发明领域本发明涉及具有药物活性的新的四氢异喹啉和四氢二氮杂萘化合物、它们的制备、包含它们的药物组合物以及它们作为药物的潜在用途。本发明涉及式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1、r2、r3、u、v、w、x和y如下所述。乙型肝炎病毒(hbv)是有包膜的、部分双链的dna病毒。紧凑的3.2kbhbv基因组由四个重叠的开放阅读框(orf)组成，其编码核、聚合酶(pol)、包膜和x-蛋白。polorf是最长的并且包膜orf位于其内，而x和核orf与polorf重叠。hbv的生命周期有两个主要事件：1)由松弛环状(rcdna)生成闭合环状dna(cccdna)，和2)前基因组rna(pgrna)逆转录生成rcdna。在宿主细胞感染之前，hbv基因组以rcdna的形式存在于病毒体内。已经确定hbv病毒体能够通过非特异性结合至存在于人肝细胞表面的带负电荷的蛋白聚糖(schulze,a.,p.gripon&s.urban.hepatology,46,(2007),1759-68)和经由hbv表面抗原(hbsag)特异性结合至肝细胞牛磺胆酸钠共转运多肽(ntcp)受体(yan,h.等人,jvirol,87,(2013),7977-91)而进入到宿主细胞中。一旦病毒体进入细胞，病毒核和衣壳化的rcdna通过宿主因子经由核定位信号，通过impβ/impα核转运受体转运到细胞核中。在细胞核内，宿主dna修复酶将rcdna转化为cccdna。cccdna充当所有病毒mrna的模板，因此，它是受感染个体中hbv持久性的原因。由cccdna生成的转录物被分成两类：前基因组rna(pgrna)和亚基因组rna。亚基因组转录物编码三种包膜(l、m和s)和x蛋白，并且pgrna编码前核、核和pol蛋白(quasdorff,m.&u.protzer.jviralhepat,17,(2010),527-36)。hbv基因表达或hbvrna合成的抑制导致hbv病毒复制和抗原生成的抑制(mao,r.等人,plospathog,9,(2013),e1003494；mao,r.等人,jvirol,85,(2011),1048-57)。例如，ifn-α显示通过减少从hbv共价闭合环状dna(cccdna)微型染色体的pgrna和亚基因组rna的转录而抑制hbv复制和病毒hbsag生成。(belloni,l.等人,jclininvest,122,(2012),529-37；mao,r.等人,jvirol,85,(2011),1048-57)。所有hbv病毒mrna均被封端并多聚腺苷酸化，然后输出至细胞质进行翻译。在细胞质中，新病毒体的组装被引发并且新生的pgrna与病毒pol一起包装，从而可以开始经由单链dna中间体将pgrna逆转录成rcdna。含有rcdna的成熟核壳体被细胞脂质以及病毒l、m和s蛋白包封，然后感染性hbv颗粒通过在细胞内膜出芽释放(locarnini,s.seminliverdis,(2005),25suppl1,9-19)。有趣的是，也生成非感染性颗粒，其在数量上远远超过感染性病毒体。这些空的、包封的颗粒(l、m和s)被称为亚病毒颗粒。重要的是，由于亚病毒颗粒与感染性颗粒具有相同的包膜蛋白，因此推测它们可作为宿主免疫系统的诱饵并且已被用于hbv疫苗。s、m和l包膜蛋白由含有3个不同起始密码子的单个orf表达。所有三种蛋白在它们的c-末端共享一个226aa序列，即s-结构域。m和l具有额外的pre-s结构域，分别为pre-s2以及pre-s2和pre-s1。然而，具有hbsag表位的是s-结构域(lambert,c.&r.prange.virolj,(2007),4,45)。病毒感染的控制需要宿主先天免疫系统的密切监视，其可以在感染后数分钟至数小时内产生响应以影响病毒的初始生长，并且限制慢性和持久感染的发展。尽管目前有基于ifn和核苷(核苷酸)类似物的治疗，但是乙型肝炎病毒(hbv)感染仍然是世界范围内的主要健康问题，其涉及估计约3亿5千万慢性携带者，他们具有更高的肝硬化和肝细胞癌的风险。肝细胞和/或肝内免疫细胞响应于乙型肝炎病毒感染而分泌抗病毒细胞因子在被感染肝脏的病毒清除中起关键作用。然而，由于病毒采用了多种逃避策略来对抗宿主细胞识别系统和随后的抗病毒响应，慢性感染的患者仅显示出弱的免疫响应。许多观察结果显示若干hbv病毒蛋白可以通过干扰病毒识别信号转导系统并随后干扰干扰素(ifn)抗病毒活性而对抗最初的宿主细胞响应。其中，hbv空亚病毒颗粒(svp，hbsag)的过度分泌可能参与在慢性感染患者(chb)中观察到的免疫耐受状态的维持。持续暴露于hbsag和其他病毒抗原可以导致hbv-特异性t细胞缺失或导致进行性的功能受损(kondo等人,journalofimmunology(1993),150,4659–4671；kondo等人,journalofmedicalvirology(2004),74,425–433；fisicaro等人,gastroenterology,(2010),138,682-93)。此外，还报道了hbsag通过直接相互作用而抑制免疫细胞如单核细胞、树突细胞(dc)和自然杀伤(nk)细胞的功能(opdenbrouw等人,immunology,(2009b),126,280-9；woltman等人,plosone,(2011),6,e15324；shi等人,jviralhepat.(2012),19,e26-33；kondo等人,isrngasteroenterology,(2013),文章编号935295)。hbsag定量是用于慢性乙型肝炎的预后和治疗响应的重要生物标志物。然而，在慢性感染患者中很少观察到hbsag消失和血清转化的实现，其仍然是治疗的终极目标。当前疗法如核苷(核苷酸)类似物是抑制hbvdna合成但不降低hbsag水平的分子。即使采用延长的治疗，核苷(核苷酸)类似物所显示的hbsag清除率也与自然观察到的那些相当(在-1％-2％之间)(janssen等人,lancet,(2005),365,123-9；marcellin等人,n.engl.j.med.,(2004),351,1206-17；buster等人,hepatology,(2007),46,388-94)。已经公布了一些关于hbsag抑制剂的专利申请，包括新的二氢喹嗪酮类化合物(wo2015/113990,wo2015/173164)、新的哒嗪酮和三嗪酮类化合物(wo2016/023877)、新的6,7-二氢苯并[a]喹嗪-2-酮衍生物(wo/2016/071215)、新的四氢吡啶并嘧啶和四氢吡啶并吡啶类化合物(wo2016/107832)和新的2-氧代-6,7-二氢苯并[a]喹嗪-3-甲酸衍生物(wo2016/128335)，表明该领域正在进行一些早期的探索性尝试。但是，没有被批准的商业产品。因此，仍然存在靶向hbsag来治疗hbv的医学需求(wieland,s.f.&f.v.chisari.jvirol,(2005),79,9369-80；kumar等人,jvirol,(2011),85,987-95；woltman等人,plosone,(2011),6,e15324；opdenbrouw等人,immunology,(2009b),126,280-9)。发明概述本发明的目的是新的式i化合物，它们的制备，基于本发明化合物的药物及其制备以及式i化合物作为hbv抑制剂以及用于治疗或预防乙型肝炎病毒感染的用途。式i化合物显示出优异的抗hbv活性。本发明涉及式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1和r2独立地选自氨基、氨基羰基c1-6烷氧基、氨基羰基c1-6烷氧基、羧基c1-6烷氧基、c1-6烷氧基、c1-6烷氧基c1-6烷基、c1-6烷氧基c3-7环烷基、c1-6烷基、c1-6烷基氨基、c1-6烷基c3-7环烷基、c3-7环烷氧基、c3-7环烷基、c3-7环烷基c1-6烷氧基、氰基、二c1-6烷基氨基、卤代c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤素和氢；r3是c1-6烷基、c3-7环烷基或氢；u是n或cr4，其中r4是c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-7环烷氧基、c3-7环烷基、c1-6烷基氨基、氰基、二c1-6烷基氨基、卤代c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤素或氢；v是n或cr5，其中r5是c1-6烷基、c3-7环烷基或氢；w、x和y独立地选自n或ch。发明详述定义本文所用的单独的或在组合中的术语“c1-6烷基”表示包含1-6个、特别是1-4个碳原子的饱和直链或支链烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、1-丁基、2-丁基、叔丁基等。具体的“c1-6烷基”是甲基、乙基、异丙基和叔丁基。单独的或在组合中的术语“c3-7环烷基”是指包含3-7个碳原子、特别是3-6个碳原子的饱和碳环，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。具体的“c3-7环烷基”基团是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。单独的或在组合中的术语“c1-6烷氧基”表示基团c1-6烷基-o-，其中“c1-6烷基”如以上所定义；例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。具体的“c1-6烷氧基”基团是甲氧基、乙氧基和丙氧基。术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘。术语“卤代c1-6烷基”是指c1-6烷基基团，其中c1-6烷基基团的至少一个氢原子被相同或不同的卤原子、特别是氟原子替代。卤代c1-6烷基的实例包括一氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、3,3-二氟丙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。具体的“卤代c1-6烷基”基团是二氟甲基或三氟甲基。术语“卤代c1-6烷氧基”是指c1-6烷氧基基团，其中c1-6烷氧基基团的至少一个氢原子被相同或不同的卤原子、特别是氟原子替代。卤代c1-6烷氧基的实例包括一氟-、二氟-或三氟-甲氧基、-乙氧基或-丙氧基，例如氟丙氧基、二氟丙氧基、三氟丙氧基、氟乙氧基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基。具体的“卤代c1-6烷氧基”基团是3-氟丙氧基、3,3-二氟丙氧基、3,3,3-三氟丙氧基、2-氟乙氧基、2,2-二氟乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基。术语“氨基”是指式-nr’r”的基团，其中r’和r”独立地是氢、c1-6烷基、c1-6烷基、c1-6烷氧基、c3-7环烷基、杂c3-7环烷基、芳基或杂芳基。或者，r’和r”与它们所连接的氮一起可以形成杂c3-7环烷基。单独的或在组合中的术语“羰基”是指基团-c(o)-。单独的或在组合中的术语“氰基”是指基团-cn。术语“对映体”是指化合物的两种彼此互为不能重叠的镜像的立体异构体。术语“非对映体”是指具有两个或多个手性中心并且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱特性和反应性。本发明的化合物可以以它们的可药用盐的形式存在。术语“可药用盐”是指保留了式i化合物的生物学效力和特性并且由适宜的无毒有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规的酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐包括例如衍生自无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些，以及衍生自有机酸例如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等的那些。碱加成盐包括衍生自铵、钾、钠和季铵氢氧化物，例如，四甲基氢氧化铵的那些。将药物化合物化学修饰成盐是制药化学家所熟知的一种用来提高化合物的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性的技术。其例如描述于bastinr.j.等人,organicprocessresearch&development(有机工艺研发)2000,4,427-435。特别是式i化合物的钠盐。包含一个或多个手性中心的通式i的化合物可以以外消旋体、非对映体混合物或光学活性的单一异构体的形式存在。可以根据已知方法将外消旋体分离成对映体。具体地讲，通过与光学活性的酸例如d-或l-酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸反应从外消旋混合物形成可以通过结晶分离的非对映异构体盐。hbsag的抑制剂本发明提供了(i)具有通式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体:其中r1和r2独立地选自氨基、氨基羰基c1-6烷氧基、氨基羰基c1-6烷氧基、羧基c1-6烷氧基、c1-6烷氧基、c1-6烷氧基c1-6烷基、c1-6烷氧基c3-7环烷基、c1-6烷基、c1-6烷基氨基、c1-6烷基c3-7环烷基、c3-7环烷氧基、c3-7环烷基、c3-7环烷基c1-6烷氧基、氰基、二c1-6烷基氨基、卤代c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤素和氢；r3是c1-6烷基、c3-7环烷基或氢；u是n或cr4，其中r4是c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-7环烷氧基、c3-7环烷基、c1-6烷基氨基、氰基、二c1-6烷基氨基、卤代c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、卤素或氢；v是n或cr5，其中r5是c1-6烷基、c3-7环烷基或氢；w、x和y独立地选自n或ch。本发明的又一个实施方案是(ii)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1和r2独立地选自氨基羰基c1-6烷氧基、c1-6烷氧基、c1-6烷氧基c3-7环烷基、c1-6烷基、c1-6烷基氨基、c3-7环烷基、c3-7环烷基c1-6烷氧基、氰基、二c1-6烷基氨基、卤代c1-6烷氧基、卤素和氢；r3是c1-6烷基或氢；u是n或cr4，其中r4是c1-6烷氧基、c3-7环烷基、二c1-6烷基氨基、卤素或氢；v是n或ch；w、x和y独立地选自n或ch。本发明的另一个实施方案是(iii)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1和r2独立地选自氨基羰基甲氧基、甲氧基、甲氧基环丁基、甲基、甲基氨基、环丙基、环丙基甲氧基、氰基、二甲基氨基、二氟乙氧基、氯、氟和氢；r3是乙基、甲基或氢；u是n或cr4，其中r4是甲氧基、环丙基、二甲基氨基、氯、氟或氢；v是n或ch；w、x和y独立地选自n或ch。本发明的又一个实施方案是(iv)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1是c1-6烷氧基、卤素或氢；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的另一个实施方案是(v)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1是甲氧基、氯、氟或氢；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的又一个实施方案是(vi)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r2是c1-6烷氧基、c3-7环烷基c1-6烷氧基、卤代c1-6烷氧基、卤素或氢；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的又一个实施方案是(vii)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r2是甲氧基、环丙基甲氧基、二氟乙氧基、氯、氟或氢；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的又一个实施方案是(viii)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r3是氢；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的另一个实施方案是(ix)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中u是ch；v是ch；w是ch；x是n；y是n；并且其余的所有取代基具有上文给出的含义。本发明的又一个实施方案是(x)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1是c1-6烷氧基或卤素；r2是c1-6烷氧基、c3-7环烷基c1-6烷氧基、卤代c1-6烷氧基或卤素；r3是c1-6烷基或氢；u是ch；v是ch；w是ch；x是n；y是n。本发明的另一个实施方案是(xi)式i的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，其中r1是甲氧基、氯或氟；r2是甲氧基、环丙基甲氧基、二氟乙氧基或氯；r3是甲基或氢；u是ch；v是ch；w是ch；x是n；y是n。具体的本发明的式i化合物是如下化合物：2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；6,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；6-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氟-7-甲氧基-1-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氟-7-甲氧基-2-(5-嘧啶-2-基吡嗪-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；6-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；6,7-二甲氧基-2-[6-(2-吡啶基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-1h-异喹啉；6-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；2-甲氧基-7-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘；7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-二氮杂萘；7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺；7-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；n-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺；7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-甲腈；7-(环丙基甲氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-6-胺；6-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-甲腈；7-(3-甲氧基环丁基)-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；2-[[5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-基]氧基]乙酰胺；5-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-胺；5-氯-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-氯-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；和1-乙基-5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；或其可药用盐或对映体或非对映体。更具体地，本发明涉及如下式i化合物：5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氟-7-甲氧基-1-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；7-(环丙基甲氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；5-氯-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；和7-氯-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉；或其可药用盐或对映体或非对映体。合成本发明的化合物可以通过任何常规手段制备。用于合成这些化合物的合适方法以及它们的起始原料在以下流程和实施例中提供。除非另有指明，所有取代基，特别是r1、r2、r3、u、v、w、x和y如上所定义。此外，除非另有明确说明，否则所有反应、反应条件、缩写和符号具有有机化学领域的普通技术人员熟知的含义。化合物ia和ic的通用合成路线(流程1)流程1式ia和ic的化合物可以按照流程1制备。化合物ii在催化剂如pd2(dba)3或pd(oac)2、配体如ruphos、sphos或binap和碱如cs2co3或t-buona的存在下在合适的溶剂例如1,4-二恶烷或甲苯中与化合物iii偶联，得到化合物ia。在meoh存在下，用合适的氧化剂如nbs氧化化合物ia，生成中间体ib。在路易斯酸如bf3.et2o存在下，化合物ib与合适的亲核试剂iv如格氏试剂或二烷基锌试剂反应，得到化合物ic。本发明还涉及制备式i化合物的方法，其包括如下步骤之一：(a)将式(a)的化合物与式(b)的化合物在催化剂、配体和碱的存在下偶联；(b)将式(c)的化合物与亲核试剂在路易斯酸的存在下偶联；其中r1、r2、r3、u、v、w、x和y如上所定义。在步骤(a)中，催化剂可以是例如pd2(dba)3或pd(oac)2，配体可以是例如ruphos、sphos或binap，碱可以是例如cs2co3或t-buona。在步骤(b)中，亲核试剂可以是例如格氏试剂或二烷基锌试剂；路易斯酸可以是例如bf3·et2o。按照上述方法制备的式i化合物也是本发明的目的之一。本发明的化合物还显示出良好的安全性和pk特性。药物组合物和给药本发明还涉及用作治疗活性物质的式i的化合物。另一个实施方案提供含有本发明的化合物和治疗上惰性的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物来制备这些组合物和药物的方法。在一个实施例中，式(i)的化合物可以通过在环境温度下、在适当ph下并以所需的纯度与生理学可接受的载体(即，在所采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的载体)混合而配制成盖仑制剂给药形式。制剂的ph主要取决于化合物的具体用途和浓度，但通常优选约3至约8的范围。在一个实施例中，式(i)的化合物在ph5的乙酸盐缓冲液中配制。在另一个实施方案中，式(i)的化合物是无菌的。化合物可以例如作为固体或无定形组合物、作为冻干制剂或作为水溶液储存。组合物以符合良好医学实践的方式进行配制、定剂量和给药。在此上下文中考虑的因素包括被治疗的具体病症、被治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床病症、病症的病因、药剂的递送部位、给药方法、给药时间安排和执业医师已知的其他因素。要给药的化合物的“有效量”将受这些考虑控制，并且是抑制hbsag所需的最低量。例如，这样的量可以低于对正常细胞或作为整体的哺乳动物而言是有毒的量。在一个实施例中，每个剂量胃肠外给药的本发明化合物的药物有效量将在约0.01至100mg/kg，或者约0.01至100mg/kg患者体重/天的范围内，其中所使用的化合物的典型初始范围为0.3至15mg/kg/天。在另一个实施方案中，口服单位剂型如片剂和胶囊优选含有约0.1至约1000mg的本发明化合物。本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括经口、局部(包括含服和舌下)、直肠、阴道、透皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外及鼻内给药，以及在期望用于局部治疗时，病变内给药。胃肠外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。本发明的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如片剂、散剂、胶囊、溶液、分散液、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳液、贴剂等。这些组合物可以含有药物制剂中常见的组分，例如稀释剂、载体、ph调节剂、甜味剂、填充剂和其他活性物质。典型制剂通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂进行制备。合适的载体和赋形剂对于本领域技术人员是熟知的。制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和其它公知的添加剂，以便使药物(即本发明的化合物或其药物组合物)具有优美的外观或有助于药物产品(即药物)的生产。适合的口服剂型的实例是包含约0.1至1000mg本发明的化合物、约0至2000mg无水乳糖、约0至2000mg交联羧甲基纤维素钠、约0至2000mg聚乙烯吡咯烷酮(pvp)k30和约0至2000mg硬脂酸镁的片剂。首先将粉状成分混合在一起，然后与pvp的溶液混合。可以将所得组合物干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂。气雾剂制剂的一个实例可以通过将例如0.1至1000mg的本发明化合物溶解在合适的缓冲溶液例如磷酸盐缓冲液中，在需要时添加张力剂例如盐如氯化钠而制备。所述溶液可以过滤，例如使用0.2微米滤器过滤，以除去杂质和污染物。因此，一个实施方案包括包含式i的化合物或其立体异构体或可药用盐的药物组合物。在另一个实施方案中，包括包含式i的化合物或其立体异构体或可药用盐以及可药用载体或赋形剂药物组合物。以下实施例a和b举例说明了本发明的典型组合物，但是其仅仅是作为本发明的代表。实施例a式i的化合物可以以本身已知的方式作为活性成分用于生产具有以下组成的片剂：实施例b式i的化合物可以以本身已知的方式作为活性成分用于生产具有以下组成的胶囊：适应症和治疗方法本发明的化合物可以抑制hbsag生成或分泌并且抑制hbv基因表达。因此，本发明的化合物可用于治疗或预防hbv感染。本发明涉及式i的化合物用于抑制hbsag生成或分泌的用途。本发明涉及式i的化合物用于抑制hbvdna生成的用途。本发明涉及式i的化合物用于抑制hbv基因表达的用途。本发明涉及式i的化合物用于治疗或预防hbv感染的用途。式i化合物用于制备可用于治疗或预防与hbv感染相关的疾病的药物的用途是本发明的一个目的。本发明特别涉及式i化合物用于制备用于治疗或预防hbv感染的药物的用途。另一个实施方案包括一种用于治疗或预防hbv感染的方法，所述方法包括施用有效量的式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药、缀合物或可药用盐。实施例通过参考以下实施例将更全面地理解本发明。然而，它们不应被解释为限制本发明的范围。文中使用的缩写如下:μl:微升μm:微米μm:微摩尔/升ic50:半数最大抑制浓度lc/ms:液相色谱/质谱m:摩尔浓度mhz:兆赫兹min:分钟hr(s):小时mm:毫摩尔/升ms(esi):质谱(电喷雾解离)nmr:核磁共振obsd.实测值rt:室温pd/c:钯/活性碳pd(pph3)4:四(三苯基膦)钯(0)pd2(dba)3:三(二亚苄基丙酮)二钯(0)pd(oac)2:乙酸钯(ii)nbs:n-溴琥珀酰亚胺tfa:三乙胺δ:化学位移ruphos:2-二环己基膦基-2′,6′-二异丙氧基联苯基binap:(2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘)sphos:2-二环己基膦基-2′,6′-二甲氧基联苯t-buona:叔丁醇钠dipea:n,n-二异丙基胺tert-buxphospdg3:[(2-二-叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)-2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(ii)brettphospdg3:[(2-二-环己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)-2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]甲磺酸钯(ii)tert-bu3ppdg2:[(三-叔丁基膦)-2-(2-氨基联苯)]氯化钯(ii)apdg2:[(二(1-金刚烷基)-n-丁基膦)-2-(2-氨基联苯)]氯化钯(ii)ea:乙酸乙酯通用实验条件中间体和最终化合物通过快速色谱使用以下仪器之一进行纯化：i)biotagesp1系统和quad12/25cartridge组件；ii)isco组合快速色谱仪。硅胶品牌和孔径：i)kp-sil粒度：40-60μm；ii)cas注册号：硅胶：63231-67-4，粒度：47-60微米硅胶；iii)来自青岛海洋化工股份有限公司(qingdaohaiyangchemicalco.,ltd)的zcx，孔：200-300或300-400。中间体和最终化合物通过使用xbridgetmperpc18(5μm,obdtm30×100mm)柱或sunfiretmperpc18(5μm,obdtm30×100mm)柱的反相柱制备型hplc纯化。手性分离在thar350制备型sfc上用chiralpakad-10u(200x50mmi.d.)进行，流动相a为co2，b为乙醇。lc/ms光谱使用acquityultraperformancelc-3100质量检测器或acquityultraperformancelc-sq检测器获得。标准lc/ms条件如下(运行时间3分钟)：酸性条件：a：0.1％甲酸的h2o溶液；b：0.1％甲酸的乙腈溶液；碱性条件：a：0.05％nh3·h2o的h2o溶液；b：乙腈；中性条件：a：h2o；b：乙腈。质谱(ms)：通常仅报告指示母核质量的离子，并且除非另有说明，引述的质量离子是正质量离子(m+h)+。微波辅助反应在biotageinitiatorsixty或cemdiscover中进行。nmr谱图使用brukeravance400mhz获得。所有涉及空气敏感试剂的反应均在氩气氛下进行。除非另有说明，试剂在从商业供应商处获得后不经进一步纯化直接使用。制备实施例实施例12-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:4-溴吡唑-1-胺的制备向4-溴吡唑(50.0g,340.21mmol)的naoh(500ml,4n)溶液中加入羟胺-o-磺酸(115.4g,1021mmol)。将得到的混合物于50℃搅拌加热16小时然后用dcm(200ml)萃取三次。将合并的有机层用naoh(200ml,4n)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到灰白色固体状4-溴吡唑-1-胺(40.0g,粗品)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:5-溴三嗪的制备将粗品4-溴吡唑-1-胺(20.0g,粗品)在dcm(500ml)和水(200ml)中的溶液冷却至0℃。向溶液中加入naio4(52.8g,246.93mmol)。将得到的混合物于0℃搅拌4小时并用dcm(100ml)萃取三次。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到棕色固体状5-溴三嗪(20.0g)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶的制备0℃下，向5-溴三嗪(20.0g,粗品)的1,4-二恶烷(600ml)溶液中加入嘧啶-2-甲脒(16.8g,137.53mmol)。于0℃搅拌1小时后，将得到的混合物升温至30℃并于30℃搅拌1小时然后过滤。将滤液真空浓缩。将残余物用h2o(500ml)稀释并用dcm(500ml)萃取三次。将合并的有机层用盐水(1.0l)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶柱纯化(洗脱剂：dcm/meoh＝10/1,v:v)得到黄色固体状5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(9.0g)。步骤4:2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将含有5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(300mg,1.27mmol)、1,2,3,4-四氢异喹啉(337mg,2.53mmol)和叔丁醇钠(243mg,2.53mmol)在甲苯(15ml)中的混合物的烧瓶脱气并用氮气填充。向混合物中加入加入ruphos(23.6mg,50.6μmol)和pd2(dba)3(23.2mg,25.3μmol)。于120℃搅拌加热4小时后，将得到的混合物冷却至室温，然后用饱和nh4cl水溶液稀释并用dcm(50ml)萃取三次。将合并的有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到白色固体状2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(8mg,27.6μmol,2.18％收率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:3.04-3.15(m,2h),3.71-3.79(m,2h),4.58-4.65(m,2h),7.22-7.30(m,4h),7.32-7.37(m,1h),8.62(s,2h),8.94-9.01(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:290。实施例27-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉将5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(200mg,844μmol,实施例1中步骤3的产物)、7-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(190mg,1.01mmol)、叔丁醇钠(243mg,2.53mmol)、ruphos(15.7mg,33.7μmol)和pd2(dba)3(15.5mg,16.9μmol)的混合物在氮气氛下于100℃搅拌加热3小时。将得到的混合物冷却至室温，然后用饱和氯化铵水溶液稀释并用dcm(40ml)萃取三次。将合并的有机层干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(15mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:2.98-3.07(m,2h),3.73-3.80(m,2h),4.63(s,2h),6.92-7.01(m,1h),7.02-7.10(m,1h),7.19-7.27(m,1h),7.46-7.59(m,1h),8.56-8.71(m,2h),8.95(br.s.,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:308。实施例36,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉将5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(105mg,443μmol,实施例1中步骤3的产物)、6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(102mg,443μmol)、叔丁醇钠(128mg,1.33mmol)、pd2(dba)3(8.11mg,8.86μmol)和ruphos(8.27mg,17.7μmol)在甲苯(10ml)中的混合物在氮气氛下于100℃加热3小时。将得到的混合物冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释并用dcm(50ml)萃取三次。将合并的有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状6,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(3mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.93-3.07(m,2h),3.67-3.79(m,2h),3.91(d,6h),4.45-4.60(m,2h),6.73(d,2h),7.32-7.41(m,1h),8.54-8.70(m,2h),8.88-9.04(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:350。实施例46-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉将5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(100mg,422μmol,实施例1中步骤3的产物)、6-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(84.2mg,422μmol)、pd2(dba)3(386mg,422μmol)、ruphos(197mg,422μmol)和叔丁醇钠(40.5mg,422μmol)在甲苯(5ml)中的混合物在氮气氛下于100℃搅拌加热2小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(30ml)萃取三次。将合并的有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状6-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(3mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:3.05(t,2h),3.52(s,2h),3.73(t,2h),3.82-3.86(m,3h),4.55(s,2h),6.78(d,1h),6.84(dd,1h),7.18(d,1h),7.35(br.s.,1h),8.51-8.68(m,2h),8.92-9.05(m,2h)。实施例55-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:n-[(3-氟-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺向3-氟-5-甲氧基苯甲醛(25.0g,162.19mmol)在甲苯(250ml)中的溶液中加入氨基乙醛二甲基缩醛(18.8g,178.41mmol)。于120℃搅拌8小时后，将得到的混合物真空浓缩并将残余物溶于meoh(300ml)。向形成的溶液中于0℃下加入nabh4(7.1g,186.52mmol)并将得到的混合物升温至室温搅拌30分钟，然后用h2o(100ml)终止反应并用乙酸乙酯(100ml)萃取三次。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到n-[(3-氟-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺(30.0g,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇的制备将n-[(3-氟-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺(30.0g,粗品)和hcl(320ml,6n)的混合物于40℃搅拌12小时。将混合物减压浓缩得到5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇的混合物(30.0g,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备向5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(30.0g,粗品)的dcm(210ml)溶液中加入三乙基硅烷(35.4g,304.24mmol)和tfa(90ml)。将得到的混合物室温搅拌12小时然后真空浓缩得到5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的混合物(25.0g,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯和7-氟-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(粗品25.0g)在dcm(300ml)中的混合物中加入tea(115ml,827.77mmol)和boc2o(43.4g,198.66mmol)。将混合物室温搅拌12小时然后真空浓缩。将残余物用ea(300ml)稀释并用盐水洗涤。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：2％ea的pe溶液,v:v)得到无色油状7-氟-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(8.34g)和5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(7.29g)。步骤5:5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备将5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(7g)和hcl的meoh溶液(4n,50ml)的混合物于室温下搅拌过夜。将混合物真空浓缩并将残余物用饱和nahco3水溶液中和。将得到的混合物用乙酸乙酯(50ml)萃取三次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到黄色油状5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(4.5g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤6:5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(5.0g,27.59mmol,实施例1中步骤3的产物)、5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(7.8g,33.11mmol)和cs2co3(36.0g,110.37mmol)在1,4-二恶烷(60ml)中的混合物中加入ruphos(1.2g)、pd2(dba)3(1.2g)。将混合物在氮气氛下于120℃搅拌16小时。冷却至室温并过滤后，将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到黄色固体状5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(2.19g)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.97(d,2h),8.62(s,2h),7.35(t,1h),6.88(s,1h),6.77(d,1h),4.53(s,2h),3.86(s,3h),3.73(t,2h),2.93(t,2h),ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:338。实施例67-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:7-氟-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备将7-氟-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(1.0g,3.5mmol)和hcl的ea溶液(1n,10ml)的混合物室温搅拌4小时。将混合物真空浓缩得到黄色固体状7-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉盐酸盐(0.9g,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:7-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向7-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉盐酸盐(150mg,0.70mmol)的二恶烷(10ml)溶液中加入5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(170mg,0.75mmol,实施例1中步骤3的产物)，然后加入pd2(dba)3(13mg,0.014mmol)、ruphos(16mg,0.035mmol)和tert-buona(168mg,1.75mmol)。在氮气氛下于100℃搅拌12小时并冷却至室温后，将得到的反应混合物用ea(30ml)稀释并过滤。将滤液用h2o(10ml)洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到黄色固体状7-氟-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(5mg,收率:2.1％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.88(d,2h),8.53(s,2h),7.12-7.36(m,2h),6.32-6.60(m,2h),4.45(br.s.,2h),3.76(s,3h),3.64(br.s.,2h),2.83(br.s.,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:338。实施例75-氟-7-甲氧基-1-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:5-氟-1,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向冷却至-40℃的5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(78mg,0.15mmol,实施例5)在thf(1ml)和meoh(4ml)中的溶液中缓慢加入rucl3水合物(3mg,0.01mmol)和naio4(97mg,0.45mmol)的h2o(2ml)溶液。将得到的混合物在-40℃下搅拌15分钟，然后升温至室温并搅拌4小时。然后将得到的反应混合物用饱和na2so3水溶液(10ml)稀释并用dcm(20ml)萃取两次。将合并的有机层用h2o(10ml)洗涤并将有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到黑色油状5-氟-1,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(50mg,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:5-氟-7-甲氧基-1-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向冷却至-40℃的搅拌中的5-氟-1,7-二甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(50mg,0.136mmol)的thf(1ml)溶液中依次加入bf3.et2o(47mg,0.408mmol)和memgbr(0.14ml,0.408mmol)。将得到的混合物升温至0℃并搅拌1小时，然后用饱和nh4cl水溶液(50ml)稀释并用(20ml)萃取三次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状5-氟-7-甲氧基-1-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(2.4mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.97(d,1h),8.60(s,1h),7.34(t,1h),6.54-6.62(m,2h),5.00(q,1h),3.79-3.90(m,4h),3.62(ddd,1h),2.86-3.10(m,1h),1.58(d,3h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:352。实施例85-氟-7-甲氧基-2-(5-嘧啶-2-基吡嗪-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:2-(5-氯吡嗪-2-基)-5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向搅拌中的5-氟-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(100mg,0.55mmol)的dmso(1ml)溶液中加入2,5-二氯吡嗪(160mg,1.1mmol)和dipea(170mg,1.65mmol)。将混合物于100℃搅拌4小时然后用ea(100ml)稀释。将得到的混合物依次用h2o(40ml)和盐水(40ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：pe:ea＝10:1,v:v)得到白色固体状2-(5-氯吡嗪-2-基)-5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉(100mg)。步骤2:5-氟-7-甲氧基-2-(5-嘧啶-2-基吡嗪-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将2-(5-氯吡嗪-2-基)-5-氟-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉(80mg,0.272mmol)、2-(三丁基锡基)嘧啶(302mg,0.817mmol)和apdg2(18.2mg,0.027mmol,供应商:sigma-aldrich,cas:1375477-29-4)在etoh(2ml)中的混合物在氮气氛下于80℃加热12小时。将得到的反应混合物用dcm(80ml)稀释并用盐水(20ml)洗涤。将有机层真空浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化得到白色固体状5-氟-7-甲氧基-2-(5-嘧啶-2-基吡嗪-2-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(15mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:9.27(d,1h),8.84(d,2h),8.34(d,1h),7.21(t,1h),6.61(s,1h),6.56(dd,1h),4.85(s,2h),3.99(t,2h),3.81(s,3h),2.94(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:338。实施例96-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:n-[(3-氯苯基)甲基]甲酰胺的制备将2-(3-氯苯基)乙胺(2.3g,14.8mmol)和甲酸(680mg,567μl,14.8mmol)的混合物于100℃搅拌加热过夜。将得到的混合物冷却至室温并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe:ea＝2:1,v:v)得到浅黄色油状n-(3-氯苯乙基)甲酰胺(2.3g,12.5mmol)。步骤2:8-氯-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮的制备向n-(3-氯苯乙基)甲酰胺(0.9g,4.9mmol)的dcm(15ml)溶液中加入草酰氯(684mg,472μl,5.39mmol)。将混合物室温搅拌30分钟然后冷却至0℃。向冷却的混合物中加入氯化铁(iii)(954mg,5.88mmol)。然后将得到的混合物升温至室温并搅拌过夜。然后将得到的反应混合物用1nhcl(50ml)处理并用dcm(50ml)萃取两次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到棕色油状8-氯-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮粗品(1.3g)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:6-氯-3,4-二氢异喹啉的制备将8-氯-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮(1.29g,5.43mmol)和10％h2so4的meoh溶液(2ml在20mlmeoh中的溶液)的混合物于80℃加热2小时。然后将得到的混合物真空浓缩。将残余物用饱和nahco3水溶液稀释并用dcm(30ml)萃取三次。将合并的dcm层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝20:1,v:v)得到黄色油状6-氯-3,4-二氢异喹啉(400mg)。步骤4:6-氯-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备向6-氯-3,4-二氢异喹啉(400mg,2.42mmol)的etoh(20ml)溶液中加入硼氢化钠(228mg,6.04mmol)。于室温下搅拌1小时后，用1nhcl终止反应。将得到的混合物用乙酸乙酯(30ml)萃取三次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到灰色固体状6-氯-1,2,3,4-四氢异喹啉粗品(150mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤5:6-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(150mg,633μmol,实施例1中步骤3的产物)、6-氯-1,2,3,4-四氢异喹啉(127mg,759μmol)、ruphos(11.8mg,25.3μmol)、pd2(dba)3(11.6mg,12.7μmol)和叔丁醇钠(122mg,1.27mmol)在二恶烷(10ml)中的混合物于110℃下加热搅拌过夜。冷却至室温后，将得到的混合物用水稀释并用乙酸乙酯(50ml)萃取三次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状6-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(10mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.99-3.08(m,2h),3.72(s,2h),4.55(s,2h),7.15-7.20(m,1h),7.23(s,2h),7.31-7.36(m,1h),8.60(s,2h),8.96(d,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:324。实施例106,7-二甲氧基-2-[6-(2-吡啶基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-1h-异喹啉将6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(136mg,702μmol)、5-溴-2-(2-吡啶基)吡啶(150mg,638μmol,供应商:j&kchemical,cas注册号:15862-19-8)、pd2(dba)3(11.7mg,12.8μmol)、ruphos(11.9mg,25.5μmol)和叔丁醇钠(123mg,1.28mmol)在二恶烷(20ml)中的混合物在氮气氛下于110℃搅拌加热。将得到的混合物冷却至室温，然后用水稀释(10ml)并用乙酸乙酯(20ml)萃取三次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到黄色固体状6,7-二甲氧基-2-[6-(2-吡啶基)-3-吡啶基]-3,4-二氢-1h-异喹啉(22mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.91-2.98(m,2h),3.63-3.70(m,2h),3.88(d,6h),4.42-4.48(m,2h),6.68(d,2h),7.21-7.26(m,1h),7.30-7.37(m,1h),7.75-7.83(m,1h),8.26(d,2h),8.40-8.45(m,1h),8.64(d,1h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:348。实施例117-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:n-[(3-氟苯基)甲基]甲酰胺的制备将2-(3-氟苯基)乙胺(4g,28.7mmol)和甲酸(1.98g,1.65ml,43.1mmol)在二恶烷(40ml)中的混合物于100℃下搅拌加热过夜。将得到的混合物真空浓缩并通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝5/1,v:v)得到黄色油状n-(3-氟苯乙基)甲酰胺(4.1g)。步骤2:8-氟-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮的制备向n-(3-氟苯乙基)甲酰胺(2.05g,12.3mmol)的dcm(40ml)溶液中加入草酰氯(1.71g,1.18ml,13.5mmol)。将混合物室温搅拌30分钟然后冷却至0℃。向混合物中加入氯化铁(iii)(2.39g,14.7mmol)并将得到的反应混合物室温搅拌3小时。然后用3nhcl终止反应并将得到的混合物用乙酸乙酯(50ml)萃取三次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到黄色固体状8-氟-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮粗品(2.8g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:6-氟-3,4-二氢异喹啉的制备向8-氟-6,10b-二氢-5h-唑并[2,3-a]异喹啉-2,3-二酮(2.8g,12.7mmol)的meoh(40ml)溶液中加入硫酸(4ml)。将得到的混合物于90℃搅拌加热2小时然后真空浓缩。将残余物用饱和碳酸氢钠水溶液稀释并用乙酸乙酯(50ml)萃取3次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到6-氟-3,4-二氢异喹啉粗品，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:6-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备向6-氟-3,4-二氢异喹啉(1.9g,12.7mmol)的meoh(30ml)溶液中加入硼氢化钠(482mg,12.7mmol)。搅拌10分钟后，将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝2/1,v:v)得到黄色油状6-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉(500mg)。步骤5:7-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将6-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉(191mg,1.27mmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(250mg,1.05mmol,实施例1中步骤3的产物)、pd2(dba)3(19.3mg,21.1μmol)、ruphos(19.7mg,42.2μmol)和叔丁醇钠(203mg,2.11mmol)在二恶烷(20ml)中的混合物于100℃搅拌加热过夜。将得到的混合物用h2o(20ml)稀释并用dcm(20ml)萃取三次。将合并的有机层真空浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(10mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:3.05(t,2h),3.72(s,2h),4.55(s,2h),6.89-7.03(m,2h),7.18-7.23(m,1h),7.31-7.36(m,1h),8.49-8.69(m,2h),8.87-9.05(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:308。实施例122-甲氧基-7-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘步骤1:(e)-3-(3-氨基-4-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯的制备将3-氨基-4-溴吡啶(5.0g,28.9mmol)、(e)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)丙烯酸乙酯(7.84g,34.7mmol)、pd(oac)2(250mg)、xantphos(400mg)和k2co3(5.18g,37.6mmol)在thf(150ml)和h2o(30ml)中的混合物于80℃搅拌16小时。将得到的混合物过滤。将滤液用乙酸乙酯(100ml)稀释，用盐水(100ml)洗涤，然后用na2so4干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(pe:ea＝10:1至dcm:meoh＝50:1,v:v)得到棕色固体状(e)-3-(3-氨基-4-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(3.1g)。步骤2:1h-1,7-二氮杂萘-2-酮的制备在室温下，向etoh(60ml)中分批加入金属钠(1.25g,54.2mmol)并搅拌至钠完全溶解。向得到的溶液中加入(e)-3-(3-氨基-4-吡啶基)丙-2-烯酸乙酯(2.6g,13.5mmol)的etoh(15ml)溶液。将得到的混合物于90℃搅拌1小时然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝10:1,v:v)得到黄色固体状1h-1,7-二氮杂萘-2-酮(1.6g)。步骤3:7-苄基-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-2-酮的制备向1h-1,7-二氮杂萘-2-酮(1.6g,11.0mmol)的meoh(50ml)溶液中在70℃下加入bnbr(2.1g,12.1mmol)。将得到的混合物于70℃搅拌3小时然后冷却至0℃。向冷却的混合物中加入nabh4(2.09g,55.0mmol)。将得到的混合物缓慢升温至室温并在室温下搅拌3小时。用6nhcl(20ml)终止反应。将得到的混合物室温搅拌2小时，然后用2nnaoh碱化至ph10并用dcm(50ml)萃取两次。将合并的有机层用硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝40:1,v:v)得到黄色固体状7-苄基-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-2-酮(700mg)。步骤4:2-氧代-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯的制备将7-苄基-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-2-酮(700mg,2.92mmol)、boc2o(954mg,4.37mmol)在meoh(20ml)和dcm(5ml)中的混合物在pd/c(70mg)存在下在氢气(气囊)下室温氢化16小时。将得到的混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝30:1,v:v)得到黄色油状的2-氧代-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯(500mg)。步骤5:2-甲氧基-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯的制备向搅拌中的2-氧代-1,5,6,8-四氢-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯(390mg,1.56mmol)的甲苯(5ml)溶液中加入ag2o(3.61g,15.6mmol)和mei(2.21g,15.6mmol)。将得到的混合物室温搅拌12小时然后过滤。将滤液真空浓缩并将残余物通过制备型tlc纯化(展开剂：dcm:meoh＝10:1,v:v)得到无色油状2-甲氧基-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯(400mg,粗品)。步骤6:2-甲氧基-5,6,7,8-四氢-1,7-二氮杂萘的制备将2-甲氧基-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘-7-甲酸叔丁酯(400mg,1.51mmol)和hcl的ea溶液(2ml,1.0m)的混合物室温搅拌2小时。将得到的反应混合物真空浓缩。将残余物溶于meoh(3ml)，然后与碱性树脂(150mg)一起在室温下搅拌2小时并过滤。将滤液真空浓缩得到黄色固体状2-甲氧基-5,6,7,8-四氢-1,7-二氮杂萘(140mg,粗品)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤7:2-甲氧基-7-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘的制备向2-甲氧基-5,6,7,8-四氢-1,7-二氮杂萘(50mg,0.21mmol)的叔戊醇(1ml)溶液中加入5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(52mg,0.32mmol,实施例1中步骤3的产物)，然后加入tert-buxphospdg3(14mg,0.021mmol,cas注册号:1447963-75-8)、tert-buok(71mg,0.63mmol)。将得到的混合物于110℃搅拌12小时然后真空浓缩。将残余物通过制备型tlc纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝10:1,v:v)并进一步通过制备型hplc纯化得到白色固体状2-甲氧基-7-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-6,8-二氢-5h-1,7-二氮杂萘(6.8mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.95(d,2h),8.70(s,2h),7.46-7.58(m,2h),6.66(d,1h),4.57(s,2h),3.91(s,3h),3.82(t,2h),2.96(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:321。实施例137-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-二氮杂萘步骤1:5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛的制备在0℃下，向i-pr2nh(13.4g,133.0mmol)的thf(100ml)溶液中加入n-buli(53ml,133.0mmol,2.5m的己烷溶液)。将得到的混合物于0℃搅拌30分钟，然后在-78℃下加入5-溴-2-甲氧基吡啶(20.0g,106.4mmol)的thf(50ml)溶液。将得到的混合物于-78℃搅拌1小时，然后向反应混合物中加入n,n-二甲基甲酰胺(15.6g,212.7mmol)。将反应混合物升温至0℃，然后用饱和nh4cl水溶液终止反应。将得到的混合物用ea(600ml)稀释，然后用h2o(200ml)和盐水(200ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到黄色固体状5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛(23.5g,粗品)，将其直接用于下一步骤。步骤2:5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯的制备在0℃下，向5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲醛(23.5g,108.8mmol)的meoh(100ml)溶液中依次加入i2(35.9mg,141.4mmol)的meoh(75ml)溶液和koh(15.9g,282.8mmol)的meoh(75ml)溶液。将得到的混合物于0℃搅拌1小时，然后用饱和nahso3水溶液终止反应。将得到的混合物用dcm(400ml)稀释。将分离的有机相用h2o(150ml)和盐水(150ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：pe:ea＝20:1,v:v)得到淡黄色固体状5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(14.9g)。步骤3:5-[(e)-2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙烯基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯的制备向5-溴-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(1.0g,4.1mmol)和2-乙烯基异二氢吲哚-1,3-二酮(844mg,4.88mmol)的二恶烷(32ml)溶液中加入cy2nme(952mg,4.88mmol)和tert-bu3ppdg2(63mg,0.12mmol,cas注册号:1375325-71-5)。将反应混合物用氮气脱气并在氮气氛下于90℃加热12小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm)得到黄色固体状5-[(e)-2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙烯基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(1.3g,粗品)。步骤4:5-[2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯的制备向5-[(e)-2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙烯基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(1.3g,3.84mmol)在etoh(30ml)和thf(30ml)中的溶液中加入wilkinson's催化剂(711mg,0.77mmol)。将得到的混合物在h-cube(2.4mpa)上氢化并在75℃下加热12小时。将得到的反应混合物真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm)得到黄色油状5-[2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(1.2g,粗品)。步骤5:7-甲氧基-3,4-二氢-2h-2,6-二氮杂萘-1-酮的制备将5-[2-(1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)乙基]-2-甲氧基-吡啶-4-甲酸甲酯(1.2g,3.53mmol)和水合肼(1.77g,35.3mmol)在etoh(10ml)中的混合物于70℃加热5小时。将得到的反应混合物真空浓缩。将残余物用dcm(40ml)稀释并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝20:1,v:v)得到淡黄色固体状7-甲氧基-3,4-二氢-2h-2,6-二氮杂萘-1-酮(650mg,粗品)。步骤6:7-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2,6-二氮杂萘的制备在0℃下，向lialh4(255mg,6.73mmol)和thf(5ml)的混合物中缓慢加入7-甲氧基-3,4-二氢-2h-2,6-二氮杂萘-1-酮(300mg,1.68mmol)的thf(5ml)溶液。然后将得到的混合物升温至20℃并搅拌5小时。用h2o(0.25ml)和15％naoh(0.25ml)终止反应。将得到的混合物过滤并将滤饼用dcm(20ml)洗涤。将滤液合并并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到黄色固体状7-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2,6-二氮杂萘(80mg)。步骤7:7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-二氮杂萘的制备向7-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2,6-二氮杂萘(50mg,0.30mmol)在1,4-二恶烷(1ml)中的混合物中加入5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(108.28mg,0.460mmol,实施例1中步骤3的产物)、碳酸铯(397mg,1.22mmol,4eq)和brettphospdg3(15mg,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于120℃搅拌12小时，然后用dcm(10ml)稀释并过滤。将滤液真空浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化得到黄色固体状7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-2,6-二氮杂萘(8mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.92(d,2h),8.68(s,2h),8.04(s,1h),7.52(t,1h),6.74(s,1h),4.63(s,2h),3.83(s,3h),3.75(t,2h),2.91(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:321。实施例147-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉向7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg,1.23mmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(232mg,980μmol,实施例1中步骤3的产物)和cs2co3(2g,6.13mmol)在二恶烷(15ml)中的混合物中加入brettphospdg3(222mg,245μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物在氮气氛下于120℃加热搅拌48小时。将混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(84mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.77-8.92(m,2h),8.52(s,2h),7.34-7.47(m,1h),6.96-7.06(m,1h),6.64-6.77(m,2h),4.45-4.54(m,2h),3.69(s,3h),3.59-3.66(m,2h),2.80-2.89(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:320。实施例157-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.5g,7.07mmol)、boc2o(3.09g,14.1mmol)和dipea(914mg,1.24ml,7.07mmol)在thf(30ml)中的混合物室温搅拌3小时。将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝5/1,v:v)得到淡黄色油状7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(2.2g)。步骤2:7-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(600mg,1.92mmol)、环丙基硼酸(660mg,7.69mmol)、k3po4(1.63g,7.69mmol)、三环己基膦(108mg,384μmol)和pd(oac)2(43.1mg,192μmol)在甲苯(20ml)中的混合物在氮气氛下于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝40:1,v:v)得到无色油状7-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(400mg)。步骤3:7-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备向7-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(400mg,1.46mmol)的meoh(20ml)溶液中加入hcl的乙酸乙酯溶液(0.5ml,1.0m)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到白色固体状7-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐粗品(260mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:7-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向7-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉(250mg,1.44mmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(274mg,1.15mmol,实施例1中步骤3的产物)和cs2co3(2.35g,7.21mmol)在二恶烷(15ml)中的混合物中加入brettphospdg3(262mg,289μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于120℃加热搅拌48小时。冷却至室温后，将得到的混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(103mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:0.65-0.76(m,2h),0.94-1.07(m,2h),1.92(s,1h),3.05(s,2h),3.78(t,2h),4.63(s,2h),6.99(s,2h),7.11-7.18(m,1h),7.48-7.59(m,1h),8.63-8.86(m,2h),8.94-9.18(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:330。实施例16n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺步骤1:7-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(300mg,961μmol)、二甲基胺盐酸盐(235mg,2.88mmol)、叔丁醇钠(462mg,4.8mmol)、ruphos(44.8mg,96.1μmol)和pd2(dba)3(44mg,48μmol)在二恶烷(10ml)中的混合物于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝40:1,v:v)得到黄色油状7-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(220mg)。步骤2:n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺的制备向7-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(220mg,796μmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl的乙酸乙酯溶液(0.5ml,1.0m)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到淡黄色固体状n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺盐酸盐粗品(150mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(161mg,681μmol,实施例1中步骤3的产物)、n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺(150mg,851μmol)和cs2co3(1.39g,4.26mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物中加入brettphospdg3(38.6mg,42.6μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于110℃加热搅拌过夜然后过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺(90mg)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δppm:2.87(s,8h),3.66-3.74(m,2h),4.52-4.60(m,2h),6.65(brs,2h),7.03(d,1h),7.51(s,1h),8.65(s,2h),8.87-8.97(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:333。实施例177-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:7-甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(300mg,961μmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(603mg,4.8mmol)、pd2(dba)3(44mg,48μmol)、pdcl2(dppf)(42.2mg,96.1μmol)和碳酸钾(266mg,1.92mmol)在二恶烷(10ml)和水(1ml)中的混合物于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物用水(20ml)稀释并用dcm(30ml)萃取三次。将合并的dcm层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝5/1,v:v)得到黄色油状7-甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(200mg)。步骤2:7-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备向7-甲基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(200mg,809μmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl的乙酸乙酯溶液(0.5ml,1.0m)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜然后真空浓缩得到淡黄色固体状7-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐粗品(120mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:7-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(155mg,652μmol,实施例1中步骤3的产物)、7-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(120mg,815μmol)和cs2co3(1.33g,4.08mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物中加入brettphospdg3(36.9mg,40.8μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于110℃加热搅拌过夜然后过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(40mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.37(s,3h),3.04(s,2h),3.74(s,2h),4.58(s,2h),7.09(s,3h),7.32-7.40(m,1h),8.53-8.73(m,2h),8.88-9.15(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:304。实施例18n-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺步骤1:7-(甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(600mg,1.92mmol)、碘化亚铜(i)(36.6mg,192μmol)和甲胺水溶液(10ml)的混合物在氮气氛下于100℃加热搅拌过夜。将得到的混合物用乙酸乙酯(30ml)萃取三次。将合并的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝1/1,v:v)得到黄色固体状7-(甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(159mg)。步骤2:n-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺的制备向7-(甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(90mg,343μmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl溶液(0.5ml,1.0m)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜然后真空浓缩得到白色固体状n-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺粗品(60mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:n-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(70.1mg,296μmol,实施例1中步骤3的产物)、n-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-胺(60mg,370μmol)和cs2co3(603mg,1.85mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物中加入brettphospdg3(16.8mg,18.5μmol)。将得到的混合物于110℃加热搅拌过夜然后过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状n-甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-胺(20mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.89(s,3h),2.93-3.01(m,2h),3.66-3.76(m,2h),4.53(s,2h),6.54-6.69(m,2h),7.06(d,1h),7.30-7.35(m,1h),8.59(s,2h),8.95(d,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:319。实施例197-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-醇的制备向在-10℃下冷却的5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(800mg,2.37mmol,实施例5)的dcm(15ml)溶液中缓慢加入三溴化硼(1.78g,7.11mmol)并将反应混合物在0℃下搅拌2小时。用meoh(5ml)终止反应。将得到的混合物用碱性树脂中和并过滤。将滤液真空浓缩得到黄色固体状5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-醇(720mg),其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-醇(100mg,0.31mmol)、2-溴-1,1-二氟乙烷(54mg,0.37mmol)和碳酸钾(64mg,0.46mmol)在dmf(2ml)中的混合物于70℃搅拌16小时。将得到的反应混合物冷却并过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到白色固体状7-(2,2-二氟乙氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(56mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.95(d,2h),8.68(s,2h),7.52(t,1h),6.79(s,1h),6.69(dd,1h),6.02-6.34(m,1h),4.65(s,2h),4.24(td,2h),3.81(t,2h),2.94(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:370。实施例202-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-甲腈步骤1:7-氰基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(600mg,1.92mmol)、氰化锌(1.13g,9.61mmol)和pd(pph3)4(220mg,0.19mmol)在dmf(10ml)中的混合物于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝1/1,v:v)得到白色固体状7-氰基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(129mg)。步骤2:1,2,3,4-四氢异喹啉-7-甲腈的制备向7-氰基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(129mg,499μmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl的乙酸乙酯溶液(0.5ml,1.0m)。将得到的混合物在室温下搅拌过夜然后真空浓缩得到白色固体状1,2,3,4-四氢异喹啉-7-甲腈粗品(80mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-甲腈的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(95.9mg,405μmol,实施例1中步骤3的产物)、1,2,3,4-四氢异喹啉-7-甲腈(80mg,506μmol)和cs2co3(824mg,2.53mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物中加入brettphospdg3(16.8mg,18.5μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于110℃加热搅拌过夜并过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-甲腈(28mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:3.13-3.21(m,2h),3.77-3.86(m,2h),4.68(s,2h),7.38(d,1h),7.42-7.51(m,1h),7.54-7.64(m,2h),8.73(brs,2h),9.07(brs,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:315。实施例217-(环丙基甲氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉将5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-醇(100mg,0.31mmol,实施例19中步骤1的产物)、(溴甲基)环丙烷(50mg,0.37mmol)和碳酸钾(64mg,0.46mmol)在dmf(2ml)中的混合物于70℃搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到白色固体状7-(环丙基甲氧基)-5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(20.1mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.94(d,2h),8.66(s,2h),7.52(t,1h),6.70(s,1h),6.58(dd,1h),4.62(s,2h),3.76-3.85(m,4h),2.92(t,2h),1.17-1.33(m,1h),0.57-0.68(m,2h),0.30-0.39(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:378。实施例227-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉向7-氯-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg,1.19mmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(226mg,954μmol,实施例1中步骤3的产物)和cs2co3(1.94g,5.97mmol)在二恶烷(15ml)中的混合物中加入brettphospdg3(216mg,239μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物在氮气氛下于120℃加热搅拌48小时并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-氯-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(26mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.87-8.99(m,2h),8.55-8.70(m,2h),7.45-7.59(m,1h),7.25-7.38(m,1h),7.21(s,2h),4.62(s,2h),3.76(t,2h),3.02(s,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:324。实施例23n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-6-胺步骤1:6-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(2g,9.43mmol)、boc2o(2.26g,2.41ml,10.4mmol)和et3n(1.91g,2.63ml,18.9mmol)在thf(30ml)中的混合物于室温下搅拌3小时。将得到的混合物用碳酸钠水溶液稀释并用乙酸乙酯(30ml)萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到白色固体状6-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(2.9g)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:6-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将6-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(300mg,961μmol)、二甲基胺盐酸盐(235mg,2.88mmol)、叔丁醇钠(462mg,4.8mmol)、ruphos(44.8mg,96.1μmol)和pd2(dba)3(44mg,48μmol)在二恶烷(10ml)中的混合物于110℃加热过夜。然后将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝40:1,v:v)得到黄色油状6-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(240mg)。步骤3:n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-胺盐酸盐的制备向6-(二甲基氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(240mg,868μmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl的甲醇溶液(10ml)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-胺盐酸盐粗品(150mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-6-胺的制备向n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-胺盐酸盐(150mg,851μmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(161mg,681μmol,实施例1中步骤3的产物)和cs2co3(1.39g,4.26mmol)在二恶烷(15ml)中的混合物中加入brettphospdg3(154mg,170μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物在氮气氛下于120℃加热搅拌48小时。然后将混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-6-胺(120mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.81(d,2h),8.46(s,2h),7.37(t,1h),6.98(d,1h),6.43-6.63(m,2h),4.38(s,2h),3.58(t,2h),2.83-2.89(m,2h),2.80(s,6h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:333。实施例246-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:6-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将6-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(700mg,2.24mmol)、环丙基硼酸(770mg,8.97mmol)、磷酸钾(1.9g,8.97mmol)、三环己基膦(126mg,448μmol)和pd(oac)2(50.3mg,224μmol)在甲苯(20ml)中的混合物在氮气氛下于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝40:1,v:v)得到无色油状6-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(400mg)。步骤2:6-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐向6-环丙基-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-甲酸叔丁酯(400mg,1.46mmol)的meoh(10ml)溶液中加入hcl的甲醇溶液(10ml)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到6-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐粗品(200mg)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:6-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向6-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(150mg,866μmol)、5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(164mg,693μmol,实施例1中步骤3的产物)和cs2co3(1.41g,4.33mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物中加入brettphospdg3(157mg,173μmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物在氮气氛下于120℃加热搅拌48小时然后过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状6-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(29mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.82(d,2h),8.50(s,2h),7.34-7.45(m,1h),7.00-7.13(m,1h),6.77-6.91(m,2h),4.39-4.53(m,2h),3.54-3.72(m,2h),2.82-2.96(m,2h),1.70-1.88(m,1h),0.77-0.92(m,2h),0.48-0.67(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:330。实施例252-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-甲腈步骤1:1,2,3,4-四氢异喹啉-5-甲腈的制备向5-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.06g,10mmol)的dmf(3ml)溶液中加入氰化锌(875mg,7.5mmol)和pd(p(ph3)4(577mg,0.5mmol)。将得到的混合物在氮气氛下于100℃加热搅拌15小时，然后倒入水(30ml)中并用乙酸乙酯(50ml)萃取两次。将有机层合并并用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝20:1,v:v)得到黄色固体状1,2,3,4-四氢异喹啉-5-甲腈(400mg)。步骤2:2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-甲腈的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(711mg,3mmol,实施例1中步骤3的产物)和1,2,3,4-四氢异喹啉-5-甲腈(395mg,2.5mmol)在1,4-二恶烷(5ml)中的溶液中加入brettphospdg3(113mg,0.125mmol,cas注册号:1470372-59-8)和碳酸铯(1.63g,5mmol)。将得到的混合物在氮气氛下于110℃加热搅拌15小时，然后倒入水(30ml)中并用dcm(50ml)萃取两次。将有机层合并，然后用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到灰白色粉末状2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-甲腈(6mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.99(d,2h),8.67(s,2h),7.62(d,1h),7.51(d,1h),7.35-7.42(m,2h),4.63(s,2h),3.83(t,2h),3.30(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:315。实施例267-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备将7-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(450mg,1.44mmol)、3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐(178mg,1.44mmol)、叔丁醇钠(693mg,7.21mmol)、ruphos(67.3mg,144μmol)和pd2(dba)3(66mg,72.1μmol)在二恶烷(10ml)中的混合物于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝1/1,v:v)得到黄色油状7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(290mg)。步骤2:7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备向7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(290mg,911μmol)在二恶烷(5ml)中的溶液中加入盐酸(0.5ml)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐粗品，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备将5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(218mg,920μmol,实施例1中步骤3的产物)、7-(3-甲氧基环丁基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg,920μmol)、brettphospdg3(41.7mg,46μmol,cas注册号:1470372-59-8)和cs2co3(1.5g,4.6mmol)在二恶烷(5ml)中的混合物于110℃加热搅拌过夜。将得到的混合物过滤并将滤液通过制备型hplc纯化得到黄色固体状7-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(30mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:2.92(s,2h),3.21-3.31(m,1h),3.41-3.44(m,1h),3.47(s,3h),3.58-3.72(m,5h),4.49(s,2h),6.49-6.60(m,2h),7.01(d,1h),7.33(s,1h),8.57(s,2h),8.94(brd,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:375。实施例275-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:1-溴-3-氟-2-[(e)-2-硝基乙烯基]苯的制备将2-溴-6-氟苯甲醛(15.0g,73.9mmol)和nh4ac(14.24g,184.7mmol)在acoh(300ml)中的混合物于120℃搅拌4小时。将得到的混合物用水稀释(1.2l)并过滤。将滤饼真空干燥得到黄色固体状1-溴-3-氟-2-[(e)-2-硝基乙烯基]苯(15g)。步骤2:1-溴-3-氟-2-(2-硝基乙基)苯的制备向1-溴-3-氟-2-[(e)-2-硝基乙烯基]苯(15.0g,57.7mmol)的etoh(300ml)溶液中在0℃下分批加入nabh4(8.73g,230.7mmol)。然后将得到的混合物升温至室温并搅拌3小时。用nh4cl水溶液(100ml)终止反应并将得到的混合物用乙酸乙酯(200ml)萃取三次。将合并的有机相用盐水(200ml)洗涤，用硫酸钠干燥并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过快速柱纯化(洗脱剂：pe/ea＝20/1,v:v)得到淡黄色油状的1-溴-3-氟-2-(2-硝基乙基)苯(10g)。步骤3:2-(2-溴-6-氟-苯基)乙胺的制备向1-溴-3-氟-2-(2-硝基乙基)苯(8.33g,33.6mmol)在etoh(50ml)和水(50ml)中的溶液中加入nh4cl(8.98g,167.9mmol)和铁粉(9.38g,167.91mmol)。然后将得到的混合物于80℃加热搅拌1小时并过滤。将滤液真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm/meoh＝10/1,v:v)得到红色固体状2-(2-溴-6-氟-苯基)乙胺(7g)。步骤4:5-氟-3,4-二氢-2h-异喹啉-1-酮的制备向2-(2-溴-6-氟-苯基)乙胺(3.0g,13.8mmol)的甲苯(30ml)溶液中加入丁基二-1-金刚烷基膦(1.97g,5.5mmol)、na2co3(4.7g,41.3mmol)和pd2(dba)3(2.52g,2.75mmol)。将得到的混合物在2280mmhgco下加热至80℃并搅拌24小时。将反应混合物用dcm(100ml)稀释然后用水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用无水na2so4干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm/meoh＝10/1,v:v)得到黑色油，将其进一步通过制备型hplc纯化得到白色固体状5-氟-3,4-二氢-2h-异喹啉-1-酮(150mg)。步骤5:5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备将5-氟-3,4-二氢-2h-异喹啉-1-酮(150mg,0.91mmol)的thf(1ml)溶液在0℃下滴加到lialh4(138mg,3.63mmol)的thf(2ml)溶液中。将得到的混合物于25℃搅拌5小时。将反应混合物依次用h2o(0.14ml)和15％naoh(0.14ml)处理并将得到的混合物过滤。将滤液真空浓缩得到无色油状的5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉(130mg,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤6:5-氟-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉(130mg,0.86mmol)的dcm(2ml)溶液中加入boc2o(282mg,1.29mmol)和dipea(261mg,2.58mmol)。室温搅拌12小时并用dcm(80ml)稀释后，将得到的混合物用水(30ml)和盐水(30ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝30/1,v:v)得到黄色油状5-氟-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(200mg)。步骤7:5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备将5-氟-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(200mg,0.8mmol)在hcl的meoh溶液(3ml,4.0m)中的混合物室温搅拌3小时。将得到的反应混合物真空浓缩得到白色固体状5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(120mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤8:5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-氟-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(110mg,0.59mmol)的二恶烷(2ml)溶液中加入5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(208mg,0.88mmol,实施例1中步骤3的产物)、cs2co3(573mg,1.76mmol)和brettphospdg3(106mg,0.12mmol,cas注册号:1470372-59-8)。将得到的混合物于120℃搅拌12小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到白色固体状5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(18.5mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.96(d,2h),8.63(s,2h),7.33(t,1h),7.15-7.26(m,1h),7.04(d,1h),6.97(t,1h),4.59(s,2h),3.75(t,2h),3.05(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:308。实施例282-[[5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-基]氧基]乙酰胺将5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-醇(100mg,0.31mmol,实施例19中步骤1的产物)、2-溴乙酰胺(51mg,0.37mmol)和碳酸钾(64mg,0.46mmol)在dmf(2ml)中的混合物于70℃搅拌16小时。将得到的混合物冷却至室温并过滤。将滤液通过制备型hplc纯化得到白色固体状2-[[5-氟-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-7-基]氧基]乙酰胺(17mg)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δppm:8.95(brd,2h),8.68(s,2h),7.53(t,1h),6.79(s,1h),6.71(dd,1h),4.65(s,2h),4.52(s,2h),3.81(t,2h),2.94(t,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:381。实施例295-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉(4.24g,20mmol)和焦碳酸二叔丁酯(5.2g,24mmol)的thf(45ml)溶液中滴加tea(4.0g,40mmol)。将得到的混合物室温搅拌15小时，然后倒入水(50ml)中并用乙酸乙酯(75ml)萃取两次。将有机层合并，然后用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝5/1,v:v)得到白色固体状5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(5g)。步骤2:5-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(1.25g,4mmol)和环丙基硼酸(687mg,8mmol)的甲苯(10ml)溶液中加入乙酸钯(90mg,0.4mmol)、三环己基膦(224mg,0.8mmol)和磷酸钾(1.69g,8mmol)。将得到的混合物于110℃加热搅拌15小时。冷却至室温后，将得到的混合物倒入水(50ml)中并用乙酸乙酯(50ml)萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝5/1,v:v)得到白色固体状5-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(547mg)。步骤3:5-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备向5-环丙基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(547mg,2mmol)的ea(5ml)溶液中加入hcl(10ml,10mmol,1.0m的ea溶液)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到5-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(312mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:5-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(356mg,1.5mmol,实施例1中步骤3的产物)和5-环丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(312mg,1.8mmol)的二恶烷(5ml)溶液中加入brettphospdg3(62.7mg,0.075mmol,cas注册号:1470372-59-8)和碳酸铯(1.95g,6mmol)。将得到的混合物于110℃加热搅拌15小时。将得到的混合物倒入水(30ml)中并用dcm(50ml)萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到灰白色粉末状5-环丙基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(30mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.98(d,2h),8.65(s,2h),7.35(t,1h),7.15-7.22(m,1h),7.09(d,1h),6.97-7.03(m,1h),4.61(s,2h),3.80(t,2h),3.21(t,2h),1.90(tt,1h),0.85-1.03(m,2h),0.60-0.72(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:330。实施例30n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-胺步骤1:5-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-溴-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(212mg,1mmol)和二甲胺盐酸盐(652mg,8mmol)的1,4-二恶烷(15ml)溶液中加入pd2(dba)3(366mg,0.4mmol)、ruphos(372mg,0.8mmol)和叔丁醇钠(1.53g,16mmol)。于100℃加热搅拌15小时并冷却至室温后，将得到的混合物倒入水(50ml)中并用乙酸乙酯(50ml)萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过柱色谱纯化(洗脱剂：dcm:meoh＝20:1,v:v)得到黄色固体状5-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(415mg)。步骤2:n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-胺盐酸盐的制备向5-(二甲基氨基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(547mg,2mmol)的ea(5ml)溶液中加入hcl(10ml,1.0m的ea溶液)。将得到的混合物室温搅拌3小时然后真空浓缩得到n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-胺盐酸盐粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-胺的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(356mg,1.5mmol,实施例1中步骤3的产物)和n,n-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-5-胺盐酸盐(317mg,1.8mmol)的1,4-二恶烷(5ml)溶液中加入brettphospdg3(62.7mg,0.075mmol,cas注册号:1470372-59-8)和碳酸铯(1.95g,6mmol)。在氮气氛下于110℃加热搅拌15小时后，将得到的混合物倒入水(30ml)中并用dcm(50ml)萃取两次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到灰白色粉末状n,n-二甲基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉-5-胺(110mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.87(d,2h),8.50(s,2h),7.23(t,1h),7.12-7.18(m,1h),6.86-7.02(m,2h),4.50(s,2h),3.59(t,2h),2.88-3.14(m,2h),2.67-2.79(s,6h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:333。实施例315-氯-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:n-[(3-氯-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺的制备向3-氯-5-甲氧基-苯甲醛(3.0g,17.59mmol)和甲苯(3ml)的混合物中加入氨基乙醛二甲基缩醛(2.0g,19.34mmol)并将得到的混合物于120℃搅拌5小时。将得到的反应混合物真空浓缩并将残余物溶于meoh(3ml)。在0℃下向溶液中加入nabh4(660mg,17.46mmol)，将反应混合物升温至室温并搅拌30分钟。用h2o(10ml)终止反应并将得到的混合物用乙酸乙酯(10ml)萃取三次。将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到n-[(3-氯-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺(3.0g,粗品)，其不经任何进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇的制备将n-[(3-氯-5-甲氧基-苯基)甲基]-2,2-二甲氧基-乙胺(3.0g,粗品)在hcl(30ml,6m)中的混合物于40℃搅拌16小时。将得到的混合物真空浓缩得到5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇的粗品混合物(3.0g,粗品)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤3:5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备向5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-醇(3.0g,14.04mmol)在dcm(21ml)中的混合物中加入三乙基硅烷(3.5g,30.42mmol)和tfa(9ml)。将得到的混合物于40℃搅拌16小时然后真空浓缩得到5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的粗品混合物(2.5g,粗品)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤4:5-氯-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯和7-氯-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯的制备向5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(2.5g,粗品混合物)的dcm(30ml)溶液中加入tea(11ml,75.89mmol)和boc2o(4.0g,18.21mmol)。将得到的混合物室温搅拌12小时然后真空浓缩。将残余物溶于ea(30ml)。将得到的溶液用盐水(100ml)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过快速柱色谱纯化(洗脱剂：pe/ea＝30/1,v:v)得到7-氯-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(400mg)和5-氯-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(1.0g)。步骤5:5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备将5-氯-7-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(1.0g,3.36mmol)和hcl的乙酸乙酯溶液(20ml,4m)的混合物室温搅拌2小时。将得到的混合物真空浓缩。将残余物溶于meoh(3ml)并将溶液与k2co3(885mg,6.41mmol)一起室温搅拌2小时。将得到的混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物溶于dcm(30ml)并将溶液过滤。将滤液真空浓缩得到黄色油状5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(400mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤6:5-氯-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(287mg,1.21mmol,实施例1中步骤3的产物)和5-氯-7-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg,1.01mmol)、cs2co3(1.3g,4.05mmol)在1,4-二恶烷(3ml)中的混合物中加入ruphos(50mg)和pd2(dba)3(50mg)。在氮气氛下于120℃搅拌16小时并冷却至室温后，将得到的混合物过滤。将滤液真空浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状5-氯-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(48mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.97(d,2h),8.64(s,2h),7.33-7.37(m,1h),6.92(d,1h),6.73(d,1h),4.56(s,2h),3.83(s,3h),3.77(t,2h),3.04(t,2h)ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:354。实施例327-氯-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉步骤1:7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备将7-氯-5-甲氧基-3,4-二氢-1h-异喹啉-2-甲酸叔丁酯(400mg,1.34mmol)和hcl的乙酸乙酯溶液(10ml,4m)的混合物室温搅拌2小时。将得到的混合物真空浓缩并将残余物溶于meoh(3ml)。向溶液中加入k2co3(885mg,6.41mmol)。将得到的混合物室温搅拌2小时然后过滤。将滤液真空浓缩。将残余物溶于dcm(30ml)并将溶液过滤。将滤液真空浓缩得到黄色固体状7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。步骤2:7-氯-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉的制备向5-溴-2-嘧啶-2-基-嘧啶(287mg,1.21mmol,实施例1中步骤3的产物)和7-氯-5-甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉(200mg,1.01mmol)、cs2co3(1.3g,4.05mmol)在1,4-二恶烷(3ml)中的混合物中加入ruphos(50mg)和pd2(dba)3(50mg)。在氮气氛下于120℃搅拌16小时后，将得到的反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液真空浓缩并将残余物通过制备型hplc纯化得到淡黄色固体状7-氯-5-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(28mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:8.97(d,2h),8.63(s,2h),7.35(t,1h),6.56-6.62(m,2h),4.56(s,2h),3.83(s,3h),3.75(t,2h),2.97(t,2h),ms实测值(esi+)[(m+h)+]:354。实施例33乙基-5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉向5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(110mg,326μmol,实施例5)在meoh(5ml)和thf(5ml)中的溶液中加入nbs(116mg,652μmol)。将得到的混合物室温搅拌2小时然后用饱和na2so3水溶液终止反应。将得到的混合物用dcm(30ml)萃取两次。将合并的dcm层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物溶于thf(5ml)并将溶液冷却至-70℃。向冷却的溶液中加入三氟化硼乙醚合物(92.6mg,82.6μl2)和乙基溴化镁(978μl,978μmol,1.0m)的et2o溶液。将得到的混合物缓慢升温至室温并搅拌2小时。加入水终止反应并将得到的混合物用dcm(30ml)萃取两次。将合并的有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型hplc纯化得到白色固体状乙基-5-氟-7-甲氧基-2-(2-嘧啶-2-基嘧啶-5-基)-3,4-二氢-1h-异喹啉(10mg)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δppm:1.06(t,3h),1.80-2.12(m,2h),2.80-2.94(m,1h),3.04-3.17(m,1h),3.66-3.79(m,2h),3.82(s,3h),4.65-4.81(m,1h),6.56(s,2h),7.33-7.45(m,1h),8.50-8.76(m,2h),8.89-9.15(m,2h)。ms实测值:(esi+)[(m+h)+]:366。生物学实施例实施例34材料和方法hbv细胞系将组成性表达hbv的细胞系hepg2.2.15细胞(acs等.procnatlacadsciusa,84,(1987),4641-4)在保持在5％co2、37℃的dmem+glutamax-i培养基(invitrogen,carlsbad,ca,usa)中培养，所述培养基补充有10％胎牛血清(invitrogen)和最终浓度为200mg/l的g418(invitrogen)。hbsag试验将hepg2.2.15细胞一式两份地以1.5x104个细胞/孔接种到白色96孔板中。将细胞用化合物在dmso中的三倍系列稀释液处理。在所有孔中的最终dmso浓度为1％，并将dmso用作无药物对照。使用hbsag化学发光免疫测定(clia)试剂盒(autobiodiagnosticsco.，中国郑州，目录号：cl0310-2)来半定量地测量分泌的hbv抗原的水平。对于该检测，使用50μl/孔培养上清液并用hbsag化学发光免疫测定(clia)试剂盒(autobiodiagnosticsco.，中国郑州，目录号：cl0310-2)对hbsag进行定量，将50μl的上清液转移至clia测定板并将50μl的酶结合试剂添加到每个孔中。将板密封并在室温下温和搅拌1小时。弃去上清液-酶-混合物并将孔用300μl的pbs洗涤6次。通过将clia板正面向下放置在吸水纸巾上将残余液体除去。向每个孔中添加25μl的底物a和b。在温育10分钟后使用照度计(mithraslb940multimodemicroplatereader)测量发光度。生成剂量-响应曲线并使用e-workbooksuite(idbusinesssolutionsltd.,guildford,uk)外推ic50值。ic50定义为相比于无药物对照，hbsag分泌减少50％时的化合物浓度。按照本文的描述测试式i化合物抑制hbsag的能力。在以上试验中测试实施例化合物并发现其具有低于50μm的ic50。发现式i的特定化合物具有低于5.0μm的ic50。发现式i的更为特定的化合物具有低于0.50μm的ic50。hbsag试验的结果在表1中给出。表1:在hbsag试验中的活性数据hbvdna试验该试验采用实时qpcr(taqman)直接测量细胞上清液中的细胞外hbvdna拷贝数。将hepg2.2.15细胞接种于96孔微量滴定板中，然后用完全培养液(dmem,glutamax,10％fbs,1％青霉素/链霉素,250μg/mlgenetycin,最终dmso浓度为1％)处理。只使用靠内的孔以减少细胞培养过程中观察到的“边缘效应”，靠外的孔中充满完全培养液以使样品的蒸发减至最小。1小时后，将hepg2.2.15细胞用各种浓度的试验化合物一式两份地进行处理(根据测得的hbsagic50，使用5μm、2μm或0.5μm的最高浓度，进行1/3的连续稀释(总共稀释10次))。在首次加入试验化合物6天后，收集细胞培养上清液；用自动化系统(magnapure)进行dna提取，然后用实时qpcr/taqman试验检测hbvdna拷贝数。从hbvdna水平的降低计算抗病毒活性(ic50)。按照本文的描述测试本发明化合物抑制hbvdna的能力。在以上试验中测试实施例化合物并发现其具有低于50μm的ic50。hbvdna试验的结果在表2中给出。表2:在hepg2.2.15细胞中抗hbvdna生成的活性实施例号ic50(μm)80.292当前第1页12