一种吡啶类链状共轭体系分子衍生物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及有机合成技术领域，尤其涉及一种吡啶类链状共轭体系分子衍生物及其制备方法和应用。

背景技术：

近年的调查显示，至2020年，全世界将有数千万的神经退行性疾病患者，包括阿尔茨海默病(ad)，帕金森病(pd)，运动神经元疾病(mnd)，亨廷顿病(hd)，多发性硬化症(ms)等。世界帕金森病统计资料显示，pd处于神经退行性疾病的第二位，全球已有500多万pd患者。中国pd发生率约占老年人口的1％，65岁以上人群发病率已达1.7％左右，迄今已有200多万pd患者，每年新增病患近10万人。至2050年，中国将有800万pd患者，占全世界该病患的一半以上。随着老龄人口的快速增加和寿命的延长，此类疾病呈高发趋势。pd是一种以黑质纹状体通路神经退行性病变为主要特征的神经系统变性疾病，其临床特征主要表现为静止性震颤、肌肉强直、运动迟缓和姿势平衡障碍，且常伴有认知功能障碍。关于pd发病机制的研究，目前人们主要从线粒体功能障碍、氧化应激、神经炎症、兴奋性毒性、基因突变和α-突触核蛋白(α-syn)的纤维化等方面展开，尚不清楚他们之间的确切联系。近年以来，基于pd患者的脑部黑质的神经元细胞质中的路易小体(lb)的主要成分是发散的α-syn纤维状聚集体的事实，α-syn的纤维化导致pd的致病机制研究逐渐成主要方向。正常的α-syn是由140个氨基酸组成的核蛋白，高度可溶，调节着神经递质的合成、贮存与释放，在大脑获得性突触重排期间对突触前终端的离散分布有特定的上调作用。而纤维化的α-syn则是不溶的，进而不断在lb中沉积。α-syn纤维状聚集体的形成，已有证据证明，是有多种诱因参与了正常α-syn的非正常折叠，进而聚集和纤维形成，而这种聚集的α-syn还能够在神经元之间传输并进一步诱导其正常的α-syn的非正常折叠和聚集。人们普遍认为，正是这些非正常折叠的α-syn的纤维化造成了神经元及神经突触的死亡或功能障碍。所以，α-syn是针对pd的最重要的特异性靶点。美国fda批准的抗pd药物有23个，涉及到11个药物靶点：多巴胺能系统、5-羟色胺能系统、胆碱能系统及其他靶点。处于研究阶段的作用于已知靶点的候选药物有46种，其中以α-syn为靶点的抗pd药物有7种处于临床试验阶段。

尽管人们从不同角度包括抗体、肽等来寻找α-syn纤维化抑制剂，但对于pd的防治来说，发现对α-syn高效动态结合，阻止其进一步的聚集，甚至逆转聚集体的功能小分子，才是至关重要的。近来发现一些可抑制α-syn聚集的小分子化合物如hpn-100、npt200-11、rg-7935、pd-03a、biib-054、尼罗红、尼罗蓝、多酚类物质、姜黄素、黄芩黄酮、尼古丁、维生素a、表没食子儿茶素没食子酸酯等，但其抑制α-syn聚集的效果不够显著。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明实施例提供了一种吡啶类链状共轭体系分子衍生物及其制备方法和应用，主要目的是合成一种化合物，提高对α-syn聚集的抑制效果。

为达到上述目的，本发明主要提供了如下技术方案：

一方面，本发明实施例提供了一种吡啶类链状共轭体系分子衍生物，该化合物的化学结构式为通式1、通式2、通式3或通式4所示；

其中，通式1中的r1为溴、甲基、叔丁基、甲氧基、酯基或酰胺基；

通式1中的m为2或3；

通式2中的r2为溴、酯基、酰胺基或羧基；

通式3中的r3为氢、氟、甲基、甲氧基、酯基或酰胺基；

通式3或通式4中的x为碳原子或氮原子；

通式4中的r4为氢、甲基、氟、氯、溴或硝基；

通式4中的y为碳原子或氮原子；z为亚氨基或氧原子。

作为优选，所述通式1的化学结构包括1～16任意一种的结构式；

所述通式2的化学结构包括17～20任意一种结构式；

所述通式3的化学结构包括21～34任意一种结构式；

所述通式4的化学结构包括35～46任意一种结构式；

另一方面，本发明实施例提供了上述吡啶类链状共轭体系分子衍生物的制备方法：

所述通式1结构的化合物的制备方法包括：4-吡啶甲醛与乙醛发生缩合反应，得到原料1，即(e)-3-(4-吡啶基)-丙烯醛，增加乙醛用量或延长反应时间可以得到(2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯醛；其化学反应式如下所示：

所述原料1与4-取代苯乙酮衍生物发生缩合反应，得到具有通式1结构的化合物，即吡啶类链状共轭体系分子衍生物；其化学反应式如下所示：

所述通式2结构的化合物的制备方法包括：所述通式1中衍生物1、衍生物5或衍生物10与对甲苯磺酰肼发生关环反应，对应得到具有通式2结构的衍生物17、衍生物18或衍生物19；衍生物20的制备是由通式1中的衍生物5与水合肼在以naoh为催化剂和以甲醇为溶剂及回流条件下经关环、还原及水解反应得到，即吡啶类链状共轭体系分子衍生物；

所述通式3结构的化合物的制备方法包括：以4-(2-(4-吡啶基)-乙烯基)苯甲醛为原料2，以三苯基膦盐c类衍生物为原料3，原料2和原料3发生wittig反应，得到具有通式3结构的化合物，即吡啶类链状共轭体系分子衍生物；

所述通式4结构的化合物的制备方法包括：以三苯基膦盐d类衍生物为原料4，以(e)-3-(2-吡啶基)-丙烯醛为原料5，所述原料1或所述原料5与原料4发生wittig反应，得到具有通式4结构的化合物，即吡啶类链状共轭体系分子衍生物。

作为优选，具有通式1结构的化合物的具体制备方法包括以下步骤：

步骤(1)，将4-吡啶甲醛溶于有机溶剂1和水的混合溶液中，向混合溶液中加入碳酸钾和四丁基溴化铵，0℃条件下向所述溶液中滴加乙醛水溶液，低温搅拌反应，直至4-吡啶甲醛反应完全；反应液用二氯甲烷萃取，收取有机相，无水硫酸钠干燥；硅胶柱分离，洗脱液为乙酸乙酯/石油醚，得到中间体原料1，即(e)-3-(4-吡啶基)丙烯醛；延长反应时间或增加乙醛水溶液用量，得到另一中间体(2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯醛；

步骤(2)，将4-取代苯乙酮类化合物溶于有机溶剂2中，加入氢氧化钠水溶液，0℃条件下滴加所述原料1或所述(2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯醛，室温搅拌反应，直至中间体反应完全，停止搅拌，减压浓缩，用有机溶剂萃取，收集有机相，无水硫酸钠干燥，硅胶柱分离，洗脱液为乙酸乙酯/石油醚，得到具有通式1结构的吡啶类链状共轭体系分子衍生物。

作为优选，所述步骤(1)中的4-吡啶甲醛、碳酸钾及乙醛的摩尔比为1:1:2；所述乙醛水溶液体积浓度为40％；所述有机溶剂1为thf、ch2cl2、dmf或dmso；反应时间为3h；

所述步骤(2)中，所述4-取代苯乙酮类化合物、所述氢氧化钠以及所述中间体的摩尔比为1:1.2:1，所述洗脱液乙酸乙酯/石油醚为体积比为1:1；所述有机溶剂2为ch2ch5oh、thf、ch2cl2或dmf；反应时间为4h。

作为优选，具有通式2结构的化合物的具体制备方法包括以下步骤：

所述通式1中的衍生物1或衍生物5或衍生物10和对甲苯磺酰肼溶于有机溶剂1中，在温度为60℃且酸性条件下发生亲核加成反应8h，柱层析分离得到中间产物腙；所述腙溶于有机溶剂2中，在温度为60℃且碱性条件下发生关环反应4h，重结晶，收集固体产物，即对应得到具有通式2结构的吡啶类链状共轭体系分子衍生物17、18或19；

所述衍生物20的具体制备是将所述通式1中的衍生物5溶于甲醇中，加入水合肼和固态naoh，回流20h，再蒸馏回收甲醇。加入盐酸(10mol/l)调节ph至6～7，析出黄色固体，经柱层析纯化，得到吡啶类链状共轭体系分子衍生物20；化学反应式如下：

作为优选，所述中间体腙的柱层析分离采用的洗脱液组成是乙酸乙酯与石油醚的体积比为2:1；所述通式1中的衍生物1或衍生物5或衍生物10和对甲苯磺酰肼(tsnhnh2)的摩尔比为均1:1.2；所述酸性条件是向反应体系中加入10mol/l的盐酸水溶液；所述碱性条件是向反应体系中加入氢氧化钠，所述氢氧化钠的用量为1当量；所述有机溶剂1和所述有机溶剂2均为thf、ch2cl2、dmf、ch3cn或dmso。

作为优选，具有通式3结构的化合物的具体制备方法包括以下步骤：将所述原料2和原料3一起溶解于有机溶剂中，加入碱溶液，室温下反应，有机溶剂萃取，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析分离，得到目标产物，即具有通式3结构的吡啶类链状共轭体系分子衍生物；将所述原料1与原料4，或将原料5与原料4一起溶解于有机溶剂中，加入碱溶液，室温下反应，有机溶剂萃取，无水硫酸钠干燥，硅胶柱层析分离，分别得到目标产物，即具有通式4结构的吡啶类链状共轭体系分子衍生物；具体化学反应式如下：

作为优选，所述硅胶柱层析分离的洗脱液乙酸乙酯与石油醚的体积比为1:5；所述原料2与原料3的摩尔比为1:1；所述原料1与原料4的摩尔比为1:1；所述原料5与原料4的摩尔比为1:1；所述原料1为(e)-3-(4-吡啶基)-丙烯醛；所述原料2为4-(2-(4-吡啶基)-乙烯基)苯甲醛；所述原料3为4-取代溴甲基苯的三苯基膦盐类化合物；所述原料4为2-(氯甲基)苯并[d]恶唑或2-(氯甲基)-1h-苯并[d]咪唑的三苯基膦盐类化合物；所述原料5为(e)-3-(2-吡啶基)-丙烯醛；所述有机溶剂为thf、ch2cl2、dmf、ch3cn或dmso；反应时间为4h。

作为优选，所述原料2，即4-(2-(4-吡啶基)-乙烯基)苯甲醛由如下方法制得：将4-甲基吡啶和对苯二甲醛溶解于有机溶剂中加热搅拌发生缩合反应得到目标化合物，化学反应式为：

作为优选，所述原料2的具体制备方法包括以下步骤：将一定量的对苯二甲醛溶解到有机溶剂中，回流，直到对苯二甲醛完全溶解后，向该体系中缓慢加入4-甲基吡啶和醋酸酐的混合溶液，监测到4-甲基吡啶反应完全后停止反应；冷却，将体系倒入一定体积的稀盐酸溶液中，析出并滤出杂质，有机溶剂萃取除去少量未反应的对苯二甲醛，碱性条件下使产物在水相中析出，取滤饼置烘箱烘干，得到目标化合物原料2，即4-(2-(4-吡啶基)-乙烯基)苯甲醛。

作为优选，所述对甲基吡啶与对苯二甲醛的摩尔比为1:2；醋酸酐过量；反应时间为4h；所述有机溶剂为thf、ch2cl2、dmf、ch3cn或dmso；所述稀盐酸和氢氧化钠的浓度均为1mol/l；反应时间为5h。

作为优选，所述原料3，即三苯基膦盐c类衍生物为4-取代溴甲基苯的三苯基膦盐类化合物，其制备方法包括以下步骤：

步骤(1)：以4-取代甲苯和溴代丁二酰亚胺(nbs)为原料，以过氧化苯甲酰为自由基引发剂，发生自由基取代反应，生成溴代产物；当取代基r为酯基基团时，需要先合成对-溴甲基苯甲酸，该化合物是以对-甲基苯甲酸为原料，以溴酸钾为溴化试剂反应得到；其化学反应式如下所示：

步骤(2)：以对-溴甲基苯甲酸为原料，甲醇及其类似物为亲核试剂，二环己基碳二亚胺(dcc)为缩合剂，4-二甲氨基吡啶(dmap)为催化剂，发生酯化反应，生成对-溴甲基苯甲酸甲酯；其化学反应式如下所示：

步骤(3)：以对-溴甲基苯或其衍生物和三苯基膦为原料，溶解于有机溶剂中，高温加热搅拌，得到原料3，即三苯基膦盐c类衍生物；

作为优选，制备所述原料3的反应步骤(1)具体包括以下步骤：

将一定量的对-甲基苯甲酸溶解于有机溶剂中，加入一定量的溴酸钾的水溶液，室温搅拌反应，缓慢滴加碳酸氢钠的水溶液到反应体系中，控制滴加速度使反应完全。有机溶剂萃取，饱和硫代硫酸钠调节有机相ph值至中性，加水萃取，无水硫酸钠干燥有机相，减压浓缩，重结晶得到对-溴甲基苯甲酸。

作为优选，所述对-甲基苯甲酸和溴酸钾的摩尔比为1:3；所述重结晶溶剂为乙醇/水(9:1)；所述有机溶剂为thf、ch2cl2、dmf、c4h8o2中的一种；所述反应时间为6h。

作为优选，制备所述原料3的反应步骤(2)具体包括以下步骤：

将一定量的对-溴甲基苯甲酸溶于有机溶剂中，0℃条件下加入一定量的dcc和dmap，搅拌反应，加入过量甲醇室温反应，反应完全后有机溶剂萃取，盐酸洗涤，碳酸氢钠洗涤，食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，硅胶柱分离，得对-溴甲基苯甲酸甲酯。

作为优选，所述对-溴甲基苯甲酸和dcc及dmap的摩尔比为1:1.5:1；所述洗脱液乙酸乙酯/石油醚为1:20(体积比)；所述有机溶剂为thf、ch2cl2、ch3oh、ch3cn中的一种；所述反应时间为16h。

作为优选，制备原料3的步骤(3)具体包括以下步骤：将对-溴甲基苯或其衍生物溶解于有机溶剂中，加入一定量的三苯基膦，搅拌升温至110℃继续反应，薄层色谱监测反应完全后，冷却结晶过滤，有机溶剂洗涤，烘干得到目标化合物3，即三苯基膦盐c类衍生物。

作为优选，所述对-溴甲基苯或其衍生物和三苯基膦的摩尔比为1:1.1；所述反应时间为6h；所述有机溶剂为thf、ch3oh、c6h6中的一种。

本发明所述原料4，即三苯基膦盐d类衍生物的合成方法与所述原料3的合成方法类似。

本发明所述原料5，即(e)-3-(2-吡啶基)-丙烯醛的合成方法与所述原料1的合成方法类似。

另一方面，本发明实施例提供了上述吡啶类链状共轭体系分子衍生物在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用；作为优选，所述神经退行性疾病包括帕金森病(pd)。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明在保留通式1、通式2、通式3或通式4结构-药效基团乙烯基吡啶的前提下，经克莱森-施密特缩合反应或wittig反应延长共轭体系，制备出相应的衍生物。

本发明合成的吡啶类链状共轭体系分子衍生物，经活性评价实验，结果显示部分化合物对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤有较明显的保护作用，并对α-syn蛋白的聚集和纤维化有明显的抑制作用，具有统计学意义，可能进一步开发成为用于治疗帕金森的药物。

附图说明

图1为本发明实施例提供的吡啶类链状共轭体系分子衍生物3的¹³cnmr谱图；

图2为本发明实施例提供的吡啶类链状共轭体系分子衍生物25的¹³cnmr谱图；

图3为本发明实施例提供的吡啶类链状共轭体系分子衍生物35的¹³cnmr谱图；

图4为本发明实施例提供的吡啶类链状共轭体系分子衍生物37的¹³cnmr谱图；

图5为本发明提供的化合物1～17对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤的保护作用的柱状统计图；

图6为本发明提供的化合物18～35对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤的保护作用的柱状统计图；

图7为本发明提供的化合物36～46对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤的保护作用的柱状统计图；

图8为本发明实施例提供的tht荧光实验检测优选化合物4,14,21,25对α-syn寡聚及纤维化的抑制能力及各化合物的ic50值曲线图。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效,以下以较佳实施例，对依据本发明申请的具体实施方式、技术方案、特征及其功效，详细说明如后。下述说明中的多个实施例中的特定特征、结构、或特点可由任何合适形式组合。

以下各实施例制备过程中采用的所有化学试剂，如无特别标注均为分析纯。

实施例1-实施例16制备具有通式1结构的衍生物1～16；

实施例17-实施例20制备具有通式2结构的衍生物17～20；

实施例21-实施例33制备具有通式3结构的衍生物21～34；

实施例34-实施例45制备具有通式4结构的衍生物35～46。

实施例1(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物1)

称取化合物对-溴代苯乙酮(0.396g,2.0mmol)溶于6ml乙醇中，氢氧化钠(0.096g,2.4mmol)溶于10ml水中，将制备的上述两种溶液一起倒入50ml圆底烧瓶；在温度为0℃(冰水浴)下向圆底烧瓶中滴加(e)-3-(4-吡啶基)丙烯醛(0.266g,2.0mmol)，移去冰水浴，升至室温，继续搅拌，tlc监测反应；反应4h后停止搅拌，除去大部分乙醇，随后用二氯甲烷萃取，收集有机相，用无水硫酸钠干燥后再进行柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚＝1:1)，得到淡黄色固体，即衍生物1，产率为58％；对上述衍生物1的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(d,j＝5.0hz,2h),7.85(d,j＝8.3hz,2h),7.64(d,j＝8.3hz,2h),δ7.57(dd,j＝14.9,11.3hz,,1h),7.33(d,j＝5.2hz,2h),7.15(dd,j＝20.8,13.4hz,2h),6.93(d,j＝15.5hz,1h)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ188.94,150.46,143.61,143.06,138.85,136.51,132.01,130.86,129.95,128.19,127.10,121.16,77.41,77.09,76.77,29.70；

hrms(positiveesi)calcd.forc16h12brno[m+na]⁺335.9994,found:336.1237。

实施例2(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物2)

本实施例2与实施例1不同之处在于，用对-甲基苯乙酮替换对-溴代苯乙酮，经反应后得到黄色固体，即为衍生物2，产率为54％；对上述衍生物2的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(d,j＝6.0hz,2h),7.90(d,j＝8.2hz,2h),7.56(dd,j＝14.9,11.2hz,1h),7.31(dd,j＝13.7,7.0hz,4h),7.17(dd,j＝16.4,12.9hz,2h),6.89(d,j＝15.8hz,1h),2.43(s,3h)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ189.57,150.36,143.92,143.31,142.64,138.03,135.27,131.21,129.41,128.60,127.88,121.13,21.69；

hrms(positiveesi)calcd.forc17h15no[m+h]⁺250.1227,found:250.1235。

实施例3(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物3)

本实施例3与实施例1不同之处在于，用对-甲氧基苯乙酮替换对-溴代苯乙酮，经反应后得到黄色固体，即为衍生物3，产率为60％；对上述衍生物3的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(s,2h,pyridine-h),8.04-7.95(m,2h),7.55(dd,j＝14.8,11.0hz,1h),7.33(d,j＝5.4hz,2h),7.23-7.11(m,2h),6.97(d,j＝8.9hz,2h),6.88(d,j＝15.5hz,1h),3.88(s,3h)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ188.26,163.60,150.32,143.38,142.24,137.79,131.27,130.78,130.74,127.73,121.14,113.93,55.51；

hrms(positiveesi)calcd.forc17h15no2[m+h]⁺266.1176,found:266.1172。

实施例4(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物4)

本实施例4与实施例1不同之处在于，用对-叔丁基苯乙酮替换对-溴代苯乙酮，经反应后得到黄色固体，即为衍生物4，产率为58％；对上述衍生物4的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(d,j＝5.7hz,2h),7.94(d,j＝8.6hz,2h),7.61-7.47(m,3h),7.34(d,j＝6.1hz,2h),7.25-7.14(m,2h,ch＝ch),6.90(d,j＝15.8hz,1h),1.35(s,9h)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ189.62,156.88,150.23,143.44,142.62,137.97,135.18,131.33,128.46,127.99,125.67,121.19,35.16,31.09；

hrms(positiveesi)calcd.forc20h21no[m+h]⁺292.1696,found:292.1684。

实施例5(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物5)

制备甲醇钠：称取0.069g金属钠加入盛有10ml无水甲醇的烧杯中，室温搅拌，至金属钠完全反应，获得甲醇钠溶液；

称取(e)-3-(4-吡啶基)丙烯醛(0.399g,3.0mmol)和4-乙酰基苯甲酸甲酯(0.640g,3.6mmol)作为原料，加入甲醇，0℃条件下搅拌反应，将上述制备的甲醇钠溶液逐滴加入反应体系，搅拌10h；反应结束时，反应液为深黄色且有黄色沉淀析出，过滤，收集固体，滤渣用甲醇浸洗，真空干燥，得到淡黄色固体，为4-((2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯酰基)苯甲酸甲酯，即衍生物5，产率60％；对上述衍生物5的化学结构进行核磁共振氢谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝5.4hz,2h,pyridine-h),8.16(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),8.02(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.59(dd,j＝15.0,11.1hz,1h,ch＝ch),7.35(d,j＝5.9hz,2h,pyridine-h),7.19(dd,j＝15.2,12.0hz,2h,ch＝ch),6.96(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch),3.96(s,1h,ch3)；

hrms(positiveesi)calcd.forc18h15no3[m+h]⁺294.1125,found:294.1132。

实施例6(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物6)

本实施例6与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-苯基苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物6，产率为57％；对上述衍生物6的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ10.46(s,1h,nh),8.61(d,j＝3.9hz,2h,pyridine-h),8.14(q,j＝8.4hz,4h,ar-h),7.79(d,j＝7.9hz,2h,ar-h,pyridine-h),7.55(d,j＝3.1hz,4h,ar-h,pyridine-h),7.49(d,j＝10.1hz,1h,ch＝ch),7.38(t,j＝7.8hz,2h,ar-h),7.23(d,j＝15.2hz,1h,ch＝ch),7.13(t,j＝7.3hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ188.98,164.74,150.27,143.70,142.95,139.49,138.93,138.84,138.68,131.44,128.64,128.27,128.16,127.68,123.97,121.22,120.45；

hrms(positiveesi)calcd.forc23h18n2o2[m+h]⁺355.1441,found:355.1449。

实施例7(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物7)

本实施例7与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(4-氯苯基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物7，产率为65％；对上述衍生物7的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),8.08(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.99(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.91(s,1h,nh),7.61(m,3h,ar-h,ch＝ch),7.40-7.32(m,4h,pyridine-h,ar-h),7.21(dd,j＝14.9,12.1hz,2h,ch＝ch),6.97(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ189.34,164.80,151.31,150.44,147.92,144.02,143.07,140.63,139.14,138.65,137.94,130.87,128.82,127.68,127.32,121.20,120.30,114.37；

hrms(positiveesi)calcd.forc23h17cln2o2[m+h]⁺389.1052,found:389.1061。

实施例8(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物8)

本实施例8与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(对甲苯基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物8，产率为67％；对上述衍生物8的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),8.08(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.99(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.82(s,1h,nh),7.68-7.49(m,3h,ch＝ch,ar-h),7.37(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.20(dd,j＝10.3,3.9hz,4h,ch＝ch,ar-h),6.98(t,j＝9.4hz,1h,ch＝ch),2.36(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ188.93,164.47,150.32,143.66,142.93,139.42,138.93,138.76,136.37,132.92,131.43,129.03,128.26,128.12,127.69,121.20,120.43,20.49；

hrms(positiveesi)calcd.forc24h20n2o2[m+h]⁺369.1598,found:369.1606。

实施例9(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物9)

本实施例9与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(2-甲氧基苯基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物9，产率为59％；对上述衍生物9的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.66(d,j＝4.7hz,2h,pyridine-h),8.60(s,1h,nh),8.53(d,j＝8.0hz,1h,ar-h),8.10(d,j＝7.5hz,2h,ar-h),8.03(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.61(dd,j＝14.0,11.5hz,1h,ch＝ch),7.52(d,j＝4.7hz,2h,pyridine-h),7.13(t,j＝7.9hz,2h,ch＝ch),7.08-7.01(m,2h,ar-h,ch＝ch),6.99-6.92(m,2h,ar-h)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ189.03,164.30,151.77,150.31,143.70,142.94,139.55,138.92,138.26,131.44,128.34,128.03,127.75,126.51,126.11,124.72,121.20,120.19,111.51,55.71；

hrms(positiveesi)calcd.forc24h20n2o3[m+h]⁺385.1547,found:385.1551。

实施例10(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物10)

本实施例10与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(3,4-二氯苯基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物10，产率为62.5％；对上述衍生物10的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ10.69(s,1h,nh),8.61(d,j＝4.8hz,2h,pyridine-h),8.14(dd,j＝17.5,8.0hz,5h,ar-h,ch＝ch),7.78(d,j＝8.3hz,1h,ar-h),7.65(d,j＝8.8hz,1h,ar-h),7.55(m,4h,pyridine-h,ar-h,ch＝ch),7.49(d,j＝10.4hz,1h,ch＝ch),7.24(d,j＝15.5hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ188.97,165.03,150.32,143.76,142.92,139.82,139.03,138.99,137.97,131.41,130.89,130.61,128.33,128.24,127.69,125.41,121.54,121.20,120.34；

hrms(positiveesi)calcd.forc23h16cl2n2o2[m+h]⁺423.0662,found:423.0654。

实施例11(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物11)

本实施例11与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(2-氟苯基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物11，产率为65.9％；对上述衍生物11的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63(d,j＝5.7hz,2h,pyridine-h),8.45(t,j＝7.5hz,1h,ar-h),8.19(s,,1h,nh),8.09(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),8.02(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),7.60(dd,j＝14.8,11.1hz,1h,ch＝ch),7.36(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),7.25-7.11(m,5h,ar-h,ch＝ch),6.96(d,j＝15.5hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ188.28,163.43,152.97,150.55,148.80,142.87,142.65,139.49,137.82,137.15,130.29,127.88,126.56,126.52,125.20,125.11,124.03,123.96,123.79,123.76,120.92,120.35,114.04,113.85；

hrms(positiveesi)calcd.forc23h17fn2o2[m+h]⁺373.1347,found:373.1340。

实施例12(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物12)

本实施例12与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(2-吡啶基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物12，产率为61％；对上述衍生物12的化学结构进行核磁共振氢谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.97(s,1h,nh),8.63(d,j＝6.1hz,2h,pyridine1-h),8.41(d,j＝8.4hz,1h,pyridine2-h),8.30-8.26(m,hz,1h,pyridine2-h),8.10-8.04(m,4h,ar-h),7.82-7.77(m,1h,pyridine2-h),7.60(dd,j＝14.7,11.0hz,1h,ch＝ch),7.36(d,j＝6.1hz,2h,pyridine1-h),7.20(dd,j＝15.1,11.6hz,2h,ch＝ch),7.13-7.09(m,1h,pyridine2-h),6.96(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch)；

hrms(positiveesi)calcd.forc22h17n3o2[m+h]⁺356.1394,found:356.1401。

实施例13(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物13)

本实施例13与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(苄基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物13，产率为57.4％；对上述衍生物13的化学结构进行核磁共振氢谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ9.29(s,1h,nh),8.61(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),8.09(dd,j＝21.1,8.4hz,4h,ar-h).7.56(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),7.54(d,j＝5.1hz,2h,ar-h,ch＝ch),7.48(d,j＝10.6hz,1h,ch＝ch),7.36(d,j＝4.4hz,4h,ar-h),7.24(dd,j＝22.5,10.0hz,2h,ch＝ch),4.53(d,j＝5.9hz,2h,ch2)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ189.08,165.59,150.19,143.65,143.00,139.31,139.27,138.84,138.01,131.45,128.31,127.73,127.67,127.22,126.83,121.26,42.72；

hrms(positiveesi)calcd.forc24h20n2o2[m+h]⁺369.1598,found:369.1594。

实施例14(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物14)

本实施例14与实施例5不同之处在于，用4-乙酰基-n-(3,4-二甲氧基苯乙基)苯甲酰胺替代4-乙酰基苯甲酸甲酯，反应产物为黄色固体，即衍生物14，产率为48.1％；对上述衍生物14的化学结构进行核磁共振氢谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(s,2h,pyridine-h),7.98(d,j＝7.9hz,2h,ar-h),7.80(d,j＝8.0hz,2h,ar-h),7.73-7.40(m,3h,ch＝ch,pyridine-h),7.19(d,j＝14.9hz,1h,ch＝ch),6.95(d,j＝15.3hz,1h,ch＝ch),6.83(d,j＝8.0hz,1h,ar-h),6.77(d,j＝9.3hz,2h,ar-h),6.34(d,j＝18.2hz,1h,ch＝ch),3.86(d,j＝8.0hz,6h,och3),3.76-3.66(m,2h,ch2),2.91(t,j＝6.6hz,2h,ch2)；

hrms(positiveesi)calcd.forc27h26n2o4[m+h]⁺443.1966,found:443.1958。

实施例15(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物15)

本实施例15与实施例5不同之处在于，反应物为(2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯醛和对-甲氧基苯乙酮，反应产物为黄色固体，即衍生物15，产率为52％；对上述衍生物15的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.51(d,j＝4.8hz,2h,pyridine-h),7.92(d,j＝8.9hz,2h,ar-h),7.45(dd,j＝14.9,11.2hz,1h,ch＝ch),7.28(d,j＝5.8hz,2h,pyridine-h),7.04(dt,j＝10.7,5.7hz,2h,ch＝ch),6.90(d,j＝8.9hz,2h,ar-h),6.76(dd,j＝14.7,10.8hz,1h,ch＝ch),6.63(dd,j＝15.1,9.4hz,2h,ch＝ch),3.82(s,3h,och3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ187.38,162.45,149.20,142.87,141.86,139.15,132.79,132.45,131.38,129.94,129.69,125.36,119.87,112.84,54.48；

ms(positiveesi)calcd.forc19h17no2[m+h]⁺292.1,found:292.2。

实施例16(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物16)

本实施例16与实施例5不同之处在于，反应物为(2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯醛和4-乙酰基-n-(4-氯苯基)苯甲酰胺，反应产物为黄色固体，即衍生物16，产率为58％；对上述衍生物16的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ8.58(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),8.17(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),8.11(d,j＝8.5hz,2h,ar-h),7.85(d,j＝8.9hz,2h,ar-h),7.58(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.56-7.48(m,2h,ch＝ch),7.47-7.40(m,3h,ar-h,ch＝ch),7.12(dd,j＝14.7,11.0hz,1h,ch＝ch),6.88(dd,j＝15.4,9.1hz,2h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ188.65,164.83,150.11,144.24,143.44,141.99,139.78,134.09,133.59,132.86,128.57,128.28,128.14,127.51,126.11,121.91,120.99；

hrms(positiveesi)calcd.forc25h19cln2o2[m+h]⁺415.1208,found:415.1213。

实施例17(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物17)

称取(2e,4e)-1-(4-溴苯基)-5-(4-吡啶基)戊-2,4-二烯-1-酮(化合物1)(0.314g,1.0mmol)和tsnhnh2(0.218g,1.2mmol)加入盛有10mldmf的圆底烧瓶中，向上述溶液中滴加4滴hcl(10mol/l)，将圆底烧瓶移至油浴锅中，升温至60℃，搅拌；8h后，经tlc检测，化合物1反应完全，冷却至室温；向反应液中加5ml水，有黄色固体析出，过滤，收集固体，柱层析分离(乙酸乙酯/石油醚＝1:1)，得黄色固体，该黄色固体为中间产物腙；将此中间产物溶于盛有5ml乙腈的圆底烧瓶中，随后加入粉末状naoh(0.040mg,1.0mmol)，将圆底烧瓶移至油浴锅中，升温至60℃，搅拌；4h后，经薄层色谱检测，中间产物腙完全反应，停止加热，反应液中有白色的对甲苯磺酸钠析出；随后将反应液倒入盛有20ml水的烧杯中，对甲苯磺酸钠溶解而目标产物析出，过滤，收集淡黄色固体，即衍生物17，收率为50％；对上述衍生物17的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ13.42(s,1h,pyrazole-nh),8.63-8.47(s,2h,pyridine-h),7.87-7.73(m,2h,ar-h),7.72-7.60(m,2h,ar-h),7.59-7.48(m,2h,pyridine-h),7.48-7.35(m,1h,ch＝ch),7.13(dd,j＝57.3,8.3hz,2h,pyrazole-h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ150.10,143.58,141.43,132.58,131.65,128.06,127.07,125.50,120.71,119.01,101.53,100.68；

hrms(positiveesi)calcd.forc16h12brn3[m+h]⁺326.0288,found:326.0294。

实施例18(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物18)

本实施例18与实施例17不同之处在于，用4-((2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯酰基)苯甲酸甲酯(化合物5)替代(2e,4e)-1-(4-溴苯基)-5-(4-吡啶基)戊-2,4-二烯-1-酮(化合物1)，反应产物为黄色固体，即衍生物18，产率为59％；对上述衍生物18的化学结构进行核磁共振氢谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ8.57(d,j＝5.9hz,2h,pyridine-h),8.04(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.97(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.54(d,j＝6.0hz,2h,pyridine-h),7.45(d,j＝16.5hz,1h,ch＝ch),7.24(s,1h,pyrazole-h),7.19(d,j＝4.1hz,1h,ch＝ch),3.88(s,3h,ch3)；

hrms(positiveesi)calcd.forc18h15n3o2[m+h]⁺306.1237,found:306.1244。

实施例19(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物19)

本实施例19与实施例17不同之处在于，用化合物n-(3,4-二氯苯基)-4-((2e,4e)-5-(4-吡啶基)-2,4-戊二烯酰)苯甲酰胺(化合物10)替代(2e,4e)-1-(4-溴苯基)-5-(4-吡啶基)戊-2,4-二烯-1-酮(化合物1)，反应产物为黄色固体，即衍生物19，产率为60％；对上述衍生物19的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ13.56(s,1h,pyrazole-nh),10.54(s,1h,nh),8.57(d,j＝3.4hz,2h,pyridine-h),8.19(s,1h,pyrazole-ch),8.02(dd,j＝24.2,7.4hz,4h,ar-h),7.79(d,j＝8.3hz,1h,ar-h),7.64(d,j＝8.7hz,1h,ar-h),7.55(d,j＝3.3hz,2h,pyridine-h),7.46(d,j＝16.7hz,1h,ch＝ch),7.22(d,j＝15.7hz,2h,ar-h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ165.72,150.63,144.04,142.12,139.81,131.33,131.06,128.89,125.41,121.87,121.22,120.70,102.62；

hrms(positiveesi)calcd.forc23h16cl2n4o[m+h]⁺435.0774,found:435.0781。

实施例20(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物20)

称取化合物5(0.293g,1.0mmol)加至盛有10ml甲醇的圆底烧瓶中，将水合肼(0.2ml,4.1mmol)滴加于上述溶液中，随后再加入固体naoh(40mg,1mmol)，将圆底烧瓶移至油浴中，搅拌，升温回流，tlc监测反应；20h后，原料反应完全，停止加热，冷却至室温；减压浓缩，得到黄色粘稠液体，加适量稀hcl调ph值至中性，有黄色固体析出，过滤，收集黄色固体，硅胶柱分离得衍生物20，产率70％；对上述衍生物20的化学结构进行核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及高分辨率质谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,d-dmso)δ8.46(d,j＝5.6hz,2h,pyridine-h),8.01(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.79(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.28(d,j＝5.8hz,2h,pyridine-h),6.56(s,1h,pyrazole-h),3.07-2.89(t,4h,ch2)；

¹³cnmr(101mhz,d-dmso)δ167.50,149.92,149.37,147.44,145.61,136.75,129.80,124.75,123.86,120.81,101.31,33.64,26.06；

hrms(positiveesi)calcd.forc17h15n3o2[m+h]⁺294.1237,found:294.1244。

实施例21(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物22)

称取化合物(e)-4-(2-(4-吡啶基)-乙烯基)苯甲醛(0.209g,1.0mmol)，和苄基三苯基溴化膦(0.433g,1.0mmol)加入到50ml的烧瓶中；在氮气保护下，向反应体系中加入1mol/l氢氧化钠溶液(20ml)和二氯甲烷(15ml)；在室温下反应，tlc监测，反应时间为4h。减压浓缩，二氯甲烷萃取，收集有机相，无水硫酸钠干燥，硅胶柱分离，洗脱液乙酸乙酯/石油醚按照体积比1:5，得到黄色固体，为衍生物22，产率为75％；对上述衍生物22的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.56(d,j＝6.1hz,2h,py-h),7.39(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.35(d,j＝4.7hz,2h,ar-h),7.30-7.13(m,8h),6.98(d,j＝16.3hz,2h,ch),6.61(q,j＝12.2hz,2h,ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ149.94(2c),144.89,137.91,137.17,134.85,133.02,131.01,129.60,129.44(2c),128.86(2c),128.33(2c),126.92(2c),125.9,20.85(2c)。

其中，化合物21为制备化合物22时的副产物，产率为20％。化合物21的核磁共振氢谱如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.59(d,j＝5.9hz,4h,py-h),7.57(s,4h,ar-h),7.38(d,j＝6.0hz,4h,py-h),7.31(d,j＝16.3hz,2h,ch),7.06(d,j＝16.3hz,2h,ch)。

实施例22(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物23)

本实施例22与实施例21不同之处在于，用4-氟苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物23，产率70％；对上述衍生物23的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.56(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.39(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.33(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.28-7.20(m,5h,ar-h)，7.03-6.88(m,3h),6.57(s,2h,ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)149.79(2c),145.00,137.70,134.93,133.06,130.58,130.50,129.81,129.61,129.39,127.01,125.77,120.89,115.39,115.81。

实施例23(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物24)

本实施例23与实施例21不同之处在于，用4-甲基苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物24，产率70％；对上述衍生物24的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(d,j＝6.1hz,2h,py-h),7.39(dd,j＝10.0hz,7.3,4h,py-h,ar-h),7.33-7.27(m,3h),7.17(d,j＝8.1hz,2h,ar-h),7.05(d,j＝8.0hz,2h,ar-h),6.99(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.57(dd,j＝32.0hz,12.2hz,2h,ch＝ch),2.33(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)149.75(2c),145.17,138.24,137.15,134.69,134.18,133.23,131.01,129.41(2c),129.01(2c),128.78,126.93(2c),125.52,120.88(2c),21.27。

实施例24(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物25)

本实施例24与实施例21不同之处在于，用4-甲氧基苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物25，产率75％；对上述衍生物25的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.58(s,2h，py-h),7.39(dd,j＝15.1hz,5.5,4h,ar-h),7.34-7.16(m,5h,ar-h),6.98(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.78(d,j＝8.4hz,2h),6.53(dd,j＝12.1hz,2h,ch＝ch),3.79(s,3h,och3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ158.87,149.71(2c),145.13,138.38,134.61,133.25,130.18(2c),129.54,129.37(2c),128.12,126.98(2c),125.49,120.96,113.70(2c),55.22。

实施例25(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物26)

本实施例25与实施例21不同之处在于，用(4-甲氧基羰基)苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物26，产率80％；对上述衍生物26的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.92(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.40(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.34(dd,j＝9.7hz,6.0hz,4h,ar-h,py-h),7.29-7.22(m,3h),6.99(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.67(dd,j＝12.3hz,2h,ch＝ch),3.90(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ166.84,149.31(2c),145.38,137.41,135.18,141.92,133.37,131.48,129.97,129.44(2c),129.63(2c),128.86(2c),127.09(2c),125.76，121.00(2c),52.06。

实施例26(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物27)

本实施例26与实施例21不同之处在于，用(4-乙氧基羰基)苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物27，产率70％；对上述衍生物27的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.92(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.40(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.33(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.30-7.22(m,3h),6.99(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.74-6.59(dd,j＝12.3hz,2h,ch＝ch),4.37(q,j＝7.1hz,2h,ch2),1.38(t,j＝7.1hz,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ166.75,149.31(2c),145.38,137.41,135.18,141.92,133.37,131.48,129.83,129.44(2c),129.63(2c),128.86(2c),127.09(2c),125.76,121.00(2c),60.31,14.25。

实施例27(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物28)

本实施例27与实施例21不同之处在于，用(4-异丙氧基羰基)苄基)三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物28，产率70％；对上述衍生物28的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.92(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.40(d,j＝8.2hz,2h,ar-h),7.37(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.33(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.30-7.22(m,3h),6.99(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.68(q,j＝12.3hz,2h,ch＝ch),5.24(m,1h,ch),1.36(d,j＝6.3hz,6h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ166.84,149.31(2c),145.38,141.92,137.41,135.18,133.37,131.48,129.83,129.44(2c),129.63(2c),128.86(2c),127.09(2c),125.76,121.00(2c),67.71,20.65(2c)。

实施例28(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物29)

本实施例28与实施例21不同之处在于，用(4-丁氧基羰基)苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物29，产率70％；对上述衍生物29的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.57(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.92(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.44-7.39(m,4h),7.33(d,j＝8.3hz,2h),7.28-7.23(m,4h),7.01(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.68(q,j＝12.3hz,2h,ch＝ch),4.31(t,j＝6.6hz,2h,ch2),1.74(m,2h),1.46(m,2h),0.97(t,j＝7.4hz,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)166.28,149.00(2c),145.75,141.96,137.53,135.08,133.64,131.39,129.59,129.44(2c),128.83(2c),127.14(2c),125.66,121.09(2c),64.94,30.73,19.28,13.58。

实施例29(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物30)

本实施例29与实施例21不同之处在于，用(4-丁氧基羰基)苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物30，产率70％；对上述衍生物30的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.57(d,j＝6.0hz,2h,py-h),7.92(d,j＝8.4hz,2h,ar-h),7.44-7.39(m,4h),7.33(d,j＝8.3hz,2h),7.28-7.23(m,4h),7.01(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.68(q,j＝12.3hz,2h,ch＝ch),4.78-5.04(m,1h,ch),1.68-7.14(m,4h,ch2),1.53-1.58(m,4h,ch2),1.40-1.47(m,2h,ch2)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)166.45,149.00(2c),145.66,141.89,137.53,135.06,133.67,131.39,129.49,129.44(2c),128.83(2c),127.14(2c),125.68,120.95(2c),64.85,33.97(2c),30.94(2c),29.81。

实施例30(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物31)

本实施例30与实施例21不同之处在于，用(4-烯丙氧基羰基)苄基三苯基溴化膦替代苄基三苯基溴化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物31，产率60％；对上述衍生物31的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.547(2h,py-h),7.93-8.06(2h),7.55(3h),7.22-7.37(m,4h),7.71(m,3h),7.00(1h),6.62-6.70(q,1h),5.98-6.07(1h)5.26-5.43(2h),4.80(2h,ch2)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)166.06,150.04(2c),144.71,141.67,137.13,136.05,132.71,132.23,131.56,129.69,129.44(2c),128.83(2c),127.27(2c),126.42,120.88(2c),118.29,33.97(2c),30.94(2c),29.81。

实施例31(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物32)

称取实施例25制备的吡啶类链状共轭体系分子衍生物26(0.293g,1mmol)，加入5ml浓度为3mol/l的氢氧化钠溶液，搅拌加热升温到60℃，tlc监测反应进度，6h后水解完全；待体系自然冷却后，向体系中滴加1mol/l的稀盐酸溶液，搅拌，随着滴加的进行有黄色固体析出。在滴定点时停止滴加，抽滤，水洗，用环己烷浸洗一遍。将产物烘干，得到中间产物4-((e)-4-((e)-2-(4-吡啶基)乙烯基)苯乙烯基苯甲酸，产率为85％；将中间产物和对甲基苯胺作为原料，dcc作为缩合剂(1.5当量)，dmap作为催化剂(1当量)，经酰基化反应，硅胶柱层析得到目标产物，吡啶类链状共轭体系分子衍生物32，产率为45％；反应式如下，对上述衍生物32的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.54(s,2h,py-h),8.17(s,1h,nh),7.76(d,j＝7.4hz,2h,ar-h),7.52(d,j＝7.4hz,2h,ar-h),7.44-7.30(m,6h),7.24(d,j＝8.8hz,3h),7.15(d,j＝7.3hz,2h,ar-h),6.97(d,j＝16.3hz,1h,ch)，6.66(d,j＝4.9hz,2h,ch＝ch),2.32(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)165.29,150.04(2c),144.68,140.77,137.28,135.27,134.17,133.69,132.76,131.33,129.27,129.55(2c),129.45(c),129.15(2c),128.95,127.22(2c),127.02(2c),126.91,126.04,120.90,120.42(2c),21.09。

实施例32(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物33)

本实施例32与实施例31不同之处在于，用对氯苯胺替代对甲基苯胺；反应结束后得黄色固体，为衍生物33，产率40％；对上述衍生物33的化学结构进行核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测，各检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.54(s,2h,py-h),8.17(s,1h,nh),7.76(d,j＝7.4hz,2h,ar-h),7.52(d,j＝7.4hz,2h,ar-h),7.44-7.30(m,6h),7.24(d,j＝8.8hz,3h),7.15(d,j＝7.3hz,2h,ar-h),6.97(d,j＝16.3hz,1h,ch),6.67(q,j＝4.9hz,2h,ch＝ch),2.32(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)165.40,150.04(2c),144.68,140.77,137.28,135.27,134.27,133.54,132.76,131.33,129.27,129.55(2c),129.45(c),129.15(2c),128.95,127.22(2c),127.02(2c),126.91,126.04,120.90,120.42(2c)。

实施例33(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物34)

本实施例33与实施例31不同之处在于，用对乙氧基苯胺替代对甲基苯胺；反应结束后得黄色固体，为衍生物34，产率49％；检测衍生物34的化学结构，其核磁共振氢谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.56(d,j＝6.1hz,2h,py-h),7.84(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.71(s,1h),7.39(d,j＝8.3hz,2h,ar-h),7.35(d,j＝4.7hz,2h,ar-h),7.30-7.13(m,8h),6.96(d,j＝16.3hz,2h,ch),6.91(d,2h),6.61(q,j＝12.2hz,2h,ch),4.04(q,j＝7.0hz,1h),1.42(t,j＝7.0hz,2h)。

实施例34(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物35)

将(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦(0.272g,1mmol)和叔丁醇钾(0.0568g，0.8mmol)溶解在二氯甲烷(15ml)中，0℃条件下搅拌30min，再加入(e)-3-(4-吡啶基)丙烯醛(0.084g,1mmol)，tlc监测反应进程，反应时间为5h。减压浓缩，二氯甲烷萃取，收集有机相，无水硫酸钠干燥，硅胶柱分离，洗脱液乙酸乙酯/石油醚按照体积比1:5，得到黄色固体，为衍生物35，产率为70％；检测衍生物35的化学结构，其核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝6.3hz,2h,pyridine-h),7.77-7.66(m,1h,ar-h),7.62-7.48(m,2h,ch＝ch,ar-h),7.39-7.29(m,4h,pyridine-h,ar-h),7.17(ddd,j＝15.6,11.0,0.9hz,1h,ch＝ch),6.82(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch),6.74(dt,j＝15.6,0.9hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.09,150.55-149.19,143.42,142.18,138.20,135.29,131.37,125.58,124.68,121.01,120.05,119.80,110.37,29.68。

实施例35(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物36)

本实施例35与实施例34不同之处在于，用(5-甲基苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物36，产率69％；检测衍生物36的化学结构，其核磁共振氢谱及核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.54(ddd,j＝15.6,11.1,0.9hz,1h,ch＝ch),7.51-7.48(m,1h,ar-h),7.39(d,j＝8.3hz,1h,ar-h),7.34(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.21-7.13(m,2h,ar-h,ch＝ch),6.81(d,j＝15.7hz,h,ch＝ch),6.72(dt,j＝15.6,0.8hz,1h,ch＝ch),2.48(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.20,150.31,137.87,135.08,134.56,131.46,126.76,121.00,119.96,109.73,21.48。

实施例36(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物37)

本实施例36与实施例34不同之处在于，用(5-溴苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物37，产率70％；检测衍生物37的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.78-7.66(m,1h,ar-h),7.60-7.49(m,2h,ch＝ch,ar-h),7.41-7.27(m,3h,pyridine-h,ar-h),7.17(ddd,j＝15.6,11.0,0.9hz,1h,ch＝ch),6.82(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch),6.74(dt,j＝15.6,0.9hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ163.20,150.28,149.45,143.78,143.33,139.10,135.92,131.18,128.51,122.95,121.07,119.27,117.43,111.58。

实施例37(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物38)

本实施例37与实施例34不同之处在于，用(6-氟苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物38，产率58％；检测衍生物38的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.62(d,j＝6.3hz,2h,pyridine-h),7.65(dd,j＝8.8,4.9hz,1h,ar-h),7.54(ddd,j＝15.6,11.0,0.9hz,1h,ch＝ch),7.37(d,j＝6.3hz,2h,pyridine-h),7.27-7.23(m,1h,ar-h),7.18(ddd,j＝15.6,11.0,0.9hz,1h,ch＝ch),7.10(ddd,j＝9.7,8.7,2.4hz,1h,ar-h),6.84(d,j＝15.6hz,1h,ch＝ch),6.72(dt,j＝15.6,0.8hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.76(d,j＝3.7hz),162.18,159.74,150.34,143.37,138.52,138.25,135.49,131.26,121.02,120.33,119.41,112.83,112.59,98.61,98.33。

实施例38(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物39)

本实施例38与实施例34不同之处在于，用(6-氯苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物39，产率58％；检测衍生物39的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(d,j＝6.1hz,2h,pyridine-h),7.61(d,j＝8.4hz,1h,ar-h),7.58-7.50(m,2h,ar-h,ch＝ch),7.36-7.30(m,3h,pyridine-h,ar-h),7.16(ddd,j＝15.6,11.0,0.9hz,1h,ch＝ch),6.83(d,j＝15.7hz,1h,ch＝ch),6.70(m,j＝15.7,0.8hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.76,150.64,150.37,143.30,140.98,138.79,135.80,131.18,125.42,121.03,120.48,119.27,111.02。

实施例39(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物40)

本实施例39与实施例34不同之处在于，用(5-硝基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物40，产率58％；检测衍生物40的化学结构，其核磁共振氢谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.35(s,1h,nh),8.58(d,j＝6.1hz,1h,pyridine-h),8.43(d,j＝2.3hz,2h,ar-h),8.11(dd,j＝8.9,2.3hz,1h,ar-h),7.72(d,j＝8.9hz,1h,ar-h),7.66-7.49(m,4h,pyridine-h,ch＝ch),7.07-6.80(m,2h,ch＝ch)。

实施例40(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物41)

本实施例40与实施例34不同之处在于，用(5-硝基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物41，产率59％；检测衍生物41的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(ddd,j＝4.9,1.9,0.9hz,1h,pyridine-h),7.74-7.69(m,1h,ar-h),7.67(td,j＝7.7,1.8hz,1h,pyridine-h),7.64-7.51(m,2h,ch＝ch),7.51-7.49(m,1h,ar-h),7.37-7.31(m,3h,ar-h,pyridine-h),7.18(ddd,j＝7.7,4.8,1.2hz,1h,pyridine-h),6.94(d,j＝14.6hz,1h,ch＝ch),6.75(d,j＝14.8hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.48,154.53,150.44,149.92,142.24,138.77,137.21,136.60,131.05,125.36,124.56,122.93,119.93,119.37,110.33。

实施例41(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物42)

本实施例41与实施例34不同之处在于，用(5-甲基苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物42，产率65％；检测衍生物42的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(ddd,j＝4.9,1.9,0.9hz,1h,pyridine-h),7.69(td,j＝7.7,1.8hz,1h,pyridine-h),7.62-7.50(m,2h,ch＝ch),7.48(dq,j＝2.5,1.6,1.2hz,1h,ar-h),7.38(m,j＝8.3hz,2h,ar-h,pyridine-h),7.19(ddd,j＝7.5,4.8,1.2hz,1h,pyridine-h),7.14(dd,j＝8.4,2.1hz,1h,ar-h),6.95(d,j＝14.6hz,1h,ch＝ch),6.74(d,j＝15.0hz,1h,ch＝ch),2.46(s,3h,ch3)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ162.57,154.58,149.90,148.69,142.45,138.42,136.98,136.59,134.40,131.13,126.52,122.89,119.82,119.56,109.68,21.48。

实施例42(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物43)

本实施例42与实施例34不同之处在于，用(5-溴苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物43，产率70％；检测衍生物43的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.63-8.60(m,1h,pyridine-h),7.82(d,j＝1.9hz,1h,ar-h),7.67(td,j＝7.7,1.8hz,1h,pyridine-h),7.59(dd,j＝15.1,11.4hz,1h,ch＝ch),7.50(dd,j＝14.8,11.4hz,1h,ch＝ch),7.43(dd,j＝8.6,1.9hz,1h,ar-h),7.37(d,j＝6.0hz,1h,ar-h),7.35(d,j＝5.3hz,1h,pyridine-h),7.19(ddd,j＝7.5,4.8,1.2hz,1h,pyridine-h),6.95(d,j＝14.8hz,1h,ch＝ch),6.71(d,j＝15.0hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ163.61,154.38,149.96,149.46,143.87,139.71,137.82,136.66,130.84,128.28,123.13,123.03,122.83,118.81,117.31,111.52。

实施例43(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物44)

本实施例43与实施例34不同之处在于，用(6-氟苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物44，产率68％；检测衍生物44的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(ddd,j＝4.8,1.9,0.9hz,1h,pyridine-h),7.67(td,j＝7.7,1.8hz,1h,pyridine-h),7.62(dd,j＝8.8,4.9hz,1h,ar-h),7.60-7.45(m,2h,ch＝ch),7.35(dt,j＝7.9,1.1hz,1h,pyridine-h),7.23(dd,j＝7.9,2.4hz,1h,ar-h),7.18(ddd,j＝7.5,4.8,1.3hz,1h,pyridine-h),7.07(ddd,j＝9.7,8.7,2.4hz,1h,ar-h),6.94(d,j＝14.7hz,1h,ch＝ch),6.70(d,j＝14.9hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ163.16,162.07,159.63,154.47,150.45,149.94,138.83,137.35,136.63,130.95,122.99,120.16,118.98,112.67,112.42,98.57,98.29。

实施例44(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物45)

本实施例44与实施例34不同之处在于，用(6-氯苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物45，产率66％；检测衍生物45的化学结构，其核磁共振氢谱和核磁共振碳谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(dd,j＝4.8,2.3hz,1h,pyridine-h),7.68(td,j＝7.7,1.9hz,1h,pyridine-h)),7.63-7.55(m,2h,ar-h,ch＝ch),7.54-7.46(m,2h,ar-h,ch＝ch),7.36(d,j＝7.8hz,1h,pyridine-h),7.30(dd,j＝8.5,2.0hz,1h,ar-h),7.19(ddd,j＝7.7,4.8,1.3hz,1h,pyridine-h),6.96(d,j＝14.4hz,1h,ch＝ch),6.71(d,j＝14.7hz,1h,ch＝ch)；

¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ163.14,154.40,150.62,149.95,141.04,139.36,137.64,136.62,130.87,125.27,123.04,120.34,118.82,110.96。

实施例45(制备吡啶类链状共轭体系分子衍生物46)

本实施例45与实施例34不同之处在于，用(5-硝基-1h-苯并[d]咪唑-2-基)甲基三苯基氯化膦替代(苯并[d]恶唑-2-基)甲基三苯基氯化膦；反应结束后得黄色固体，为衍生物46，产率65％；检测衍生物46的化学结构，其核磁共振氢谱检测数据如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ13.32(s,1h,nh),8.60(d,j＝3.9hz,1h,pyridine-h),8.42(m,1h,ar-h),8.15-8.07(m,1h,ar-h),7.82(td,j＝7.7,1.9hz,1h,pyridine-h),7.73-7.65(m,1h,ar-h),7.66-7.54(m,3h,pyridine-h,ch＝ch),7.29(dd,j＝4.8,1.1hz,1h,pyridine-h),7.04(d,j＝14.0hz,1h,ch＝ch),6.95(d,j＝14.4hz,1h,ch＝ch)。

下述实施例46-47是用于评价实施例1-45制备的衍生物1～46的生物活性。

实施例46(吡啶类链状共轭体系分子衍生物对pc12细胞的保护作用评价实验)

1.配制培养用液

(1)配制试剂：鱼藤酮(rotenone,rot)，α-突触核蛋白(α-syn)用dmso配制，储存浓度分别为10mm和20mm；

(2)培养基配制：按照rpmi-1640培养基说明书方法配制，调整ph为7.2至7.4，使用0.22μm滤膜过滤后放置在冰箱内保存待用；

(3)磷酸盐缓冲液：按照磷酸盐缓冲液的标准配制方法配制，调整ph为7.2至7.4，高压灭菌后放置冰箱内保存待用；

(4)胰酶消化液：按说明书方法配制，使用0.22μm滤膜过滤灭菌，放置冰箱保存待用；

(5)完全培养基的配制：取配制好的rpmi-1640培养基，在其中加入终浓度10％的马血清和5％的胎牛血清，即为完全培养基；

(6)mtt溶液：按照说明书配制mtt溶液，超声完全溶解后，使用0.22μm滤膜过滤灭菌，放置冰箱内保存待用。

2.细胞培养

pc12细胞在rpmi-1640完全培养基中培养，培养环境为37℃，5％co2，饱和湿度且无菌的培养箱内；细胞呈对数生长时进行细胞传代，细胞融合度达到80-90％时可用于实验；传代时用0.05％胰酶消化；细胞种板前多孔板使用配制好的多聚赖氨酸包被液包被以增强细胞贴壁能力；细胞接种96孔板，每孔内接种密度为1×10⁵个/ml细胞悬液0.1ml。

3.制备鱼藤酮损伤模型

待培养板内细胞融合度达到80％-90％时即可开始实验，取出培养基，加入含有鱼藤酮4μm的完全培养基，24h后取出含有鱼藤酮的培养基，加入含各类化合物(10^-5m)的完全培养基，24h后进行细胞存活率的测定；其中，对照组在实验开始及24h时均更换为含有相应浓度的dmso的完全培养基。而损伤组在开始时更换为含有鱼藤酮4μm的完全培养基，24h后更换含有相应浓度dmso的完全培养基。

4.mtt法测定细胞存活率

细胞接受处理后，在培养液中加入10μlmtt溶液，于37℃的培养箱内孵育4h后，可以看到培养板底部有蓝紫色结晶甲瓒，小心去除上清液，加入100μl的dmso，并在振荡器上稍微震荡以溶解甲瓒，完全溶解后置于酶标仪内，于570nm波长条件下检测其od值，并计算其细胞存活率；

存活率(％)＝(处理组od值-本底)/(空白组od值-本底)×100％。

5.实验结果：吡啶类链状共轭体系分子衍生物对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤抑制作用如图5、图6、和图7。(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)

6.实验结果表明：实施例1-4制备所得吡啶类链状共轭体系分子衍生物1～46，经活性评价实验，结果显示部分化合物对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤有较明显保护作用，具有统计学意义，其中化合物4、14、21、25效果最佳，可能进一步开发成为用于治疗帕金森病药物。

实施例47(吡啶类链状共轭体系分子衍生物对α-syn的寡聚及纤维化抑制能力评价)

1.硫黄素t(tht)荧光检测—评价化合物对α-syn的寡聚及纤维化的抑制能力

实验方法

(1)样品制备：取α-syn冻干粉用50mmpbs(100mmnacl，0.5mmsds，ph7.4)溶解分装至避光离心管，分别加入待测化合物，使最终孵育体系中α-syn浓度为150μm，待测化合物浓度为150μm，二者浓度比为1:1；37℃恒温孵育6天，在每个设定时间点取样4μl，-20℃保存；配制20μmtht溶液；

(2)荧光强度曲线绘制：向4μl冻存的孵育α-syn样品中加入300μltht溶液，荧光分光光度计检测荧光强度。激发光450nm、发射光482nm、光栅5nm，扫描20s取平均值；减去pbs背景得到绝对荧光强度；设定未给药对照组荧光强度为1，得相对荧光强度。用origin软件绘制聚集曲线，并进行动力学曲线拟合(拟合公式：y＝a2+(a1-a2)/[1+(x/x0)^p])；相对荧光强度的降低百分率与化合物对α-syn聚集抑制活性正相关；

2.实验结果：吡啶类链状共轭体系分子衍生物1～46中部分化合物对α-syn的寡聚及纤维化有抑制聚集的作用，其中化合物4、14、21、25的效果较为显著，经计算四个化合物的ic50值分别为1.85μm、2.05μm、3.49μm和1.71μm，如图8所示；

3.实验结果表明：吡啶类链状共轭体系分子衍生物1～46经tht荧光检测实验，结果显示化合物4、14、21、25对α-syn蛋白的寡聚及纤维化有较好的抑制聚集作用，具有统计学意义，可能进一步开发成为用于治疗帕金森病的药物。

结论：通过实施例1-45三种方法制备得到吡啶类链状共轭体系分子衍生物46个，经细胞活性评价实验，发现大部分化合物对鱼藤酮诱导的pc12细胞损伤有较明显的保护作用；tht荧光检测实验，发现部分化合物对α-syn的聚集和纤维化有明显的抑制作用，并具有统计学意义，可能进一步开发成为用于治疗帕金森的药物。

本发明设计合成的上述衍生物一般具有以下特征：a、基于血脑屏障的通过性，一般分子量在600以下，极性(logp)适当，易被大脑神经细胞吸收；b、分子内含有较长的共轭体系，包含参与共轭的杂原子，具有强的电子离域效应，高效的氧化还原性能及氢键结合能力；这些特征可以加强分子与α-syn聚集结构中β-折叠片的动态结合，阻止α-syn高聚物的形成，甚至可使聚集体逆转，恢复单体α-syn的功能；同时，这些小分子也可能作用于星形胶质细胞、线粒体或通过抗氧化作用保护或修复线粒体的功能。

本发明实施例中未尽之处，本领域技术人员均可从现有技术中选用。

以上公开的仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以上述权利要求的保护范围为准。