本发明涉及一种o/w型皮克林乳液，尤其涉及一种羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶及其制备方法，以及该羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶制备的稳定o/w型皮克林乳液及其制备方法与应用，属于乳化剂技术领域。
背景技术：
皮克林乳液是指由固体胶体粒子稳定的乳液，在制备过程中不使用表面活性剂，具有良好的稳定性、生物相容性等优点。一般来说，无机粒子在皮克林乳液及其扩展应用领域受到广泛的关注。目前对皮克林乳液大多数的理解是从经过或不经过表面改性的二氧化硅纳米颗粒稳定的模型皮克林体系中得出的结论。然而，由于其生物降解性和生物相容性等问题，其在食品和制药行业的应用受到很大限制。目前的挑战以及正在出现的研究趋势是利用天然生物聚合物颗粒，这些颗粒在皮克林稳定剂制备方面是可行的，并且可以在商业规模上用于食品和制药领域。与基于无机和合成聚合物的皮克林乳液相比，可食用食品级颗粒稳定的乳液的研究很少，天然大分子因其生物可降解、生物相容性好、无毒等优点，越来越受到人们的重视。
人们期待在食品和相关领域制备具有高乳化质量的颗粒稳定剂，因此如何制备有效的颗粒乳化稳定剂成为研究的热点课题，也是目前业界研发人员亟待解决的问题。
技术实现要素：
本发明的主要目的在于提供一种羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶及其制备方法，以克服现有技术的不足。
本发明的另一主要目的在于提供基于前述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶制备o/w型皮克林乳液的方法及所获o/w型皮克林乳液。
本发明的另一主要目的在于提供前述o/w型皮克林乳液的应用。
为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：
本发明实施例提供了一种羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶的制备方法，其包括：
使羧甲基糊精和壳聚糖通过静电络合形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
在一些实施例中，所述制备方法具体包括：在25～30℃下，ph值为3～6的反应体系中，使羧甲基糊精与壳聚糖按照体积比为1：1～4混合，通过静电络合形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
在一些实施例中，所述制备方法还包括：于35～40℃对聚合度均一的糊精进行碱化反应3～5h，之后在ph值为6.5～7.5的条件下，使包含所述糊精和一氯乙酸的混合体系于40～45℃进行醚化反应6～8h，获得取代度高且均一的羧甲基糊精。
在一些实施例中，所述制备方法还包括：使糯玉米淀粉加热糊化冷却至50～55℃，之后加入异淀粉酶进行脱枝处理20～25h，对所获产物于25～30℃进行水浴处理，再采用聚乙二醇逐步沉淀法对水浴处理所获产物进行分级，获得聚合度均一的糊精。
本发明实施例还提供了由前述方法制备的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
优选的，所述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶的形态为球形，粒径分布为80～100nm。
本发明实施例还提供了一种o/w型皮克林乳液的制备方法，其包括：
按照前述方法制备羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；
采用高压均质技术，使油相和所述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶均匀混合，获得o/w型皮克林乳液。
在一些实施例中，所述制备方法具体包括：使所述油相和羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶均匀混合，形成油水混合物，采用高压均质技术，以12000～20000rpm的转速对所述油水混合物于25～30℃下进行剪切2～5min，获得o/w型皮克林乳液。
进一步地，所述高压均质技术采用的均化压力为120～200mpa。
本发明实施例还提供了由前述方法制备的o/w型皮克林乳液。
进一步地，所述o/w型皮克林乳液的形态为球形，粒径分布为60～70μm，所述o/w型皮克林乳液中的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层。
本发明实施例还提供了前述的o/w型皮克林乳液于食品、医药或化妆品领域中的用途。
与现有技术相比，本发明的优点包括：
本发明以羧甲基糊精和壳聚糖为原料，采用静电络合的方法，制备羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶，再采用高压均质的方法，制备复合型纳米凝胶稳定的o/w型皮克林乳液；同时，本发明制备的皮克林乳液具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
具体实施方式
鉴于现有技术存在的技术问题，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案。如下将对该技术方案、其实施过程及原理等作进一步的解释说明。
本发明实施例的一个方面提供的一种羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶的制备方法，其包括：
使羧甲基糊精和壳聚糖通过静电络合形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
在一些实施例中，所述制备方法具体包括：在25～30℃下，ph值为3～6的反应体系中，使羧甲基糊精与壳聚糖按照体积比为1:1～4混合，通过静电络合形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
在一些实施例中，所述制备方法还包括：于35～40℃对聚合度均一的糊精进行碱化反应3～5h，之后在ph值为6.5～7.5的条件下，使包含所述糊精和一氯乙酸的混合体系于40～45℃进行醚化反应6～8h，获得取代度高且均一的羧甲基糊精。
进一步地，所述糊精与一氯乙酸的摩尔比为1：0.8～1.5。
进一步地，所述羧甲基糊精中一氯乙酸的取代度为0.9～1.0。
在一些实施例中，所述制备方法还包括：使糯玉米淀粉加热糊化冷却至50～55℃，之后加入异淀粉酶进行脱枝处理20～25h，对所获产物于25～30℃进行水浴处理，再采用聚乙二醇逐步沉淀法对水浴处理所获产物进行分级，获得聚合度(dp)均一的糊精。
进一步地，所述异淀粉酶与糯玉米淀粉的质量比为0.005～0.01：1。
进一步地，所述糊精的聚合度(dp)为80～100。
本发明实施例的另一个方面还提供了由前述方法制备的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
优选的，所述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶的形态为球形，粒径分布为80～100nm。
本申请中制备羧甲基糊精/壳聚糖复合型纳米凝胶的机理可能在于：糯玉米淀粉在异淀粉酶的作用下水解成糊精，然后采用聚乙二醇逐步沉淀法分级得到聚合度均一的糊精，在氯乙酸的作用下，经40℃水浴加热，进行醚化反应，制备高取代度的羧甲基糊精，使具有阴离子特性的羧甲基糊精易于与具有阳离子特性的天然阳离子多糖壳聚糖之间发生静电络合作用，从而形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
本发明实施例的另一个方面还提供了一种o/w型皮克林乳液的制备方法，其包括：
按照前述方法制备羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；
采用高压均质技术，使油相和所述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶均匀混合，获得o/w型皮克林乳液。
在一些实施例中，所述制备方法具体可包括：利用具有阴离子特性的羧甲基糊精和具有阳离子特性的壳聚糖为原料，采用静电络合的方法，制备羧甲基糊精/壳聚糖复合型纳米凝胶(80-100nm)，然后以复合型纳米凝胶为原料与玉米油混合，采用高压均质的方法，制备复合纳米凝胶稳定的o/w型皮克林乳液。
在一些实施例中，所述制备方法具体包括：使所述油相和羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶均匀混合，形成油水混合物，采用高压均质技术，以12000～20000rpm的转速对所述油水混合物于25～30℃下进行剪切2～5min，获得o/w型皮克林乳液。
进一步地，所述高压均质技术采用的均化压力为120～200mpa。
进一步地，所述油相与羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶的体积比为0.8～1.5：1。
进一步地，所述油相包括玉米油，但不限于此。
进一步地，所述壳聚糖的脱乙酰度为75～85％，重均分子量为50～190kda。
作为本发明的优选实施方案之一，一种o/w型皮克林乳液的制备方法可以包括：
(1)糊精的制备：以糯玉米淀粉为原料，将其加热糊化冷却至50℃，加入异淀粉酶对其脱枝处理24h后离心收集，25℃水浴处理并采用聚乙二醇逐步沉淀法对其进行分级，得到聚合度(dp)均一的糊精。
(2)羧甲基糊精的合成：以步骤(1)所获聚合度均一的糊精和氯乙酸为原料，40℃水浴加热，使用氢氧化钠碱化5h后，加入一氯乙酸进行醚化反应8h，合成取代度高且均一的羧甲基糊精。
(3)羧甲基糊精/壳聚糖纳米凝胶的合成：在ph4时，将步骤(2)所获羧甲基糊精与壳聚糖溶液按体积比1:3混合，通过静电络合，形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
(4)高压均质制备稳定的o/w型皮克林乳液：在等体积分数的水相和油相中制备乳液。简言之，将10ml玉米油添加到10ml的步骤(3)所获羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在室温下将油-水混合物剪切2min得到稳定的o/w型皮克林乳液。
其中，作为本发明的一更为优选的实施案例之一，所述制备具体还可以包括以下步骤：
1、糊精的制备：将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至50℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解24h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末。然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至25℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)位80-100的糊精。
2、羧甲基糊精的合成：在三口圆底烧瓶中依次加入95％的乙醇，步骤(1)所获糊精，40℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化5h，再加入一定量的一氯乙酸溶液进行醚化反应8h，使用冰醋酸调节溶液的ph为6.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥。
3、羧甲基糊精/壳聚糖纳米凝胶的合成：将0.5wt％的步骤(2)所获羧甲基糊精滴加进0.5wt％的壳聚糖溶液中并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，两者的体积比为1:3，在反应过程中保持体系的ph4，形成羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶。
4、高压均质法制备稳定的o/w型皮克林乳液：在等体积分数的水相和油相中制备乳液。简言之，将10ml玉米油添加到10ml的步骤(3)所获羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在室温下将油-水混合物剪切2min，均化压力为120mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。
本发明实施例的另一个方面还提供了由前述方法制备的o/w型皮克林乳液。
进一步地，所述o/w型皮克林乳液的形态为球形，粒径分布为60～70μm，所述o/w型皮克林乳液具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)。
本发明实施例的另一个方面还提供了前述的o/w型皮克林乳液于食品、医药或化妆品领域中的用途。
本发明制备o/w型皮克林乳液的机理可能在于：本申请中利用具有阴离子特性的羧甲基糊精和具有阳离子特性的壳聚糖为原料，采用静电络合的方法，制备羧甲基糊精/壳聚糖复合型纳米凝胶，然后以复合型纳米凝胶为原料与玉米油混合，采用高压均质的方法，制备稳定的o/w型皮克林乳液。目标皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
以下通过若干实施例并进一步详细说明本发明的技术方案。然而，所选的实施例仅用于说明本发明，而不限制本发明的范围。
实施例1
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至50℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解24h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至25℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，40℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化4h，再加入一氯乙酸溶液于40℃进行醚化反应8h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：0.8，使用冰醋酸调节溶液的ph为6.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为0.9的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在25℃下，将羧甲基糊精按体积比1:2滴加进壳聚糖溶液中并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为3，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将10ml玉米油添加到10ml形成的前述羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以12000rpm在25℃下将油-水混合物剪切2min，均化压力为120mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
实施例2
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至55℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解20h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至25℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，35℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化5h，再加入一氯乙酸溶液于45℃进行醚化反应6h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：1.5，使用冰醋酸调节溶液的ph为6.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为0.95的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在25℃下，将羧甲基糊精滴加进壳聚糖溶液中，两者之间的体积比为1：3并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为4，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将8ml玉米油添加到10ml的前述形成的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以16000rpm在25℃下将油-水混合物剪切4min，均化压力为150mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
实施例3
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至50℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解24h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至25℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，38℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化3h，再加入一氯乙酸溶液于42℃进行醚化反应8h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：1，使用冰醋酸调节溶液的ph为7.0，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为0.95的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在28℃下，将羧甲基糊精滴加进壳聚糖溶液中，两者之间的体积比为1：4，并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为6，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将10ml玉米油添加到10ml的前述形成的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在30℃下将油-水混合物剪切2min，均化压力为160mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
实施例4
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至50℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解25h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至25℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，40℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化5h，再加入一氯乙酸溶液于45℃进行醚化反应7h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：1.5，使用冰醋酸调节溶液的ph为7.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为1.0的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在25℃下，将羧甲基糊精滴加进壳聚糖溶液中，两者之间的体积比为1:3，并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为5，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将11ml玉米油添加到10ml的前述形成的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在25℃下将油-水混合物剪切5min，均化压力为200mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
实施例5
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至55℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解24h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至28℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，40℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化5h，再加入一氯乙酸溶液进行醚化反应7h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：0.8，使用冰醋酸调节溶液的ph为6.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为0.98的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在30℃下，将羧甲基糊精滴加进壳聚糖溶液中，两者之间的体积比为1：4，并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为6，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将10ml玉米油添加到10ml的前述形成的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在28℃下将油-水混合物剪切3min，均化压力为150mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
实施例6
将糯玉米淀粉分散于乙酸缓冲液(0.05m，ph5.0)中并煮沸35min，之后于121℃高压灭菌1h使其完全糊化，然后将其冷却至52℃，加入异淀粉酶(60u/g)水解20h，随后加入过量的95％的无水乙醇终止水解反应，收集反应液，在3800rpm下离心15min后对沉淀物进行收集，并用95％的乙醇洗涤三次，随后放入45℃的烘箱中干燥24h，取出干燥物并放入研钵中研磨直至成细碎的粉末，然后将淀粉水解物溶于蒸馏水中，配置成1.0％-4.0％的糊精溶液，加入一定量的聚乙二醇加热搅拌至聚乙二醇溶解，溶液澄清，于室温下冷却至30℃水浴24h，得到沉淀后于4500g下离心10min，使用三氯甲烷洗去聚乙二醇，40℃干燥并粉碎得到糊精分级组分，重复多次，直至得到聚合度(dp)为80-100的糊精；在三口圆底烧瓶中依次加入95％的250ml乙醇，20g糊精，40℃水浴加热，并以300转/分钟的速度搅拌，然后缓慢的加入氢氧化钠碱化5h，再加入一氯乙酸溶液进行醚化反应8h，其中，所述糊精和一氯乙酸的摩尔比为1：1，使用冰醋酸调节溶液的ph为6.5，得到的羧甲基糊精用90％的乙醇进行多次洗涤抽滤，然后将滤饼在45℃的烘箱中干燥，制备取代度为0.95的羧甲基糊精。称取0.5g的壳聚糖溶于1wt％的冰醋酸中配置0.5wt％的壳聚糖溶液，将0.5g的羧甲基糊精溶于蒸馏水中，配置成0.5wt％的羧甲基糊精溶液，在25℃下，将羧甲基糊精滴加进壳聚糖溶液中，两者之间的体积比为1：1，并且以450转/分钟充分搅拌混合均匀，维持反应过程中的ph值为4，从而获得羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶；将15ml玉米油添加到10ml的前述形成的羧甲基糊精/壳聚糖复合纳米凝胶中，并使用均化器以20000rpm在30℃下将油-水混合物剪切2min，均化压力为120mpa，循环5次得到稳定的o/w型皮克林乳液。制备的皮克林乳液形态结构为球形，粒径分布为60-70μm，具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性(60d)，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
综上所述，藉由本发明的上述技术方案获得的o/w型皮克林乳液具有良好的乳化性能，胶体颗粒能够在油/水界面不可逆地吸附和锚定，形成致密层增加了空间位阻效应从而提高了乳液的稳定，并显著的提高了乳液抵抗聚结和ostwald熟化的能力，具有长期的储存稳定性，在食品、医药和化妆品等领域具有广泛用途。
此外，本案发明人还参照实施例1～6的方式，以本说明书中列出的其它原料和条件等进行了试验，并同样制得了具有良好的乳化性能和储存稳定性的o/w型皮克林乳液。
应当理解的是，上述实施例仅为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。