一种产氢复合生物制剂的制作方法

文档序号:14724908发布日期:2018-06-19 04:58阅读:来源:国知局
技术特征:

1.一种产氢复合生物制剂,其包括蛋白核小球藻、屎肠球菌以及沼泽红假单胞菌。

2.根据权利要求1所述的复合生物制剂,其特征在于,所述复合生物制剂按照如下步骤制备而得:步骤1)制备种子液,步骤2)制备藻液,步骤3)制备复合菌液,步骤4)制备改良TAP培养液,步骤5)制备复合生物制剂。

3.根据权利要求2所述的复合生物制剂,其特征在于,所述复合生物制剂按照如下步骤制备而得:

步骤1)制备种子液:挑取蛋白核小球藻到盛有1L增殖培养基的培养瓶中,光照度150μmol·m-2·s-1,26℃培养,每天摇动三角瓶2-3次;培养3-4d得到处于对数生长期的种子液;

步骤2)制备藻液:将步骤1)的种子液按照6-8%的接种量接种到TAP培养液中进行培养4d,得到藻液;

步骤3)制备复合菌液:将屎肠球菌和沼泽红假单胞菌分别按照常规培养获得1×108CFU/ml的种子液,然后按照2:3的体积比混合得到混合种子液,再按照8%的接种量转到发酵培养基中,30℃培养12h,得到复合菌液;

步骤4)制备改良TAP培养液:往TAP培养液中添加亚油酸甘油酯,控制亚油酸甘油酯的浓度为1-1.5mg/L,得到改良TAP培养液;

步骤5)制备复合生物制剂:将藻液、复合菌液以及改良TAP培养液按照5-12:0.5-1:100-200的体积比混匀,即得。

4.根据权利要求2所述的复合生物制剂,其特征在于,所述增殖培养基每升含下述组分:葡萄糖3g,酵母粉1g,硝酸钠1g,亚硫酸钠1g,氯化钠0.5g,磷酸二氢钾0.5g,硫酸镁0.2g,硫酸亚铁0.1g。

5.根据权利要求2所述的复合生物制剂,其特征在于,所述步骤2)中,培养条件为:光照强度为150μmol·m-2·s-1的,光暗比为12h:12h,温度为26℃, pH为8。

6.根据权利要求2所述的复合生物制剂,其特征在于,所述发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜3%、玉米浆2.5%、豆粕2%、K2HPO4 0.1%、KH2PO4 0.1%、CaCO3 0.01%、FeSO40.005%、MnSO4 0.005%,余量为水,pH7.0。

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