养，以便获得所述双歧杆菌。需要说明的是，本发明涉及的菌株分离步骤如下：该发明中涉及的菌株分离步骤如下：1)样品处理：称量1g粪便样品溶解于99ml缓冲蛋白水溶液中，用十倍稀释法制备10的3～6次稀释液；2)涂布培养：取样品稀释液0.1ml涂布于发明所述琼脂平板，倒置于厌氧盒37℃培养48h～72h；3)分离纯化：挑取红色、橘红色菌落划线纯化；4)耐氧试验：分别置于有氧或厌氧条件下培养，选择只在厌氧条件下生长的菌落；5)富集培养：挑单菌落接种于tpy液体培养基(tpy液体培养基配方g/l：水解酪蛋白：10，植物东:5，酵母粉:2，葡萄糖:5，磷酸氢二钾:2，氯化镁:0.5，硫酸锌:0.25，氯化钙:0.15，吐温80:1，半胱氨酸:0.5)中(上层用液体石蜡隔离空气)，37℃恒温培养24-48h；6)菌种保藏：富集培养液离心收集菌泥，加70％甘油保护，-80℃保藏。根据本发明实施例的方法，可以从粪便样品中更方便、更安全地分离获得双歧杆菌。
根据本发明的实施例，上述方法进一步包括如下附加技术特征至少之一：
根据本发明的实施例，所述待分离样品预先经过稀释处理。
根据本发明的实施例，稀释处理后样品的浓度为1*10-3～1*10-6g/ml。
需要说明的是，本发明中涉及的菌株鉴定方法包含以下步骤：
1.形态学鉴定：菌株进行革兰氏染色，油镜观察菌体颜色、形态、排列情况等特征，菌体细胞呈棒状杆，一端或两端粗壮或开叉，有x、y、v型的初步鉴定为双歧杆菌；
2.全自动微生物分析系统鉴定：挑取一个单菌落划线于哥伦比亚血平板上，37℃厌氧培养48h；无菌棉签蘸取新鲜菌落，研磨在0.45％nacl溶液中配成2.7～3.0mcf菌悬液；选择厌氧菌鉴定卡，上机测试；分析鉴定报告。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
实施例1：
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉10g，
冻干紫薯花青素1g，
胰蛋白胨15g，
酪蛋白磷酸肽5g，
吐温801ml，
大豆低聚糖15g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：
1.按配方称取紫薯淀粉，溶解于75-80℃蒸馏水中，搅拌溶解糊化，
2.在淀粉糊化液中加入胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂和琼脂，
3.蒸馏水定容至1000ml，
4.调节ph至6.5-7.0，
4.培养基经115℃，15min高压灭菌，然后冷却至40-45℃备用，
5.冻干紫薯花青素溶解于蒸馏水，配制成20mg/ml的高浓度溶液，滤膜过滤除菌，
6.按1:19转接至备用培养基中，配制成终浓度为1mg/ml的培养基溶液，
7.倾注平板，静置冷却备用。
分离结果：分离平板上菌落周边颜色不同，有蓝色、红色、橘红色，挑选红色、橘红色边菌落进行纯化，分离获得双歧杆菌。
实施例2：
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉20g，
冻干紫薯花青素2g，
胰蛋白胨10g，
酪蛋白磷酸肽8g，
大豆低聚糖5g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：
1.按配方称取紫薯淀粉，溶解于75-80℃蒸馏水中，搅拌溶解糊化，
2.在淀粉糊化液中加入胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂和琼脂，
3.蒸馏水定容至1000ml，
4.调节ph至6.5-7.0，
4.培养基经115℃，15min高压灭菌，然后冷却至40-45℃备用，
5.冻干紫薯花青素溶解于蒸馏水，配制成40mg/ml的高浓度溶液，滤膜过滤除菌，
6.按1:19转接至备用培养基中，配制成终浓度为2mg/ml的培养基溶液，
7.倾注平板，静置冷却备用。
分离结果：分离平板上菌落周边颜色不同，有蓝色、红色、橘红色，挑选红色、橘红色边菌落进行纯化，减少挑选菌落数量小，减轻工作量。
实施例3：
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉15g，
冻干紫薯花青素3g，
胰蛋白胨8g，
酪蛋白磷酸肽10g，
吐温801ml，
大豆低聚糖10g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：
1.按配方称取紫薯淀粉，溶解于75-80℃蒸馏水中，搅拌溶解糊化，
2.在淀粉糊化液中加入胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂和琼脂，
3.蒸馏水定容至1000ml，
4.调节ph至6.5-7.0，
4.培养基经115℃，15min高压灭菌，然后冷却至40-45℃备用，
5.冻干紫薯花青素溶解于蒸馏水，配制成60mg/ml的高浓度溶液，滤膜过滤除菌，
6.按1:19转接至备用培养基中，配制成终浓度为3mg/ml的培养基溶液，
7.倾注平板，静置冷却备用。
分离结果：分离平板上菌落周边颜色不同，有蓝色、红色、橘红色，挑选红色、橘红色边菌落进行纯化，分离获得双歧杆菌。
实施例4：
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉15g，
冻干紫薯花青素4g，
胰蛋白胨5g，
酪蛋白磷酸肽10g，
大豆低聚糖10g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：
1.按配方称取紫薯淀粉，溶解于75-80℃蒸馏水中，搅拌溶解糊化，
2.在淀粉糊化液中加入胰蛋白胨、酪蛋白磷酸肽、吐温80、大豆低聚糖、氯化钠、氯化锂和琼脂，
3.蒸馏水定容至1000ml，
4.调节ph至6.5-7.0，
4.培养基经115℃，15min高压灭菌，然后冷却至40-45℃备用，
5.冻干紫薯花青素溶解于蒸馏水，配制成80mg/ml的高浓度溶液，滤膜过滤除菌，
6.按1:19转接至备用培养基中，配制成终浓度为4mg/ml的培养基溶液，
7.倾注平板，静置冷却备用。
分离结果：分离平板上菌落周边颜色不同，有蓝色、红色、橘红色，挑选红色、橘红色边菌落进行纯化，分离获得双歧杆菌。
实施例5：
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉10g，
冻干紫薯花青素2g，
胰蛋白胨15g，
酪蛋白磷酸肽5g，
吐温801ml，
大豆低聚糖5g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例2。
分离结果：分离平板上菌落数量适中，菌落周边颜色不同，有蓝色、红色、橘红色，挑选红色、橘红色边菌落进行纯化，分离获得双歧杆菌。
对比实施例1：(未添加冻干紫薯花青素)
分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉10g，
胰蛋白胨15g，
酪蛋白磷酸肽5g，
吐温801ml，
大豆低聚糖15g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例1。
分离结果：未添加冻干紫薯花青素，对肠道菌的抑菌作用弱，培养基上菌落繁多，未分离获得双歧杆菌。
对比实施例2：(未添加紫薯淀粉)
分离培养基配方为(每升含)：
冻干紫薯花青素3g，
胰蛋白胨10g，
酪蛋白磷酸肽8g，
吐温801ml，
葡萄糖10g，
大豆低聚糖15g，
氯化钠5g，
莫匹罗星锂盐40mg，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例2。
分离结果：培养基上菌落多为白色、圆形、光滑菌落，颜色没有区分，挑选菌落数量大，工作量大。
对比实施例3：(用玉米淀粉替代紫薯淀粉)
分离培养基配方为(每升含)：
玉米淀粉15g，
冻干紫薯花青素3g，
胰蛋白胨8g，
酪蛋白磷酸肽10g，
吐温801ml，
大豆低聚糖10g，
氯化钠5g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例3
分离结果：紫薯淀粉对双歧杆菌增殖具有促进作用，而玉米淀粉没有同等功效，培养基上菌落数量低于实施例3，挑选特征菌落进行鉴定，没有获得双歧杆菌。
对比实施例4：(冻干紫薯花青素添加量过多)
分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉15g，
冻干紫薯花青素6g，
胰蛋白胨5g，
酪蛋白磷酸肽10g，
大豆低聚糖10g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例4。
分离结果：过多的紫薯花青素抑制了双歧杆菌的生长，培养基上菌落数量低于实施例4，挑选特征菌落进行鉴定，没有获得双歧杆菌。
对比实施例5：(用冻干蓝莓花青素替代冻干紫薯花青素)
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉10g，
冻干蓝莓花青素2g，
胰蛋白胨15g，
酪蛋白磷酸肽5g，
吐温801ml，
大豆低聚糖5g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例2。
分离结果：培养基上菌落数量大于实施例5，对杂菌的抑制效果不及冻干紫薯花青素，挑选特征菌落进行鉴定，没有获得双歧杆菌。
对比实施例6：(冻干紫薯花青素添加量过少)
(1)分离培养基配方为(每升含)：
紫薯淀粉10g，
冻干紫薯花青素0.5g，
胰蛋白胨15g，
酪蛋白磷酸肽5g，
吐温801ml，
大豆低聚糖5g，
氯化钠5g，
氯化锂3g，
琼脂15g，
蒸馏水定容至1000ml。
(2)培养基制备方法包含以下步骤：同实施例1。
分离结果：培养基上菌落数量大于实施例1，对杂菌的抑制效果不明显，挑选特征菌落进行鉴定，没有获得双歧杆菌。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。