微流控芯片及其应用

文档序号:33329343发布日期:2023-03-04 00:06阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种微流控芯片,其特征在于,包括核酸提取区域、核酸扩增区域和crispr反应区域,每个区域之间通过微流道连通;所述核酸提取区域包括样品和磁珠混合液进液口、第一漂洗液进液口、第二漂洗液进液口、进样口和核酸提取室,所述样品和磁珠混合液进液口、所述第一漂洗液进液口、所述第二漂洗液进液口、所述进样口分别通过所述微流道与所述核酸提取室的一端连接;所述核酸扩增区域包括扩增液进液口和第一蛇形微流道;所述扩增液进液口与所述核酸提取室的一端经所述微流道连接,所述核酸提取室的另一端经所述微流道与所述第一蛇形微流道的一端连接,所述第一蛇形微流道用于进行恒温核酸扩增;所述crispr反应区域包括crispr反应试剂存储腔和通气口,所述crispr反应试剂存储腔经所述微流道分别与所述第一蛇形微流道的另一端、所述通气口连接。2.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述核酸提取区域还包括分散区和第二蛇形微流道,所述分散区的一端经所述微流道与所述样品和磁珠混合液进液口连接,所述分散区的另一端经所述第二蛇形微流道与所述核酸提取室连接;优选地,所述分散区中包括微三棱柱结构,用于将所述样品和磁珠混合液中的磁珠分散。3.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述crispr反应区域还包括进液口,所述进液口经所述微流道与所述crispr反应试剂存储腔连接,用于通入crispr反应试剂,以存储在所述crispr反应试剂存储腔中;优选地,所述crispr反应试剂包括crispr/cas蛋白、crrna和单链核酸探针。4.根据权利要求3所述的微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片是由上芯片和下芯片键合得到的;所述上芯片包括所述样品和磁珠混合液进液口、所述核酸提取室、所述第一蛇形微流道、所述crispr反应试剂存储腔和所述通气口;优选地,所述上芯片的高度为0.2~0.3mm;所述下芯片包括所述第一漂洗液进液口、所述第二漂洗液进液口、所述进样口、所述扩增液进液口;优选地,所述下芯片的高度为0.2~0.3mm;优选地,所述微流控芯片的高度为0.4~0.6mm。5.根据权利要求4所述的微流控芯片,其特征在于,所述上芯片的外侧设置有磁铁单元,所述磁铁单元对应所述核酸提取室,用于吸附磁珠。6.根据权利要求4所述的微流控芯片,其特征在于,所述微流控芯片还包括第一废液出口和第二废液出口;所述第一废液出口位于所述上芯片,所述第一废液出口经所述微流道与所述核酸提取室的第三端连接;优选地,所述下芯片还包括与所述第一废液出口对应的微孔,用于与所述第一废液出口搭接;所述第二废液出口位于所述下芯片,所述第二废液出口与所述微流道连通。7.根据权利要求4所述的微流控芯片,其特征在于,所述下芯片还包括与所述样品和磁珠混合液进液口、所述crispr反应试剂存储腔、所述进液口和所述通气口对应的微孔,用于与所述样品和磁珠混合液进液口、所述crispr反应试剂存储腔、所述进液口和所述通气口搭接。8.使用权利要求1~7任一项所述的微流控芯片进行核酸检测的方法,其特征在于,包
括以下步骤:s1:将样品和磁珠混合液经样品和磁珠混合液进液口通入到核酸提取室,进行核酸提取,使提取的核酸吸附在磁珠上;s2:依次将第一漂洗液和第二漂洗液经第一漂洗液进液口和第二漂洗液进液口通入到所述核酸提取室,对吸附核酸的磁珠进行漂洗;s3:依次将空气和水经进样口通入到所述核酸提取室,洗脱核酸;s4:将扩增液经扩增液进液口通入到第一蛇形微流道,对所述核酸进行恒温扩增,得扩增反应液;s5:所述扩增反应液进入crispr反应试剂存储腔,进行crispr反应,反应结束后对反应结果进行检测。9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述扩增液为rpa扩增液、raa扩增液中的任一种。10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤s5反应结束后,通过荧光检测仪或肉眼观察检测荧光信号,以判断所述反应结果。

技术总结
本发明属于生物芯片领域,公开了微流控芯片及其应用。本发明的微流控芯片包括核酸提取区域、核酸扩增区域和CRISPR反应区域,每个区域之间通过微流道连通;核酸提取区域包括样品和磁珠混合液进液口、第一漂洗液进液口、第二漂洗液进液口、进样口和核酸提取室;核酸扩增区域包括扩增液进液口和第一蛇形微流道,用于进行恒温核酸扩增;CRISPR反应区域包括CRISPR反应试剂存储腔和通气口。上述微流控芯片结构简单,集成度高,使用其进行核酸检测,无需专业技术人员操作,即可实现对核酸的高灵敏度、快速、特异性的一体化检测,检测成本低,可满足在社区门诊、乡镇医院推广使用的需求。社区门诊、乡镇医院推广使用的需求。社区门诊、乡镇医院推广使用的需求。


技术研发人员:麻晓鹏 沈杰男 谢中建 陈挚 杨慧
受保护的技术使用者:中国科学院深圳先进技术研究院
技术研发日:2022.11.29
技术公布日:2023/3/3
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