技术特征：
技术总结
提供一种核酸测序的方法。其特征在于以下步骤：(1)通过逐步酶消化核酸生成单核苷三磷酸流；(2)通过在聚合酶和连接酶存在下，使至少一个单核苷三磷酸与相应的初级探针反应，产生至少一个基本上双链的初级寡核苷酸占用探针，所述初级探针包含(a)第一单链寡核苷酸，其包含限制性核酸内切酶切口位点、用于捕获单核苷三磷酸的单核苷酸捕获位点和并置于所述捕获位点任一侧的寡核苷酸侧翼区，和(b)能够与第一寡核苷酸侧翼区杂交的第二和第三单链寡核苷酸；(3)用切口限制性核酸内切酶在切口位点切割占用的初级探针的第一寡核苷酸链，以产生分离的第一寡核苷酸组分；(4)将步骤(3)产生的第一寡核苷酸组分与占用探针的互补链分离；(5)通过在连接酶存在下使至少一个分离的第一寡核苷酸组分与相应的二级探针反应产生至少一个基本上双链的二级占用探针，所述二级探针包含(c)带有基本上不可检测状态的荧光团的互补第四寡核苷酸，和任选的(d)与第四寡核苷酸至少部分互补的第五寡核苷酸；(6)用具有双链核酸外切活性的酶消化占用的二级探针以产生可检测状态的荧光团和至少部分为第四寡核苷酸的互补序列的单链第六寡核苷酸；和(7)检测步骤(6)中释放的荧光团。该方法在微滴中有利地进行。还描述了由初级和二级探针组成的相应生物探针系统。
技术研发人员：巴纳比·巴姆福思;卡梅伦·亚历山大·弗雷林
受保护的技术使用者：贝斯4创新公司
技术研发日：2017.09.06
技术公布日：2019.05.21