本发明属于药物化学领域，具体涉及一类具有toll样受体调节作用的化合物、其药物组合物、制备方法及用途。
背景技术
toll样受体(toll-likereceptors,tlr)是参与非特异性免疫(天然免疫)的一类重要蛋白质分子，也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁。tlr是单个的跨膜非催化性蛋白质，可以识别来源于微生物的具有保守结构的分子。当微生物突破机体的物理屏障，如皮肤、粘膜等时，tlr可以识别它们并激活机体产生免疫细胞应答。toll样受体的特征在于胞外富含亮氨酸的结构域和含有保守区域的细胞质延伸的主要跨膜蛋白。固有免疫系统可通过在某些类型的免疫细胞的细胞表面上表达这些tlr来监视与识别病原体相关分子模型。外援病原体的识别激活吞噬细胞上细胞因子的产生和共刺激分子的上调。这导致t细胞行为的调节。其中tlr4不但可识别外源的病原体，还可识别内源性物质及降解物。新近研究发现，tlr在获得性免疫系统中也具有识别与调节作用，甚至在肿瘤免疫监视中也可能发挥了一定作用。
toll样受体胞膜外区主要行使识别受体及与其他辅助受体(co-receptor)结合形成受体复合物的功能。toll样受体的胞浆区与il-1r家族成员胞浆区高度同源(il-1r介导的信号传导系统和机制与果蝇类似)，该区称为toll-il-1受体结构域(toll-il-1receptordomain，tir结构域)。tir具有嗜同性相互作用(homophilicinteraction)，藉此来募集下游含有tir的信号分子，组成信号复合体。但是二者胞外部分不相关，tlr胞膜外区为有17个～31个亮氨酸富集的重复序列(leucinerichrepeats，lrrs)，并且都含有3个胞外段辅助蛋白即md-1、md-2和rp105，参与对疾病相关分子模式(pamp)的识别；而il-1r为ig样的结构，在哺乳动物中，一些胞浆蛋白也存在tir域，如2种信号接受蛋白，myd88和tir域的接受子蛋白(tirdomain-containingadaptorprotein，tirap)，二者在tir信号传导中起作用。目前，在大部分哺乳动物及人类中已经发现的toll样受体家族成员有十一到十五种。其中了解比较清楚的有tlr2、tlr4、tlr5和tlr9。在人类中发现的某些tlr的等价型并不存在于所有哺乳动物中。例如，一种编码类似于人类中tlr10的蛋白质的基因存在于小鼠中，但是该基因显现出过去在某位点被一种反转录病毒损坏。另一方面，小鼠表达的tlr11、tlr12和tlr13均不在人类中呈现。其他哺乳动物可表达未在人类中发现的tlr。
tlr如同天然免疫的眼睛，监视与识别各种不同的疾病相关分子模式(pamp)，是机体抵抗感染性疾病的第一道屏障。其中tlr4不但可识别外源的病原体，还可识别内源性物质及降解物。并且，toll样受体在获得性免疫中的具有识别作用。机体最强的抗原呈递细胞——树突细胞可表达tlr。借助tlr识别lps、gpg-dna、肽聚糖、脂蛋白以及分支杆菌的细胞壁成分等具有pamp的分子，树突细胞被活化而成熟，提供获得性免疫的共刺激信号。因此tlr是微生物成分引起树突细胞活化的桥梁。
因此，研究和开发改善的高效低毒、抗耐药性或具有临床应用价值的toll样受体调节剂具有较大的社会意义。
技术实现要素：
为改善上述问题，本发明提供下式x所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐，
其中，a、b相同或不同，彼此独立地代表cra或n；
e代表cra、n或nrb；
d代表h、o、oh或nr4r5；
r1、r2相同或不同，彼此独立地代表h、无取代或任选被一个或多个rc取代的下列基团：c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c1-40烷氧基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
r3代表-nr4r5、-or6；
r4、r5、r6相同或不同，彼此独立地选自h，无取代或任选被一个或多个rd取代的下列基团：c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
或者，r4和r5与其所连接的氮原子一起形成选自无取代或任选被一个或多个re取代的下列环系：3-20元杂环基、5-20元杂芳基；
每一个ra、rb相同或不同，彼此独立地代表h、无取代或任选被一个或多个rc取代的下列基团：c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c1-40烷氧基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
每一个rc、rd、re相同或不同，彼此独立地选自-f、-cl、-br、-i、-oh、-sh、-cn、＝o、-no2、无取代或任选被一个或多个rg取代的下列基团：-nh2、c1-40烷基、c1-40烷基氧基、c1-40烷基硫基、c2-40烯基、c2-40烯基氧基、c2-40烯基硫基、c2-40炔基、c2-40炔基氧基、c2-40炔基硫基、c3-20环烷基、c3-20环烷基氧基、c3-20环烷基硫基、3-20元杂环基、3-20元杂环基氧基、3-20元杂环基硫基、c6-20芳基、c6-20芳基氧基、c6-20芳基硫基、5-20元杂芳基、5-20元杂芳基氧基、5-20元杂芳基硫基；
每一个rg相同或不同，彼此独立地选自h、c1-40烷基、c2-40烯基、c2-40炔基、c3-20环烷基、3-20元杂环基、c6-20芳基、5-20元杂芳基；
根据本发明示例性的实施方案，a、b相同或不同，彼此独立地代表ch、c-c1-8烷基或n，所述c1-8烷基无取代或任选被一个或多个如下基团取代：f或c1-8烷基；例如a、b相同或不同，彼此独立地代表n、ch、c-cf3；
根据本发明示例性的实施方案，e代表ch、c-c1-8烷基、n或nh，所述c1-8烷基无取代或任选被一个或多个如下基团取代：f或c1-8烷基；例如e代表ch、n或nh。
根据本发明示例性的实施方案，r1、r2相同或不同，彼此独立地代表h、无取代或任选被一个或多个f取代的下列基团：c1-8烷基、c1-8烷氧基、或c3-6环烷基；
例如，r1、r2相同或不同，彼此独立地代表h、-cf3、甲基、乙基、丙基、丁基、异丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、正丁氧基、环丁基、或环戊基；
r3可以代表-nr4r5或-or6，其中r4、r5、r6相同或不同，彼此独立地选自h或c1-8烷基，所述c1-8烷基可任选被一个或多个如下基团所取代：-nh2、-nh-c1-8烷基、-n(c1-8烷基)2、-oh、＝o、c1-8烷基；
或者，r4和r5与其所连接的氮原子一起形下列环系：3-8元杂环基，所述3-8元杂环基可任选被一个或多个如下基团所取代：-nh2、-oh、或c1-8烷基；
例如，r3代表如下基团：
其中，
根据示例性的实施方案，所述式x所示的化合物选自包括但不限于如下化合物：
本发明还提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的式x所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种、两种或者多种。
根据本发明的实施方案，所述药物组合物还任选包含其药学上可接受的辅料，例如载体、赋形剂；所述辅料选自下列中的一种、两种或多种：崩解剂、助流剂、润滑剂、稀释剂或填充剂、粘合剂、着色剂。
本发明还提供式x所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种、两种或者多种在制备药物中的用途。
根据本发明的实施方案，所述药物用于预防或治疗与toll样受体相关的疾病。例如，所述疾病选自病毒感染、肿瘤、抑郁、器官移植排斥或自身免疫性疾病。
根据本发明，所述病毒感染例如为hiv、hbv、hcv感染。
根据本发明，所述肿瘤选自乳腺癌、皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、直肠癌、食管癌、舌癌、肾癌、肾实质癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、星型细胞癌、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人t细胞白血病淋巴瘤、肝细胞癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、或纤维肉瘤。
本发明还提供预防或治疗与toll样受体相关的疾病的方法，包括向需要此种预防或治疗的患者给予治疗有效量的式x所示的化合物、其立体异构体、消旋体、互变异构体、同位素标记物、氮氧化物、溶剂合物或其药学上可接受的盐中的一种、两种或者多种。
本发明还提供式x化合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)中间体iii的合成：化合物i与化合物ii进行反应得到化合物iii；
(2)中间体iv的合成：步骤(1)得到的化合物iii进行反应得到化合物iv；
(3)化合物x的合成：步骤(2)得到的化合物iv与化合物r3h反应生成化合物x；
其中a、b、d、e、r1、r2、r3具有如上所述定义；l选自离去基团，例如ots、i、br或cl。
根据本发明的制备方法，步骤(1)中，
所述反应在20℃至100℃温度下进行；
反应中使用的溶剂为醇类溶剂、醚类溶剂、芳烃类溶剂中的一种、两种或更多种；例如选自乙醇、异丙醇、二氧六环、四氢呋喃、甲苯等中的一种、两种或更多种。
根据本发明的制备方法，步骤(2)中，
所述反应在20℃至100℃温度下进行；
所述反应为碱性水解或酸性水解反应，优选为碱性水解；
所述碱性水解使用的碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂等中的一种、两种或更多种；
根据本发明的制备方法，步骤(3)中，
所述反应在20℃至100℃温度下进行；
所述反应在缩合剂的存在下进行；所述缩合剂选自edci.hcl(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)、hatu(2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯)、bop-cl(双(2-氧代-3-恶唑烷基)次磷酰氯)、dcc(n,n'-二环己基碳酰亚胺)中的一种、两种或更多种；
所述反应在碱的存在下进行；所述碱选自三乙胺、二异丙基乙胺、n-甲基吗啉、dmap中的一种、两种或更多种。
有益效果
本发明化合物可作为toll样受体调节剂，其具有良好的tlr7/8调节活性。此外，本发明化合物具有良好的细胞毒性，适于药用，具有临床应用价值。并且，本发明化合物合成步骤简单，因此具备良好的经济利用价值。
术语定义和说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。
术语“c1-40烷基”应理解为优选表示具有1～40个碳原子的直链或支链饱和一价烃基，优选为c1-10烷基。“c1-10烷基”应理解为优选表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2、3、4、5、6、个碳原子(“c1-6烷基”)，例如甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基，更特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子(“c1-3烷基”)，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基。
术语“c2-40烯基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2～40个碳原子，优选“c2-10烯基”。“c2-10烯基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个双键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，特别是2或3个碳原子(“c2-3烯基”)，应理解，在所述烯基包含多于一个双键的情况下，所述双键可相互分离或者共轭。所述烯基是例如乙烯基、烯丙基、(e)-2-甲基乙烯基、(z)-2-甲基乙烯基、(e)-丁-2-烯基、(z)-丁-2-烯基、(e)-丁-1-烯基、(z)-丁-1-烯基、戊-4-烯基、(e)-戊-3-烯基、(z)-戊-3-烯基、(e)-戊-2-烯基、(z)-戊-2-烯基、(e)-戊-1-烯基、(z)-戊-1-烯基、己-5-烯基、(e)-己-4-烯基、(z)-己-4-烯基、(e)-己-3-烯基、(z)-己-3-烯基、(e)-己-2-烯基、(z)-己-2-烯基、(e)-己-1-烯基、(z)-己-1-烯基、异丙烯基、2-甲基丙-2-烯基、1-甲基丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、(e)-1-甲基丙-1-烯基、(z)-1-甲基丙-1-烯基、3-甲基丁-3-烯基、2-甲基丁-3-烯基、1-甲基丁-3-烯基、3-甲基丁-2-烯基、(e)-2-甲基丁-2-烯基、(z)-2-甲基丁-2-烯基、(e)-1-甲基丁-2-烯基、(z)-1-甲基丁-2-烯基、(e)-3-甲基丁-1-烯基、(z)-3-甲基丁-1-烯基、(e)-2-甲基丁-1-烯基、(z)-2-甲基丁-1-烯基、(e)-1-甲基丁-1-烯基、(z)-1-甲基丁-1-烯基、1,1-二甲基丙-2-烯基、1-乙基丙-1-烯基、1-丙基乙烯基、1-异丙基乙烯基。
术语“c2-40炔基”应理解为表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2～40个碳原子，优选“c2-c10炔基”。术语“c2-c10炔基”应理解为优选表示直链或支链的一价烃基，其包含一个或多个三键并且具有2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子，特别是2或3个碳原子(“c2-c3-炔基”)。所述炔基是例如乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、戊-3-炔基、戊-4-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、己-4-炔基、己-5-炔基、1-甲基丙-2-炔基、2-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-2-炔基、3-甲基丁-1-炔基、1-乙基丙-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-4-炔基、1-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-3-炔基、1-甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-异丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特别地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
术语“c3-20环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～20个碳原子，优选“c3-10环烷基”。术语“c3-10环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子。所述c3-10环烷基可以是单环烃基，如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如十氢化萘环。
术语“3-20元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，优选“3-10元杂环基”。术语“3-10元杂环基”意指饱和的一价单环或双环烃环，其包含1-5个，优选1-3个选自n、o和s的杂原子。所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。特别地，所述杂环基可以包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元环，如二氮杂环庚烷基。任选地，所述杂环基可以是苯并稠合的。所述杂环基可以是双环的，例如但不限于5,5元环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1h)-基环，或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1h)-基环。含氮原子的环可以是部分不饱和的，即它可以包含一个或多个双键，例如但不限于2,5-二氢-1h-吡咯基、4h-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氢噁唑基或4h-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氢异喹啉基。根据本发明，所述杂环基是无芳香性的。
术语“c6-20芳基”应理解为优选表示具有6～20个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环，优选“c6-14芳基”。术语“c6-14芳基”应理解为优选表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环、双环或三环烃环(“c6-14芳基”)，特别是具有6个碳原子的环(“c6芳基”)，例如苯基；或联苯基，或者是具有9个碳原子的环(“c9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者是具有10个碳原子的环(“c10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基，或者是具有13个碳原子的环(“c13芳基”)，例如芴基，或者是具有14个碳原子的环(“c14芳基”)，例如蒽基。
术语“5-20元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5～20个环原子且包含1-5个独立选自n、o和s的杂原子，例如“5-14元杂芳基”。术语“5-14元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环、双环或三环芳族环系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是5或6或9或10个碳原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自n、o和s的杂原子并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4h-吡唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。
除非另有说明，杂环基、杂芳基或亚杂芳基包括其所有可能的异构形式，例如其位置异构体。因此，对于一些说明性的非限制性实例，吡啶基或亚吡啶基包括吡啶-2-基、亚吡啶-2-基、吡啶-3-基、亚吡啶-3-基、吡啶-4-基和亚吡啶-4-基；噻吩基或亚噻吩基包括噻吩-2-基、亚噻吩-2-基、噻吩-3-基和亚噻吩-3-基。
可以根据已知的方法，例如通过萃取、过滤或柱层析来分离目标化合物。
根据其分子结构，本发明的化合物可以是手性的，因此可能存在各种对映异构体形式。因而这些化合物可以以消旋体形式或光学活性形式存在。本发明的化合物或其中间体可以通过本领域技术人员公知的化学或物理方法分离为对映异构体化合物，或者以此形式用于合成。在外消旋的胺的情况中，通过与光学活性的拆分试剂反应，从混合物制得非对映异构体。适当的拆分试剂的示例是光学活性的酸，例如r和s形式的酒石酸、二乙酰酒石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸、适当的n-保护的氨基酸(例如n-苯甲酰脯氨酸或n-苯磺酰基脯氨酸)或各种光学活性的樟脑磺酸。借助光学活性的拆分试剂(例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸、三乙酸纤维素或其它碳水化合物的衍生物或手性衍生化的异丁烯酸酯聚合物)，也可有利地进行色谱对映体拆分。用于此目的的适当的洗脱剂是含水或含醇的溶剂混合物，例如，己烷/异丙醇/乙腈。
药学上可接受的盐可以是例如在链或环中具有氮原子的具有足够碱性的本发明的化合物的酸加成盐，例如与如下无机酸形成的酸加成盐：例如盐酸、氢氟酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸或硝酸，或硫酸氢盐、或者与如下有机酸形成的酸加成盐：例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻酸、马来酸、富马酸、d-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。
由于本发明的化合物可存在多个成盐位点，所述“药学上可接受的盐”不仅包括本发明化合物其中1个成盐位点上形成的盐，而且还包括其中2、3或全部成盐位点上形成的盐。为此，所述“药学上可接受的盐”中式(i)化合物与成盐所需的酸的根离子(阴离子)或碱的阳离子摩尔比可以在较大的范围内变化，例如可以是4:1～1:4，如3:1、2:1、1:1、1:2、1:3等。
根据本发明，药学上可接受的阴离子包括选自由无机酸或有机酸电离生成的阴离子。所述“无机酸”包括但不限于盐酸、氢氟酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、焦硫酸、磷酸或硝酸。所述“有机酸”包括但不限于甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊烷丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘甲酸、烟酸、扑酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、特戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻酸、马来酸、富马酸、d-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。
术语“有效量”或者“治疗有效量”是指足以实现预期应用(包括但不限于如下定义的疾病治疗)的本发明所述化合物的量。治疗有效量可以取决于以下因素而改变：预期应用(体外或者体内)，或者所治疗的受试者和疾病病症如受试者的重量和年龄、疾病病症的严重性和给药方式等，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。具体剂量将取决于以下因素而改变：所选择的特定化合物、所依据的给药方案、是否与其它化合物组合给药、给药的时间安排、所给药的组织和所承载的物理递送系统。
术语“辅料”是指可药用惰性成分。赋形剂种类的实例非限制性地包括粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂和稀释剂等。赋形剂能增强药物制剂的操作特性，即通过增加流动性和/或粘着性使制剂更适于直接压缩。适用于上述制剂的典型的药学上可接受的载体的实例为：糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；淀粉类，例如玉米淀粉、木薯淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和甲基纤维素；磷酸钙类，例如磷酸二钙和磷酸三钙；硫酸钠；硫酸钙；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯醇；硬脂酸；硬脂酸碱土金属盐，例如硬脂酸镁和硬脂酸钙；硬脂酸；植物油类，例如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油和玉米油；非离子、阳离子和负离子表面活性剂；乙二醇聚合物；脂肪醇类；和谷物水解固形物以及其它无毒的可相容的填充剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧剂、润滑剂、着色剂等在药物制剂中常用到的辅料。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明。下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
实施例1
2-(吗啉基-4-羰基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-4(5h)-酮的制备
第一步：
将化合物1a(16.1g，100mmol)，1b(19.5g，100mmol)溶于乙醇(200ml)中，升温至回流，搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后减压浓缩，柱层析分离得到类白色固体20.3g，收率79.0％。
第二步：
将第一步得到的化合物1c(20.0g，77.7mmol)溶于乙醇(100ml)和水(100ml)混合溶剂中，室温下加入氢氧化钠(6.2g，155.5mmol)，于40℃搅拌反应6小时，tlc检测反应，反应完毕后，减压除去乙醇，剩余的溶液倒入搅拌的稀盐酸中，析出固体，过滤，滤饼用水洗涤，干燥得到类白色固体14.8g，收率83.1％。
第三步：
将第二步得到的化合物1d(1.0g，4.4mmol)、吗啉(380mg，4.4mmol)、dipea(844mg，6.5mmol)溶于dmf(20ml)中，室温下加入hatu(2.5g，6.5mmol)，室温搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后加入水(20ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50mlx2)提取，合并有机层，浓缩，柱层析分离得到类白色固体670mg，收率51.5％，ms-esi:m/z＝299.3[m+1]。
实施例2
下式所示化合物2-(4-甲基哌啶基-1-羰基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-4(5h)-酮的制备:参考实施例1的方法进行制备，ms-esi:m/z＝312.3[m+1]。
实施例3
下式所示化合物2-(4-哌啶基-1-羰基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-4(5h)-酮的制备：参考实施例1的方法进行制备，ms-esi:m/z＝298.3[m+1]。
实施例4
下式所示化合物2-(3-甲基哌啶基-1-羰基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-4(5h)-酮的制备：参考实施例1的方法进行制备，ms-esi:m/z＝298.3[m+1]。
实施例5
下式所示化合物n-(2-羟乙基)-4-氧代-4,5-二氢咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例1的方法进行制备，ms-esi:m/z＝273.3[m+1]。
实施例6
下式所示化合物4-氨基-n-(2-氨基乙基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备
第一步：
将化合物6a(16.0g，100mmol)，1b(19.5g，100mmol)溶于乙醇(200ml)中，升温至回流，搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后减压浓缩，柱层析分离得到类白色固体19.5g，收率76.2％。
第二步：
将第一步得到的化合物6b(19.0g，74.2mmol)溶于乙醇(100ml)和水(100ml)混合溶剂中，室温下加入氢氧化钠(5.9g，148.3mmol)，于40℃搅拌反应6小时，tlc检测反应，反应完毕后，减压除去乙醇，剩余的溶液倒入搅拌的稀盐酸中，析出固体，过滤，滤饼用水洗涤，干燥得到类白色固体14.8g，收率87.6％。
第三步：
将第二步得到的化合物6c(1.0g，4.4mmol)、乙二胺(264mg，4.4mmol)、dipea(844mg，6.5mmol)溶于dmf(20ml)中，室温下加入hatu(2.5g，6.5mmol)，室温搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后加入水(20ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50mlx2)提取，合并有机层，浓缩，柱层析分离得到类白色固体714mg，收率60.1％，ms-esi:m/z＝271.3[m+1]。
实施例7
下式所示化合物(4-氨基咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-基)(哌啶-1-基)甲酮的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝297.3[m+1]。
实施例8
下式所示化合物(4-氨基咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-基)(4-甲基哌啶-1-基)甲酮的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝311.3[m+1]。
实施例9
下式所示化合物(4-氨基咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-基)(吗啉基)甲酮的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝298.3[m+1]。
实施例10
下式所示化合物(4-氨基咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-基)(3-氨基吡咯烷-1-基)甲酮的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝297.3[m+1]。
实施例11
下式所示化合物(4-氨基咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-基)(3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝298.3[m+1]。
实施例12
下式所示化合物4-氨基-n-(2-氨基-2-氧代乙基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝285.3[m+1]。
实施例13
下式所示化合物4-氨基-n-(2-氨基-1-氧代丙烷-2-基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝299.3[m+1]。
实施例14
下式所示化合物4-氨基-n-(2-氨基-1-氧代丁烷-2-基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝3133[m+1]。
实施例15
下式所示化合物4-氨基-n-(1-氨基-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝327.4[m+1]。
实施例16
下式所示化合物4-氨基-n-(1-氨基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)咪唑并[1,2-a]喹喔啉-2-甲酰胺的制备：参考实施例6的方法进行制备，ms-esi:m/z＝341.4[m+1]。
实施例17
n-(2-氨基乙基)-9-异丁基-6-o氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-甲酰胺
第一步：
将化合物17a(16.2g，100mmol)，10b(25.1g，100mmol)溶于乙醇(200ml)中，升温至回流，搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后减压浓缩，柱层析分离得到类白色固体22.2g，收率70.7％。
第二步：
将第一步得到的化合物17b(22.0g，70.0.0mmol)溶于乙醇(100ml)和水(100ml)混合溶剂中，室温下加入氢氧化钠(5.6g，140.0mmol)，于40℃搅拌反应6小时，tlc检测反应，反应完毕后，减压除去乙醇，剩余的溶液倒入搅拌的稀盐酸中，析出固体，过滤，滤饼用水洗涤，干燥得到类白色固体14.4g，收率71.9％。
第三步：
将第二步得到的化合物17c(1.0g，3.5mmol)、乙二胺(210mg，3.5mmol)、dipea(677mg，5.3mmol)溶于dmf(20ml)中，室温下加入hatu(2.0g，5.3mmol)，室温搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后加入水(20ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50mlx2)提取，合并有机层，浓缩，柱层析分离得到类白色固体568mg，收率49.4％，ms-esi:m/z＝329.4[m+1]。
实施例18
下式所示化合物n-(2-(二甲基氨基)乙基)-9-异丁基-6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-甲酰胺的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝357.4[m+1]
实施例19
下式所示化合物n-(2-(二甲基氨基)乙基)-9-异丁基-n-甲基-6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-甲酰胺的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝371.4[m+1]。
实施例20
下式所示化合物9-异丁基-n-(2-甲氧基乙基)-6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-甲酰胺的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝344.4[m+1]。
实施例21
下式所示化合物n-(2-羟基乙基)-9-异丁基-6-氧代-5,6-二氢咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-甲酰胺的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝330.4[m+1]。
实施例22
下式所示化合物9-环丁基-8-(哌嗪-1-羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-6(5h)-酮的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝353.4[m+1]。
实施例23
下式所示化合物9-环丁基-8-(4-甲基哌嗪-1-羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-6(5h)-酮的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝367.4[m+1]。
实施例24
下式所示化合物9-环丁基-8-(吗啉基-4-羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-6(5h)-酮的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝354.4[m+1]。
实施例25
下式所示化合物8-(3-氨基吡咯烷-1-羰基)-9-异丁基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-6(5h)-酮的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝355.4[m+1]。
实施例26
下式所示化合物9-环戊基-8-(3-羟基吡咯烷-1-羰基)咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-6(5h)-酮的制备：参考实施例17的方法进行制备，ms-esi:m/z＝368.4[m+1]。
实施例27
(9-异丙基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-基)(哌啶-1-基)甲酮的制备
第一步
将化合物27a(14.6g，100mmol)，27b(23.6g，100mmol)溶于乙醇(200ml)中，升温至回流，搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后减压浓缩，柱层析分离得到类白色固体21.3g，收率75.0％。
第二步
将第一步制备的化合物27c(21.0g，73.9mmol)溶于乙醇(100ml)和水(100ml)混合溶剂中，室温下加入氢氧化钠(5.9g，147.8mmol)，于40℃搅拌反应6小时，tlc检测反应，反应完毕后，减压除去乙醇，剩余的溶液倒入搅拌的稀盐酸中，析出固体，过滤，滤饼用水洗涤，干燥得到类白色固体12.3g，收率65.0％。
第三步
将第二步制备的化合物27d(1.0g，3.9mmol)、哌嗪(336mg，3.9mmol)、dipea(761mg，5.9mmol)溶于dmf(20ml)中，室温下加入hatu(2.2g，5.9mmol)，室温搅拌反应8小时，tlc检测反应，反应完毕后加入水(20ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50mlx2)提取，合并有机层，浓缩，柱层析分离得到类白色固体712mg，收率56.3％，ms-esi:m/z＝325.1[m+1]。
实施例28
下式所示的化合物(9-异丙基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-基)(4-甲基哌啶-1-基)甲酮的制备：参考实施例27的方法进行制备，ms-esi:m/z＝339.4[m+1]。
实施例29
下式所示的化合物(9-异丙基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-基)(吗啉基)甲酮的制备：参考实施例27的方法进行制备，ms-esi:m/z＝326.4[m+1]。
实施例30
下式所示的化合物(3-氨基吡咯烷-1-基)(9-异丙基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-基)(吗啉基)甲酮的制备：参考实施例27的方法进行制备，ms-esi:m/z＝325.4[m+1]。
实施例31
下式所示的化合物(3-羟基吡咯烷-1-基)(9-异丙基咪唑并[1,2-a]吡啶并[3,2-e]吡嗪-8-基)(吗啉基)甲酮的制备：参考实施例27的方法进行制备，ms-esi:m/z＝326.4[m+1]。
实施例32tlr7和tlr8活性测定
分别使用hek-blue人tlr7和tlr8细胞。通过处理后通过检测nf-kb的活化研究对人tlr7和tlr8的刺激，在融合至数个nf-kb和ap-1结合位点的inf-b最小启动子的控制下安置seap报道基因，在刺激人tlr7和tlr8细胞24小时候后，通过nf-kb启动子调节报基因表达，使用quantiblue试剂盒在640nm的波长测定细胞培养物上清液seap报道基因活性，通过基于活性的分析测定ec50值。
结果表明，实施例1-31化合物对tlr8的ec50值介于83.2nm至15μm之间，对tlr7的ec50值大于100nm，多数介于300nm至50μm之间。其中，实施例2、5、9、14-17化合物的ec50值低于90nm，对tlr8的选择性平均约为tlr7的49.6倍。然而，实施例4、12和21化合物的ec50高于200nm，对tlr8的选择性平均约为tlr7的9.2倍。
以上，对本发明的实施方式进行了说明。但是，本发明不限定于上述实施方式。凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。