一株能够处理高盐度有机化工废水的热带假丝酵母及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物应用技术领域，涉及一株能够处理高盐度有机化工废水的兼性 好氧耐盐真菌及其应用。
【背景技术】
[0002] 高盐度有机废水是指总含盐量（以NaCl含量计）至少为10%。的废水，其不仅含 重金属、有机物等多种物质，还含有大量cr、SO 42' Na+、Ca2+等溶解性无机盐离子。高盐度 有机废水处理难度大，主要难点在于其排放的废水中既含大量的盐分又含高浓度有机污染 物，对环境造成极大危害。因此，在水资源日渐短缺的今天，探索行之有效的高盐度有机废 水处理技术已经成为废水处理研宄的热点领域之一。
[0003] 目前高盐度有机废水的治理工艺技术较多，如物理法、化学法、生物法等，但这些 方法各有其不足之处。如，常用的物理化学方法包括焚烧法、深度氧化法、离子交换法、电化 学法和膜分离法等，这些方法有其可行的一面，但是均操作繁琐且费用高，可能导致二次污 染，处理效果也不如生物法明显。因此，生物法越来越受到青睐。
[0004] 目前，生物法的研宄热点主要集中于两个方面，其一为对耐盐菌进行富集和驯化， 利用其降解作用；另一为对不同生物处理工艺进行深入研宄。生物方法因操作条件温和、经 济、高效而被广泛用于高盐度废水的处理。但是，尽管传统生物法在处理低盐度有机废水时 效果明显，但当盐度超过35%。时，微生物的生长会受到一定程度的抑制，甚至死亡。因此，深 入研宄在高盐度环境中能有效降解污染物的嗜盐微生物的作用条件很有必要。
[0005] 随生产过程不同。高盐度有机废水中有机物的组成成分在种类和理化性质方面 也迥然不同，但盐成分多为无机盐。虽然这些无机盐离子都是菌种的必要生长条件，起着 酶促、调节渗透压、保持膜内外平衡的作用，但当盐浓度过高时，又会使菌种代谢失衡，主要 表现为：当高盐度有机废水盐浓度高时，会导致溶液的渗透压升高，从而使得微生物细胞发 生原生质分离；由于盐析的作用使微生物细胞内脱氢酶活性降低，所以其生长力受到抑制； 高盐度有机废水中高量的氯离子过高对微生物细胞有毒害作用；盐浓度高，废水的密度增 加，微生物随着生长基质的上浮流失而上浮，从而严重影响生物处理系统的净化效果。目 前，人们对高盐度有机废水生物法处理做了大量研宄，然而，国内外关于生物法降解高盐度 有机物的研宄报道却不多，尤其是在深入研宄其降解菌及其降解酶的性质及其应用于生物 强化修复方面还处于起步阶段。
[0006] 研宄高盐度有机废水的降解菌及其降解性质的前提是获得纯的优势降解菌株，这 是本领域目前有待解决的关键问题。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一株优势处理高盐度有机化工废水的真菌及其应用。
[0008] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。
[0009] -方面，本发明提供一株能够处理高盐度有机化工废水的热带假丝酵母（Candida tropicalis)NYZJ6-14,其已于2014年9月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心（简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研 宄所），保藏编号为CGMCC No. 9682。
[0010] 所述热带假丝酵母NYZJ6-14由江苏省盐城市城东污水自来水厂回流池中的活性 污泥中分离得到，具有如下生物学特征：菌落为圆形，不透明，边缘光滑，表面光滑，在培养 基正面颜色纯白，反面颜色粉红；革兰氏阳性，V. P试验阴性，甲基红试验阳性，不能水解淀 粉。
[0011] 所述热带假丝酵母NYZJ6-14的ITS区序列（SEQ ID N0:1)如下：
[0012] SEQ ID NO: 1
[0013] CGAAGATTTGGTAGTCTTCCTGATTTGAGGTCAAGTTATGAAATAAATTGTGGTGGCCACTAGCAAAAT AAGCGTTTTGGATAAACCTAAGTCGCTTAAAATAAGTTTCCACGTTAAATTCTTTCAAACAAACCTAGCGTATTGCT CAACACCAAACCCGGGGGTTTGAGGGAGAAATGACGCTCAAACAGGCATGCCCTTTGGAATACCAAAGGGCGCAATG TGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACGAATATCTGCAATTCATATTACGTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGAT GCGAGAACCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTTTGACTATTGTAATAATAAATCAAGTTTGACTGTAAATAAAAAGTT TGGTTTAGTTATAACCTCTGGCGGTAGGATTGCTCCCGCCACCAAAGAAATTTGTTCAATAAAAAACACATGTGGTG CAATAAGCCAATCAAGAAATCCC
[0014] 实验证明，所述热带假丝酵母NYZJ6-14能优势处理高盐度有机化工废水。
[0015] 因此，另一方面，本发明提供所述热带假丝酵母NYZJ6-14在处理有机化工废水、 特别是高盐度有机化工废水中的用途。
[0016] 其中，所述处理有机化工废水包括，将所述热带假丝酵母NYZJ6-14接种于有机化 工废水中进行培养。
[0017] 优选地，所述有机化工废水的盐度为0?68%。，优选为0?34%。，更优选为3? 34%。，进一步优选14?34%。。本发明中有机化工废水的盐度以％。表示，用手持式盐度计测 得。
[0018] 优选地，所述有机化工废水的0?&为I. 0 X 10 3?2. 5 X 10 4mg/L，优选为 L 5 X IO3?L 3 X 10 4mg/L，更优选为 2. 5 X IO3?L 3 X 10 4mg/L，进一步优选 5 X IO3? I. 3X104mg/L〇
[0019] 所述有机化工废水的pH为2. 0?7. 6,优选为2. 0?7. 0,进一步优选2. 7?4. 0。
[0020] 优选地，所述热带假丝酵母NYZJ6-14的接种量为I. OX IO7?6. OX 10 7个菌株/ ml所述有机化工废水，优选为2. 0 X IO7?5. 0 X 10 7个菌株/ml所述有机化工废水，更优选 为3. OX IO7?4. OX 10 7个菌株/ml所述有机化工废水。
[0021] 在废水中培养菌株使其发挥作用时，本发明菌株的培养条件为25?30°C，140? 160r/min，作为培养液的有机化工废水的瓶装量为30?40% (V/V)。
[0022] 根据本发明的【具体实施方式】，将热带假丝酵母NYZJ6-14以3. 48X IO7菌株/ml 的接种量接种于有机化工废水中，在28°C中振荡培养，所述有机化工废水的盐度达14? 34%。，0?&为5X10 3?L 3X10 4mg/L，pH为2. 7?4.0。培养4天后，测得实现了 42? 56%的0?&降解率。
[0023] 因此又一方面，本发明提供一种处理有机化工废水的方法，所述方法包括，将所述 热带假丝酵母NYZJ6-14接种于有机化工废水中进行培养。
[0024] 优选地，所述有机化工废水的盐度为0?68%。，优选为0?34%。，更优选为3? 34%。，进一步优选14?34%〇。
[0025] 优选地，所述有机化工废水的0?&为I. 0 X 10 3?2. 5 X 10 4mg/L，优选为 L 5 X IO3?L 3 X 10 4mg/L，更优选为 2. 5 X IO3?L 3 X 10 4mg/L，进一步优选 5 X IO3? 1. 3X104mg/L〇
[0026] 优选地，所述有机化工废水的pH为2. 0?7. 6,优选为2. 0?7. 0,进一步优选 2. 7 ?4. 0〇
[0027] 优选地，所述热带假丝酵母NYZJ6-14的接种量为I. OX IO7?6. OX 107个菌株/ml 所述有机化工废水，优选为2. 0 X IO7?5. 0 X 10 7个菌株/ml所述有机化工废水，更优选为 3. 0 X IO7?4. 0 X 10 7个菌株/ml所述有机化工废水；培养条件为25?30°C，140?160r/ min，作为培养液的机化工废水的瓶装量为30?40% (V/V)。
[0028] 再一方面，本发明提供所述热带假丝酵母NYZJ6-14在制备用于处理有机化工废 水的生物降解剂中的用途。
[0029] 还一方面，本发明提供所述热带假丝酵母NYZJ6-14在构建处理有机化工废水的 工程菌中的用途。
[0030] 本发明获得了一株能在高盐度有机化工废水中生存并有良好COD&降解能力的真 菌。对于高盐度有机化工废水原水（盐度为68%。，0? &为2. 5X 10 4mg/L，pH为2. 4)，实验 证明，本发明提供的热带假丝酵母NYZJ6-14能在未经稀释以及稀释1倍、4倍、9倍和14倍 的该废水中生长，且能显著降低COD &，由此表明该菌株可以耐受从2?68%。的低盐度到高 盐度变化，并能在此盐度下表现出优良的〇?&降解活性和生长活性。
[0031] 并且，对于稀释4倍的该高盐度有机化工废水，热带假丝酵母NYZJ6-14在好氧条 件下的COD &降解率和含菌量均为最高，分别为55. 9%和5. 4X 10 8个菌株/ml ;在厌氧条件 下，CODJ#解率和含菌量分别为49. 3%和4. 7X 10 8个菌株/ml。这说明，在高盐度条件以 及厌氧或好氧任一条件下，热带假丝酵母NYZJ6-14均表现出了优良的COD &降解活性。
[0032] 因此，作为优势处理高盐度有机化工废水的兼性好氧耐盐真菌，热带假丝酵母 NYZJ6-14可以耐受大范围的盐度，同时在厌氧和好氧条件下均能实现显著的COD&降解作 用