微生物培养器、微生物检验试剂盒、透析液的检验方法、微生物的培养方法、微生物的检验 ...的制作方法
【技术领域】
[0001] 本申请揭示一种微生物培养器、微生物检验试剂盒、透析液的检验方法、微生物的 培养方法、微生物的检验方法、及微生物培养器的制造方法。
【背景技术】
[0002] 微生物的培养是使用各种培养基而进行。培养基例如有以前以来通常使用的液体 培养基或琼脂培养基。液体培养基虽然没有试样量的限制，但存在无定量性、体积大的缺 点。另外，关于琼脂培养基，当采用通常使用的直径90mm的培养皿时，试样液量的上限通常 为至多lmL，超过lmL的试样液难以进行检验。因此，检验微生物浓度相对较低的试样时，为 了以lmL左右的试样液进行检验，先对原试样进行增菌培养后再供于检验。
[0003] 例如，对于沙门菌（salmonella)等食物中毒菌的检验，要求lcfu/25g的敏感度。 另外，近年来，对于例如透析用水（透析水）等医疗系的水的检验，不仅要检验放热性物质， 也推荐检验微生物。然而，由于此种试样的微生物浓度很低，故而有时检验需要大量试样。 例如，对于透析水，有时要求可检测出试样lmL中微生物小于一个的高敏感度，若可对超过 lmL的例如10mL~100mL的试样液直接、定量性地进行微生物检验，则较简便，故而理想。
[0004] 对于此种大量试样的检验，若使用更大的容器，则也可进行超过lmL的试样的检 验，但占用空间而不实用。因此，例如若以大面积使用如专利文献1中提出的片状培养基， 则也可进行超过lmL的试样的定量检验，但变得需要大于培养基部分的衬纸与覆盖膜，因 此会损害省空间性，若成为大面积，则覆盖部的开闭、试样的扩散也需要时间。另外，在为薄 膜过滤(membrane filter,MF)法的情况下，需要专用的过滤器支架或歧管、或者抽吸泵类， 在检验透析液时必须制成专用的培养基等，作业步骤多而繁杂。另外，在为无需琼脂培养基 的简易MF法的情况下，必须添加液体培养基，不易进行菌数的测定，另外，将试样装入装置 时，细菌或病毒容易附着在手等上。另外，在显色反应法（SensiMedia法）的情况下，由于 为液体培养基，因此无定量性，另外，在检测原理上，当存在不具有呼吸活性的菌的情况下 无法进行正确的检测。
[0005] 因此，近年来提出有一种在袋状容器中收纳有片状培养基的微生物培养器，其省 空间，且可简便地实现超过lmL的相对大量试样的微生物定量检验（例如参照专利文献2)。
[0006][现有技术文献]
[0007][专利文献]
[0008][专利文献1]国际公开第01/44437号手册
[0009][专利文献2]日本专利特开2007-124985号公报 [0010][专利文献3]日本专利特开平7-75545号公报
[0011] [专利文献4]日本专利特开平8-112088号公报
[0012][专利文献5]日本专利特开平11-137241号公报
【发明内容】
[0013] 发明所要解决的问题
[0014] 在袋状容器收纳有片状培养基的微生物培养器例如可通过打开袋状容器的开口 部分的拉链（zipper)而使其成为开口状态，并置于灭菌气体的氛围（atmosphere)中，而成 为灭菌过的微生物培养器。但是，利用此种方式进行灭菌处理的微生物培养器有在灭菌处 理后至关闭开口部分为止的期间，微生物等异物通过开口部分侵入容器内部的问题。另外， 使用拉链类作为开口部分的开闭物的袋状容器由于密闭性较低，故而即便为关闭开口部分 的状态也有异物类侵入的问题，另外，例如难以大量地装入透析液之类的原本细菌数较少 的试样以检测细菌。
[0015] 因此，本申请的目的在于提供一种可抑制侵入的异物的存在且装入大量试样的微 生物培养器、微生物检验试剂盒、透析液的检验方法、微生物的培养方法、微生物的检验方 法、及微生物培养器的制造方法。
[0016] 解决问题的技术手段
[0017] 为了解决上述课题，本发明分开设置用以将试样装入培养袋的注入口与用以将培 养基装入内部的开封部分（unsealing portion)。
[0018]详细而言，本发明是一种微生物培养器，包括将片状培养基装入内部并进行密封 的附注入口的培养袋。若为此种微生物培养器，则将试样装入培养袋内时，是通过与可取放 培养基的开封部分相比异物难以通过的注入口装入，因此会抑制侵入的异物的存在。另外， 由于容器的密闭性好，难以漏出，故而也可装入大量试样。
[0019] 此外，培养部的注入口只要可在注入试样后成为密封状态，则可为任何注入口，例 如可应用喷口（spout)、螺旋盖（screw cap)、压入盖、皇冠盖（crown cap)、橡胶塞（rubber plug)、氨甲酸乙酯塞（urethane plug)、娃塞（silicon plug)、软木塞（cork)、金属制盖 (molten cap)、棉塞、纸塞、三通旋塞（three-way cock)、扣件（fastener)、夹头（chuck)、拉 链（zipper)中的任一种以上。
[0020] 另外，上述微生物培养器也可具备将片状培养基装入内部并进行密封的附注入口 的培养袋、及将培养袋装入内部并进行密封的灭菌袋。若为此种微生物培养器，则培养袋的 外侧的减菌状态由减菌袋保持，因此将试样装入培养袋时，异物进入培养袋中的可能性低。
[0021] 另外，也可为：上述微生物培养器用于检测好气菌，培养袋由透氧性的原材料所形 成。若培养袋由透氧性的原材料所形成，则氧气会自培养袋的外侧被供给至内侧，因此可培 育好气菌。
[0022] 另外，也可为：上述微生物培养器用于检测厌气菌，培养袋由非透氧性的原材料所 形成。若培养袋由非透氧性的原材料所形成，则氧气不会自培养袋的外侧被供给至内侧，因 此可培育厌气菌。
[0023] 另外，也可为：微生物培养器用于检测透析液中或逆渗透水中所包含的微生物，培 养袋内的培养基具有补充透析液中或逆渗透水中所含的营养成分的规定辅助营养成分。若 培养基具有补充透析液中原本所含的营养成分程度的规定辅助营养成分，则可在不使透析 液中的微生物因营养过多而死灭的情况下在培养袋内进行培育。
[0024] 此外，培养袋内的培养基所具有的所谓规定辅助营养成分例如可为每平方米 0?lg~3.Og的蛋白胨（peptone)、0?lg~3.Og的酵母提取物（yeastextract)、0?lg~ 〇? 5g的酪蛋白（casein)分解物、Og~0? 5g的葡萄糖（glucose)、0? 075g~0? 3g的丙酮酸 钠（sodiumpyruvate)、0g~0? 3g的憐酸氢二钾（dipotassiumphosphate)、0?lg~0? 5g 的可溶性淀粉、〇? 〇lg~〇? 〇5g的硫酸镁（magnesiumsulfate)、及0? 015g~0?lg的四唑 盐（tetrazoliumsalt)或0? 15g~l.Og的吲哚酚（indoxyl)衍生物。若培养基中包含该 程度的成分，则可在培养袋内培育透析液中或逆渗透水中的微生物。
[0025] 此外，培养袋内的培养基所具有的所谓规定辅助营养成分例如也可为每平方米 0? 38g ~9. Og 的肉提取物（meat extract)或鱼肉提取物（fish extract)、0? 63g ~15. Og 的胰化蛋白胨（tryptone)、0g~3. Og的葡萄糖、Og~0?