本发明涉及邻羟基苯酮的衍生物领域，具体涉及一种取代邻羟基苯酮化合物及其制备方法和在制备brd4蛋白活性抑制剂以及治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物中的应用。
背景技术：
bromodomains(brds)通常存在于参与蛋白-蛋白相互作用(protein-proteininteractions,ppis)的染色质和转录相关蛋白中，能够识别乙酰化标记并形成驱动活性转录的蛋白质复合物。brds小分子抑制剂能够和乙酰化赖氨酸竞争地与brds的疏水口袋结合，从而阻断或部分阻断乙酰化赖氨酸在基因转录和调节染色质结构方面的作用。目前在研的大多数brds抑制剂均靶向于bromodomainandextra-terminal(bet)的bromodomains蛋白家族。bet蛋白含有四种家族成员，分别为brd2、brd3、brd4和brdt。众多研究结果表明brd4与多种肿瘤存在密切联系。
brd4是一种广泛表达的核蛋白，分子量为200kda，含有两个串联的溴结构域(bd1和bd2)，在结构上是保守的但具有不相同的功能和一个et结构域。最近，brd4被报道参与致癌基因重排，导致高度致癌融合蛋白，从而在许多类型的癌症的发展中起着关键的作用，如乳腺癌。brd4调节乳腺癌细胞转移是通过调节sipa1酶的活性和调节erα诱导的基因表达通过影响乳腺癌的rna聚合酶ii和组蛋白h2b单泛素化延伸相关的磷酸化。此外，brd4调节细胞外基质基因的表达，在转移预测基因信号中经常出现；并能通过它的激活信号预测乳腺癌的进展和/或生存。
小分子化合物通过作用于brd4，干扰brd4与乙酰化赖氨酸的特异性结合，影响肿瘤细胞内的转录调节和其它细胞过程，实现对肿瘤的靶向治疗。随着研究的不断深入，brd4小分子抑制剂的开发已经取得了较大成功，目前已有多个化合物进入临床研究阶段，应用于乳腺癌、动脉粥样硬化、糖尿病、血癌等多个方面。
因此，brd4是一个非常有前景的表观遗传新靶点，而作用于bet蛋白brd结构域的小分子抑制剂在肿瘤研究中也有着广阔的应用前景，且从中有可能开发出新型抗肿瘤药物。
最近，jq1作为第一个brd4抑制剂，已经在保护性细胞自噬方面得到验证。例如，在急性髓系白血病(aml)中，ampk-ulk1调节的保护自噬对brd4抑制剂jq1产生了耐药性。(+)jq1也已被报道抑制保护细胞自噬从而增加npm1和hexim1表达在aml细胞中。可见，长期用药会伴随肿瘤细胞的耐药性，导致肿瘤的复发和转移。虽然(+)jq1具有良好的活性，但是其缺乏专一性，是一种泛bet家族的抑制剂，不能够专一性的抑制brd4。此外，(+)jq1的体内药效动力学性质极差，成药性很低，阻碍了其进入临床试验。因此，需要开发一种新型的brd4抑制剂。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明提供一种取代邻羟基苯酮化合物及其制备方法和在制备brd4蛋白活性抑制剂以及治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物中的应用。
本发明所提供的技术方案为：一种取代邻羟基苯酮化合物，结构如式i所示：
式i中，r1的结构式为
r2的结构式独立地为-nr8r9或者含有-n的五元环、六元环或七元环；
所述r3独立地选自h、羟基、胺基、c1-c10烷基、c1-c10烯基、或c1-c10卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基或卤素；
所述r4或r6独立地选自h、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基；
所述r5或r7独立地选自h、羟基、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基、卤素。
所述r8或r9独立地选自h、c1-c4烷基、c1-c4烯基、c1-c4卤代烷基、c1-c4氧杂烷基、c1-c4氮杂烷基、芳基、烷芳基、烷氧基芳基或卤代芳基。
上述具有式i所示结构的化合物对乙酰胆碱酯酶有较好的体外抑制作用，且具有显著的金属离子螯合作用和aβ聚集抑制作用。
优选的，根据式i所述取代邻羟基苯酮化合物，所述r2独立地选自恶唑基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、吡唑基等五元环，或者独立地选自哌啶基、哌嗪基、甲基哌嗪基、吗啉基等六元环，或者独立地选自高哌嗪基等七元环，或者该类五元环、六元环、七元环的取代物；
所述r3独立地选自h、羟基、胺基、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、甲胺基、二甲胺基、甲乙胺基、氟、氯、溴、氯甲基、溴甲基、三氟甲基；
所述r4或r6独立地选自h、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、取代芳基；
所述r5或r7独立地选自h、羟基、胺基、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、甲氧基、乙氧基、甲胺基、二甲胺基、氯、溴、氯甲基、溴甲基、取代芳基；
所述r8或r9独立地选自h、甲基、乙基、丙基、丁基、乙烯基、烯丙基、取代芳基。
进一步优选，所述的取代邻羟基苯酮化合物选自如下结构式的化合物：
乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
氨基甲酸2-[2-(哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
吡咯烷-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
吗啉-4-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
4-甲基-哌嗪-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯；
二甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
二乙基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
吡咯烷-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
吗啉-4-羧酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯；
4-甲基-哌嗪-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
二甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
吡咯烷-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
哌啶-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯；
吗啉-4-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯酯；
二甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯酯；
二乙基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
吡咯烷-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
哌啶-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯；
吗啉-4-羧酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯。
作为发明内容的一部分，本发明还公开一种上述的取代邻羟基苯酮化合物的制备方法，由以下步骤来制备：
步骤a)，将式1结构的哌啶(单保护的哌啶)与卤代烃x-r4缩合反应，得到式2结构的化合物；
步骤b)，将式2结构的化合物通过反应脱保护基，得到式3结构的化合物；
步骤c)，缩合引入邻羟基苯酮片段，式3结构的化合物通过缩合引入邻羟基苯酮片段，得到式4或式5结构的化合物；
步骤d)，酰化引入酚羟基取代基，式4结构的化合物通过酰化引入酚羟基取代基得到式a结构的化合物，式5结构的化合物通过酰化引入酚羟基取代基得到式b结构的化合物；
反应式如下：
所述步骤a,b,c,d的反应均可采用常规方法进行，其中，r2、r3、r4、r5、r6、r7的定义如前文所述。该制备方法具有原材料来源广泛、成本低、方法操作简单、条件温和等优点。
本发明提供一种如上述的取代邻羟基苯酮化合物或者其旋光异构体在药学上可接受的盐。所述药学上可接受的盐为取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体与无机酸、有机酸反应所形成的盐。
作为优选，所述药学上可接受的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、草酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐、柠檬酸盐或琥珀酸盐。
所述药学上可接受的盐的制备方法如下：将反应制得的各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的一种，滴加无机酸或有机酸的溶液，制成药学上可接受的盐。
具体可以为：将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，于冰水浴下通入氯化氢气体或滴加氯化氢的饱和乙酸乙酯溶液，制成盐酸盐；
或者将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，滴加等摩尔甲磺酸，得其甲磺酸盐；
或者将各种取代邻羟基苯酮化合物或者及其旋光异构体溶于乙醚、丙酮、甲醇、乙醇或乙酸乙酯中的一种，于冰水浴下滴加浓硫酸溶液制成硫酸盐。
本发明还提供一种如上述的取代邻羟基苯酮化合物及其旋光异构体或者其药学上可接受的盐在制备brd4蛋白活性抑制剂中的应用，在制备用于治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物中的应用，所述疾病包括治疗增殖性疾病(包括癌症)，病毒感染，神经退行性疾病，炎症，动脉粥样硬化和男性避孕等。在治疗的过程中，可采用本发明所制备的药物组合物与其他药物进行联合治疗，可通过同时、序贯或单独给予各种治疗成分可实现这种联合治疗。此类组合产品应用有效剂量范围内的本发明化合物和准许剂量范围内的其他药学活性剂。
进一步的，所述的在制备用于治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物中的应用，所述疾病包括肿瘤、高血压、动脉粥样硬化、糖尿病、血癌。
更进一步的，所述的在制备用于治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物中的应用，所述疾病包括乳腺癌、ii型糖尿病、白血病。
同现有技术相比，本发明的有益效果体现在：
本发明提供一种新型的取代邻羟基苯酮化合物，具有brd4抑制作用等多种药理活性，还具有原材料来源方便，制备方法操作简单、条件温和，成本低，适于工业化生产等优点。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明作进一步发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1：(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-苯基-甲酮(2-1)
将1.5g(8.06mmol)n-boc哌嗪溶于20ml二氯甲烷中，然后加入1.68ml(9.68mmol)的dipea，再在0℃时缓慢加入1.03ml(8.82mmol)的苯甲酰氯。随后升温至室温25℃，搅拌反应2h。反应结束后，用30ml的二氯甲烷稀释，再用1m的氢氧化钠溶液50ml洗涤。使用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸发，得黄色固体1.487g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.37-7.41(m,5h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.38(m,2h,piperazine),2.94(m,2h,piperazine),2.81(m,2h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例2(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(4-氯-苯基)-甲酮(2-2)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.34-7.41(m,4h,arh),3.48(m,4h,piperazine),3.45(m,4h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例3(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(4-硝基-苯基)-甲酮(2-3)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):8.31(t,1h,j＝2.0hzarh),8.29(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.59(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.57(t,1h,j＝2.0hzarh),3.77(m,2h,piperazine),3.55(m,2h,piperazine),3.41(m,2h,piperazine),3.35(m,2h,piperazine),1.47(s,9h,-c(ch3)3).
实施例41-叔丁基-4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪(2-4)
将2g(10.7mmol)n-boc哌嗪溶于30ml干燥的dmf中，再加入4.452g(32.2mmol)的碳酸钾，在氮气的保护下，反应混合物在0℃时缓慢加入2.27g(11.2mmol)4-甲氧基溴苄。反应物搅拌过夜，tlc监测反应结束后，将50ml冰水混合物加入反应液中，过滤出白色固体，并用4×30ml水冲洗，干燥，得到产物2.474g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.23(s,1h,arh),7.21(s,1h,arh),6.87(d,1h,j＝2.8hz,arh),6.84(d,1h,j＝2.8hz,arh),3.79(s,3h,-och3),3.44(s,2h,-nch2),3.41(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),2.36(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),1.45(s,9h,-c(ch3)3).
实施例5(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-(6-氯-吡啶-3-基)-甲酮(2-5)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):8.45(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.74(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.42(d,1h,j＝8.4hz,pyridine),3.73(m,2h,piperazine),3.48(m,6h,piperazine),1.48(s,9h,-c(ch3)3).
实施例6(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-萘-2-基-甲酮(2-6)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.79-7.83(m,4h,arh),7.44-7.50(m,2h,arh),7.41(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),3.38-3.70(m,8h,piperazine),1.40(s,9h,-c(ch3)3).
实施例7联苯-4-基-(4-叔丁基-哌嗪-1-基)-甲酮(2-7)
操作同实施例1。1h-nmr(δ,cdcl3):7.65(s,1h,arh),7.63(s,1h,arh),7.60(s,1h,arh),7.58(s,1h,arh),7.49(s,1h,arh),7.48(d,1h,j＝2.0hz,arh),7.46(s,1h,arh),7.44(s,1h,arh),7.38(t,1h,j＝7.2hz,arh),3.48-3.75(m,8h,piperazine),1.48(s,9h,-c(ch3)3).
实施例8苯基-哌嗪-1-基-甲酮(3-1)
将1.487g(5.13mmol)化合物2-1溶于15ml二氯甲烷中，然后加入1.5ml(20mmol)tfa。室温反应，tlc监测反应结束后，将产物浓缩，加入40ml1mhcl溶液溶解，搅拌半小时，再加入40ml二氯甲烷洗涤。随后水相层加入1m的氢氧化钠溶液调ph至10左右，再用二氯甲烷2×40ml萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸发，得无色油状物0.583g。1h-nmr(δ,cdcl3):7.37-7.41(m,5h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.37(m,2h,piperazine),2.90(m,2h,piperazine),2.78(m,2h,piperazine).
实施例9(4-氯-苯基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-2)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.34-7.40(m,4h,arh),3.73(m,2h,piperazine),3.39(m,2h,piperazine),2.90(m,2h,piperazine),2.84(m,2h,piperazine).
实施例10(4-硝基-苯基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-3)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):8.30(t,1h,j＝2.0hzarh),8.27(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.59(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.56(t,1h,j＝2.0hzarh),3.78(m,2h,piperazine),3.34(m，2h,piperazine),2.97(m,2h,piperazine),2.82(m,2h,piperazine).
实施例111-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪(3-4)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.23(t,1h,j＝2.8hz,arh),7.21(t,1h,j＝2.0hz,arh),6.86(t,1h,j＝2.8hz,arh),6.84(t,1h,j＝2.0hz,arh),3.79(s,3h,-och3),3.43(s,2h,-nch2),2.89(t,4h,j＝4.8hz,piperazine),2.41(m,4h,piperazine).
实施例12(6-氯-吡啶-3-基)-哌嗪-1-基-甲酮(3-5)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):8.45(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.73(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.40(d,1h,j＝8.0hz,pyridine),3.76(m,2h,piperazine),3.42(m,2h,piperazine),2.94(m,2h,piperazine),2.86(m,2h,piperazine).
实施例13萘-2-基-哌嗪-1-基-甲酮(3-6)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.85-7.90(m,4h,arh),7.50-7.56(m,2h,arh),7.48(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.6hz,arh),3.81(m,2h,piperazine),3.50(m,2h,piperazine),2.93(m,4h,piperazine).
实施例14联苯-4-基-哌嗪-1-基-甲酮(3-7)
操作同实施例8。1h-nmr(δ,cdcl3):7.64(d,1h,j＝1.6hz,arh),7.62(d,1h,j＝2.0hz,arh),7.60(t,1h,j＝2.0hz,arh),7.58(s,1h,arh),7.49(d,1h,j＝1.6hz,arh),7.47(d,1h,j＝2.4hz,arh),7.46(s,1h,arh),7.44(s,1h,arh),7.37(m,1h,arh),3.50-3.77(m,4h,piperazine),2.91(m,4h,piperazine).
实施例152-(4-苄基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-1)
在圆底烧瓶中加入1.3g(6.05mmol)2-溴-2'-羟基苯乙酮和2.2g(12.10mmol)1-苄基哌嗪，加入氯仿溶解，再加入4.1g(30.25mmol)碳酸钾和0.1g(0.6mmol)碘化钾。室温反应，tlc监测反应结束后，过滤，使用水洗涤三次，减压浓缩得粗品。再使用pe：ea1:1过柱纯化得产物987mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.87(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.45(m,1h,arh),7.23-7.32(m,5h,arh),6.97(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.87(m,1h,arh),3.73(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),2.69(m,4h,piperazine),2.59(m,4h,piperazine).
实施例161-(2-羟基-苯基)-2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-2)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.80(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.37(m,1h,arh),7.15(t,1h,j＝2.8hz,arh),7.13(t,1h,j＝2.8hz,arh),6.89(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.75-6.79(m,3h,arh),3.71(s,3h,-och3),3.63(s,2h,-coch2),3.39(s,2h,-nch2),2.59(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine).
实施例172-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-3)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.83(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.40-7.43(m,5h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.8hz,j2＝1.2hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.89(s,2h,-coch2),3.55(m,2h,piperazine),3.48(m,2h,piperazine),2.63-2.75(m,4h,piperazine).
实施例182-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-4)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):7.82(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.35-7.41(m,4h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.88(s,4h,-coch2,piperazine),3.53(m,2h,piperazine),2.64-2.70(m,4h,piperazine).
实施例191-(2-羟基-苯基)-2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-5)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):8.29(dd,2h,j1＝6.8hz,j2＝2.0hz,arh),7.81(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.59(dd,2h,j1＝6.8hz,j2＝2.0hz,arh)7.50(m,1h,arh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.91(m,1h,arh),3.91(s,2h,-coch2),3.48(m,4h,piperazine),2.62-2.78(m,4h,piperazine).
实施例202-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-6)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):8.46(dd,1h,j1＝2.4hz,j2＝0.8hzpyridine),7.81(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hzpyridine),7.75(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝2.4hzpyridine),7.50(m,1h,arh),7.41(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hzarh),7.00(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hzarh),6.91(m,1h,arh),3.90(m,4h,-coch2,piperazine),3.54(m,2h,piperazine),2.73(m,2h,piperazine),2.65(m,2h,piperazine).
实施例211-(2-羟基-苯基)-2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酮(4-7)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):12.14(s,1h,-oh),7.83-7.92(m,5h,arh),7.46-7.56(m,4h,arh),7.00(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.88-3.93(m,4h,piperazine,-coch2),3.60(m,2h,piperazine),2.63-2.81(m,4h,piperazine).
实施例222-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-乙酮(4-8)
操作同实施例15。1h-nmr(δ,cdcl3):12.15(s,1h,-oh),7.84(dd,1hj1＝8.0hz,j2＝1.2hzarh),7.58-7.64(m,4h,arh),7.44-7.51(m,5h,arh),7.38(m,1h,arh)7.00(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.90(m,1h,arh),3.87(m,4h,-coch2,piperazine),3.61(m,2h,piperazine),2.67(m,4h,piperazine).
实施例233-(4-苄基-哌嗪-1-基)-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-1)
将0.4g(2.25mmol)1-苄基哌嗪溶于10ml无水乙醇中，然后加入2ml(11.3mmol)dipea，搅拌均匀。再加入0.428g(2.25mmol)色酮-3-甲酸，室温下反应。tlc监测反应结束后，减压抽干。使用pe：ea1:1过柱纯化，得产品0.62g。1h-nmr(δ,cdcl3):13.87(s,1h,-oh),7.83(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.66(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hzarh),7.31-7.37(m,6h,arh,-chch),6.93(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),6.80(m,1h,arh),5.89(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.57(s,2h,-nch2),3.46(m,4h,piperazine),2.54(m,4h,piperazine).
实施例241-(2-羟基-苯基)-3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酮(5-2)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.86(s,1h,-oh),7.83(d,1h,j＝12.0hz,arh),7.65(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.35(m,1h,-chch),7.24(m,2h,arh),6.86(m,4h,arh),5.88(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.81(s,3h,-och3),3.50(s,2h,-nch2),3.45(m,4h,piperazine),2.52(m,4h,piperazine).
实施例253-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-3)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.56(s,1h,-oh),7.75(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.59(d,1h,j＝8.0hz,arh),7.28-7.43(m,5h,arh,-chch),6.88(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.75(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.89(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.64(m,4h,piperazine),3.39(m,4h,piperazine).
实施例263-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-4)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.58(s,1h,-oh),8.49(d,1h,j＝2.0hz,pyridine),7.76-7.86(m,2h,pyridine),7.67(d,1h,j＝8.0hz,arh),7.36-7.47(m,2h,arh,-chch),6.95(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.83(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.97(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.74(m,4h,piperazine),3.49(m,4h,piperazine).
实施例271-(2-羟基-苯基)-3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酮(5-5)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.66(s,1h,-oh),7.82-7.94(m,5h,arh),7.49-7.67(m,4h,arh),7.37(m,1h,-chch),6.94(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.82(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.97(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.78(m,4h,piperazine),3.49(m,4h,piperazine).
实施例283-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-1-(2-羟基-苯基)-丙烯酮(5-6)
操作同实施例23。1h-nmr(δ,cdcl3):13.58(s,1h,-oh),7.77(d,1h,j＝12.4hz,arh),7.52-7.60(m,5h,arh),7.28-7.47(m,6h,arh,-chch),6.87(d,1h,j＝8.4hz,arh),6.75(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.90(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.70(m,4h,piperazine),3.42(m,4h,piperazine).
实施例29乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-1)
将312mg(1mmol)的4-1、12mg(0.1mmol)的dmap和1.66ml(12mmol)的三乙胺溶于20ml四氢呋喃中，室温搅拌下分批加入610mg(5mmol)的甲乙氨基甲酰氯，回流反应4h。反应结束后，将四氢呋喃浓缩干，向反应体系中加入适量的水，用稀盐酸调ph值至5-6，并搅拌半小时，然后用乙酸乙酯萃取三次取水层，水层用饱和碳酸钠溶液调ph值至9，并搅拌半小时，再用乙酸乙酯萃取水层三次，混合的乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥后，浓缩蒸干后再使用pe：ea1:2过柱纯化得产物349mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.49(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.23-7.33(m,6h,arh),7.13(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.72(s,2h,-coch2),3.59(s,2h,-nch2),3.38(q,2h,j＝6.8hz,-nch2ch3),3.09(s,1.5h,-nch3),2.96(s,1.5h,-nch3),2.62-2.64(m,8h,piperazine),1.17(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝396.
实施例30乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-2)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.49(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.21-7.27(m,3h,arh),7.13(t,1h,j＝8.4hz,arh),6.84-6.87(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.51(s,2h,-nch2),3.38(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.09(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.57-2.63(m,8h,piperazine),1.18(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝426.
实施例31乙基-甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苯甲酰基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-3)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.71(t,1h,j＝6.0hz,arh),7.51(t,1h,j＝8.0hz,arh),7.34-7.41(m,5h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.79-3.85(m,4h,-coch2,piperazine),3.36-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.59-2.77(m,4h,piperazine),1.17(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝410.
实施例32乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-4)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(m,1h,arh),7.51(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.34-7.42(m,4h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.79-3.84(m,4h,-coch2,piperazine),3.47-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.58-2.70(m,4h,piperazine),1.16(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝444.
实施例33乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-硝基-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-5)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):8.30(m,2h,arh),7.71(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝2.8hz,arh),7.50-7.61(m,3h,arh),7.27(m,1h,arh),7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.88(m,2h,piperazine),3.80(s,2h,-coch2),3.36-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.59-2.77(m,4h,piperazine),1.17(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝455.
实施例34乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-6)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):8.46(dd,1h,j1＝2.4hz,j2＝0.8hz,pyridine),7.70-7.75(m,2h,pyridine),7.52(t,1h,j＝7.2hz,arh),7.40(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),7.28(m,1h,arh),7.15(t,1h,j＝8.0hz,arh),3.85(m,2h,piperazine),3.79(s,2h,-coch2),3.37-3.54(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.12(s,1.5h,-nch3),2.98(s,1.5h,-nch3),2.60-2.77(m,4h,piperazine),1.19(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝445.
实施例35乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-7)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.85-7.90(m,4h,arh),7.72(m,1h,arh),7.48-7.56(m,4h,arh),7.28(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),7.14(t,1h,j＝8.0hz,arh),3.90(m,2h,piperazine),3.79(s,2h,-coch2),3.36-3.55(m,4h,-nch2ch3,piperazine),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.58-2.76(m,4h,piperazine),1.15(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝460.
实施例36乙基-甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-8)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1hj1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),7.39-7.53(m,9h,arh),7.27(m,2h,arh)7.14(t,1h,j＝8.4hz,arh),3.89(m,2h,piperazine),3.82(s,2h,-coch2),3.61(m,2h,piperazine),3.39(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.11(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),2.60-2.77(m,4h,piperazine),1.19(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝486.
实施例37二甲基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-9)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.2hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.24-7.33(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),3.12(s,3h,-nch3),2.99(s,3h,-nch3),2.57-2.62(m,8h,piperazine).[m+h]+＝382.
实施例38二乙基-氨基甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-10)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.48(m,1h,arh),7.23-7.35(m,6h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.72(s,2h,-coch2),3.58(s,2h,-nch2),3.47(q,2h,j＝6.8hz,-nch2ch3),3.37(m,2h,-nch2ch3),2.60-2.65(m,8h,piperazine),1.26(m,3h,-nch2ch3),1.19(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝410.
实施例39吡咯烷-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-11)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.23-7.35(m,6h,arh),7.17(d,1h,j＝8.4hz,arh),3.73(s,2h,-coch2),3.60(m,2h,pyrrolidine),3.57(s,2h,-nch2),3.45(m,2h,pyrrolidine),2.60-2.64(m,8h,piperazine),1.91-1.99(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝408.
实施例40哌啶-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-12)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.0hz,arh),7.40(m,1h,arh),7.28-7.34(m,6h,arh),7.13(d,1h,j＝8.0hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.56(s,2h,-nch2),3.48(m,4h,piperidine),2.58-2.63(m,8h,piperazine),1.66(m,6h,piperidine).[m+h]+＝422.
实施例41吗啉-4-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-13)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.77(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.51(m,1h,arh),7.27-7.35(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),3.71(s,2h,-coch2),3.67(m,2h,morpholine),3.54(m,2h,morpholine),3.58(s,2h,-nch2),3.28(m,2h,morpholine),2.59-2.64(m,8h,piperazine),2.44(m,2h,morpholine).[m+h]+＝424.
实施例424-甲基-哌嗪-1-甲酸2-[2-(4-苄基-哌嗪-1-基)-乙酰基]-苯酯(a-14)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.50(m,1h,arh),7.27-7.34(m,6h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),3.73(m,2h,n-methylpiperazine),3.71(s,2h,-coch2),3.58(m,2h,n-methylpiperazine),3.57(s,2h,-nch2),2.59-2.63(m,8h,piperidine),2.41-2.53(m,4h,n-methylpiperazine),2.36(s,3h,-nch3).[m+h]+＝437.
实施例43二甲基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-15)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.27(m,3h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.84-6.87(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.55(s,2h,-nch2),3.12(s,3h,-nch3),2.99(s,3h,-nch3),2.56-2.64(m,8h,piperazine).[m+h]+＝412.
实施例44二乙基-氨基甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-16)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.72(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.48(m,1h,arh),7.21-7.25(m,3h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),6.85-6.88(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.72(s,2h,-coch2),3.56(s,2h,-nch2),3.47(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),3.35(q,2h,j＝7.2hz,-nch2ch3),2.64(m,4h,piperazine),2.63(m,4h,piperazine),1.27(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3),1.18(t,3h,j＝7.2hz,-nch2ch3).[m+h]+＝440.
实施例45吡咯烷-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-17)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.76(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.51(m,1h,arh),7.19-7.25(m,3h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.83-6.88(m,2h,arh),3.80(s,3h,-och3),3.71(s,2h,-coch2),3.58(s,2h,-nch2),3.26-3.29(m,4h,pyrrolidine),2.65(m,8h,piperazine),1.34-1.38(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝438.
实施例46哌啶-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-18)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.67(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.40(m,1h,arh),7.14-7.17(m,3h,arh),7.06(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.76-6.79(m,2h,arh),3.72(s,3h,-och3),3.63(s,2h,-coch2),3.55(m,2h,piperidine),3.42(m,2h,piperidine),3.39(s,2h,-nh2),2.45-2.53(m,8h,piperazine),1.54-1.58(m,6h,piperidine).[m+h]+＝452.
实施例47吗啉-4-羧酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯基酯(a-19)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.73(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.25(m,3h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.83-6.87(m,2h,arh),3.79(s,3h,-och3),3.73(s,2h,-coch2),3.59(t,2h,j＝6.8hz,morpholine),3.52(s,2h,-nch2),3.45(t,2h,j＝6.8hz,morpholine),2.58-2.63(m,8h,piperazine),1.90-1.99(m,4h,morpholine).[m+h]+＝454.
实施例484-甲基-哌嗪-1-甲酸2-{2-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-乙酰基}-苯酯(a-20)
操作同实施例29。1h-nmr(δ,cdcl3):7.74(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.49(m,1h,arh),7.21-7.28(m,3h,arh),7.14(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),6.83-6.87(m,2h,arh),3.79(s,3h,-och3),3.71(m,2h,n-methylpiperazine),3.69(s,2h,-coch2),3.57(m,2h,n-methylpiperazine),3.48(s,2h,-nh2),2.54-2.61(m,8h,piperidine),2.38-2.51(m,4h,n-methylpiperazine),2.35(s,3h,-nch3).[m+h]+＝467.
实施例49乙基-甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯基酯(b-1)
将322mg(1mmol)的5-1溶于20ml乙腈溶液中，再加入651mg(2mmol)的碳酸铯，在室温下缓慢加入610mg(5mmol)的甲乙氨基甲酰氯。加热回流反应，tlc监测反应结束后，向反应体系中加入30ml水，再用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，合并有机层并用无水硫酸钠干燥，减压抽干后再使用pe：ea1:1过柱纯化得产品301mg。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.28-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.6hz,arh),5.45(dd,1h,j1＝12.8hz,j2＝4.0hz,-chch),3.53(s,2h,-nch2),3.35-3.44(m,2h,-nch2ch3),3.30(m,4h,piperazine),3.03(s,1.5h,-ch3),2.95(s,1.5h,-ch3),2.46(m,4h,piperazine),1.13-1.21(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝408.
实施例50乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-2)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.2hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.50(dd,1h,j1＝12.4hz,j2＝3.2hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.47(s,2h,-nch2),3.35-3.44(m,2h,-nch2ch3),3.29(m,4h,piperazine),3.03(s,1.5h,-ch3),2.95(s,1.5h,-ch3),2.44(m,4h,piperazine),1.11-1.21(m,3h,-nch2ch3).[m+h]+＝438.
实施例51乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-氯-苯甲酰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-3)
操作同实施例49。熔点：170-173.5℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.35-7.43(m,6h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.53(dd,1h,j1＝12.4hz,j2＝2.8hz,-chch),3.64(m,4h,piperazine),3.36-3.47(m,2h,-nch2ch3),3.31(m,4h,piperazine),3.04(s,1.5h,-nch3),2.96(s,1.5h,-nch3),1.13-1.24(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝456.
实施例52乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-4)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):8.39(d,1h,j＝2.4hz,pyridine),7.67(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝2.4hz,pyridine),7.28-7.40(m,4h,pyridine,arh,-chch),7.16(t,1h,j＝7.2hz,arh),7.05(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.47(dd,1h,j1＝12.8hz,j2＝3.6hz,,-chch),3.57-3.63(m,4h,piperazine),3.17-3.43(m,6h,-nch2ch3,piperazine),2.97(s,1.5h,-nch3),2.89(s,1.5h,-nch3),1.06-1.18(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝457.
实施例53乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(萘-2-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-5)
操作同实施例49。熔点：142.1-146.7℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.86-7.92(m,4h,arh),7.37-7.59(m,6h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.12(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.54(d,1h,j＝10.4hz,-chch),3.67-3.72(m,4h,piperazine),3.24-3.48(m,6h,-nch2ch3,piperazine),3.04(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),1.10-1.24(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝472.
实施例54乙基-甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(联苯-4-羰基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-6)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.58-7.66(m,4h,arh),7.37-7.50(m,8h,arh,-chch),7.23(t,1h,j＝7.6hz,arh),7.13(t,1h,j＝7.2hz,arh),5.54(d,1h,j＝12.4hz,-chch),3.68-3.73(m,4h,piperazine),3.24-3.47(m,6h,-nch2ch3,piperazine),3.05(s,1.5h,-nch3),2.97(s,1.5h,-nch3),1.10-1.23(m,3h,-ch2ch3).[m+h]+＝498.
实施例55二甲基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-7)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.29-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.13(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝0.8hz,arh),5.46(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.53(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),3.06(s,3h,-nch3),2.97(s,3h,-nch3),2.47(m,4h,piperazine).[m+h]+＝394.
实施例56二乙基-氨基甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-8)
操作同实施例49。熔点：68.9-70.7℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.45(dd,1h,j1＝6.4hz,j2＝1.2hz,arh),7.28-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝0.8hz,arh),5.44(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.52(s,2h,-nch2),3.39-3.46(m,2h,-nch2ch3),3.33-3.37(m,2h,-nch2ch3),3.29(m,4h,piperazine),2.45(m,4h,piperazine),1.15-1.22(m,6h,-nch2ch3).[m+h]+＝422
实施例57吡咯烷-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-9)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.29-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),5.47(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.52-3.55(m,4h,-nch2,pyrrolidine),3.43(m,2h,pyrrolidine),3.30(m,4h,piperazine),2.46(m,4h,piperazine),1.87-1.95(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝420.
实施例58哌啶-1-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰]-苯酯(b-10)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.46(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.6hz,arh),7.27-7.39(m,7h,arh,-chch),7.21(m,1h,arh),7.12(dd,1h,j1＝8.0hz,j2＝1.2hz,arh),5.45(d,1h,j＝13.2hz,-chch),3.54(m,4h,piperidine),3.46(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine),1.55-1.67(m,6h,piperidine).[m+h]+＝434.
实施例59吗啉-4-甲酸2-[3-(4-苄基-哌嗪-1-基)-丙烯酰基]-苯酯(b-11)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.28-7.40(m,7h,arh,-chch),7.23(m,1h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),5.45(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.71(m,4h,morpholine),3.64(m,2h,morpholine),3.55(m,4h,-nch2,morpholine),3.32(m,4h,piperazine),2.49(m,4h,piperazine).[m+h]+＝436.
实施例60二甲基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯酯(b-12)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.48(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.13(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.46(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.48(s,2h,-nch2),3.31(m,4h,piperazine),3.06(s,3h,-nch3),2.97(s,3h,-nch3),2.46(m,4h,piperazine).[m+h]+＝424.
实施例61二乙基-氨基甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-13)
操作同实施例49。熔点：79.1-84.3℃.1h-nmr(δ,cdcl3):7.45(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.36(m,2h,arh,-chch),7.21(m,3h,arh),7.12(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.44(d,1h,j＝13.2hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.47(s,2h,-nch2),3.31-3.42(m,4h,-nch2ch3),3.28(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.15-1.22(m,6h,-nch2ch3).[m+h]+＝452.
实施例62吡咯烷-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-14)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(dd,1h,j1＝7.2hz,j2＝1.2hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.19-7.23(m,3h,arh),7.16(dd,1h,j1＝8.4hz,j2＝1.2hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.47(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.53(t,2h,j＝6.8hz,pyrrolidine),3.47(s,2h,-nch2),3.42(t,2h,j＝6.8hz,pyrrolidine),3.29(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.87-1.94(m,4h,pyrrolidine).[m+h]+＝450.
实施例63哌啶-1-甲酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-15)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.46(dd,1h,j1＝7.6hz,j2＝1.2hz,arh),7.35(m,2h,arh,-chch),7.19-7.23(m,3h,arh),7.12(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.50(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.55(m,2h,piperidine),3.47(m,2h,-nch2,piperidine),3.29(m,4h,piperazine),2.44(m,4h,piperazine),1.57-1.65(m,6h,piperidine).[m+h]+＝464.
实施例64吗啉-4-羧酸2-{3-[4-(4-甲氧基-苄基)-哌嗪-1-基]-丙烯酰基}-苯基酯(b-16)
操作同实施例49。1h-nmr(δ,cdcl3):7.47(d,1h,j＝7.6hz,arh),7.37(m,2h,arh,-chch),7.23(m,3h,arh),7.14(d,1h,j＝8.0hz,arh),6.86(m,2h,arh),5.45(d,1h,j＝12.8hz,-chch),3.80(s,3h,-och3),3.71(m,4h,morpholine),3.64(m,2h,morpholine),3.49(m,4h,-nch2,morpholine),3.32(m,4h,piperazine),2.47(m,4h,piperazine).[m+h]+＝466.
实施例65化合物a-15的盐酸盐
取化合物a-151.0g，溶于10ml乙酸乙酯中，冰水浴中冷却至0℃，通入干燥hcl气体，离心，得白色固体，为a-15的盐酸盐，收率75％。
应用例1：
通过alphascreen法(amplifiedluminescenceproximityhomogeneousassay)测试化合物在针对brd4的抑制活性。具体方法如下：
在ph值为7.4的室温条件下，每孔中配置50mmhepes、100mmnacl、0.1％bsa和0.05％chaps的混合缓冲溶液。配体从150μm以1:2的比例连续稀释得到24个梯度的浓度，并在每孔中加入4μlhis标记brd4250nm；孔板培养30分钟后加入4μl生物素化肽(h4k5ack8ack12ack16ac)；再次培养30分钟后在弱光下加入25μg/ml的链霉亲和素包被的供体珠4μl和25μg/ml的镍螯合物受体珠4μl，然后在避光条件下培养60分钟后使用pherastarfsplatereader(bmglabtech,germany)设备读取光强，激发/发射光波长分别为680/570nm。
经检测计算，部分化合物的ic50如下表1所示：
表1
可见，该类化合物均具有一定的brd4抑制活性，化合物a、b与结构类似的阳性对照物i、ii、iii和iv活性相似，而化合物c显示出较高的活性，比常用的brd4抑制剂jq1活性高2倍，可用于制备治疗与brd4蛋白活性相关的疾病的药物。所述药物包括治疗增殖性疾病(包括癌症)，病毒感染，神经退行性疾病，炎症，动脉粥样硬化和男性避孕等疾病的药物。
总而言之，该类新化合物具有brd4抑制作用等多种药理活性，还具有原材料来源方便，制备方法操作简单、条件温和，成本低，适于工业化生产等优点，因而具有良好的商业价值。
无需进一步详细阐述，相信采用前面所公开的内容，本领域技术人员可最大限度地应用本发明。因此，前面的实施方案应理解为仅是举例说明，而非以任何方式限制本发明的范围。