赤藓糖醇制造方法、丛梗孢酵母变异菌株及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及包含葡萄糖母液（hydrol)和玉米浸渍液（Corn steep liquor，CSL) 或玉米浸渍液的加工物的培养基组合物、及使用该组合物由赤藓糖醇生产菌株制造赤藓糖 醇的方法。此外，本发明涉及具有赤藓糖醇生产能力的丛梗孢酵母SYC-ERY1菌株及包含其 的赤藓糖醇制造用生物催化剂组合物。
【背景技术】
[0002] 赤藓糖醇作为四碳糖醇，与低聚糖（oligosaccharide)、木糖醇（xylitol) -同是 具有代表性的功能性甜味料，并且是存在于葡萄酒或大酱等发酵食品、蘑菇及果实等植物、 哺乳动物的体液的天然物质。赤藓糖醇的甜度是糖的70~80%，其作为热量小于糖的10% (0.3Kcal/g)的低卡路里甜味料，在体内不会用作能源，并且大部分通过小便排出。溶解时 起到吸热作用而具有清凉感，溶解度低而容易产生结晶，吸湿性及寄生性低而能够应用于 所有食品。此外，由于无法被作为願齿病原菌的变异链球菌（Streptococcusmutants)利 用，因此不会产生酸或葡聚糖，从而也具有防龋性的特征。而且，与以往的糖醇类相比，即使 大量摄取，也很少诱发腹泻。由于这些性质，赤藓糖醇在要求清凉感和结晶性的糖果等中被 用作无糖原料。
[0003] 就赤藓糖醇的生产而言，具有提取法、化学合成法及发酵法。其中，就提取法而言， 由于在水果或蔬菜等自然状态下只存在极微量的赤藓糖醇，因此不具有产业经济性；就化 学合成法而言，由于原料物质价高、合成过程中产生的副产物不易去除、收率低，因此不具 经济性，无法用于大量生产。因此，大部分的赤藓糖醇是通过发酵法生产的。
[0004] 利用发酵法的赤藓糖醇的生产主要通过酵母进行，目前为止，已报道了能够生产 赤藓糖醇的酵母。其中，虽然Moniliella tomentosa var.pollinis能够以所谓41%的高 收率由葡萄糖生产赤藓糖醇，但是由于产生大量的甘油、核糖醇等，因此还未实现产业化。 虽然短梗霉属（Aureobasidium sp.)也能够生产赤藓糖醇，但生产性和耐糖性差。
[0005] 除此之外，作为利用发酵法的赤藓糖醇的制造方法，虽然存在利用Pseudozyma tsukubaensis的方法（韩国注册专利 0434518)、利用Trichosporonoidesmadida的方法 方法（韩国注册专利0210958)、利用类丝抱酵母（Trichosporonoidesmegachilensis)的 方法方法（美国公开专利2001-0008769)，但在利用Pseudozymasp.及类丝孢酵母时，安全 性有可能成为问题。就类丝孢酵母的情况而言是可以使用的，但产量及转变率低，因此产业 经济性差。
[0006]另一方面，在利用发酵的赤藓糖醇的生产中，作为主原料的葡萄糖在制造成本中 占据绝大部分。在这样的情况下，为了降低制造成本，需要提高赤藓糖醇的收率和生产性， 并且需要降低主原料的价格。这是在生产赤藓糖醇的行业中最根本的并且是当务之急的问 题。
[0007] 在这样的背景下，本发明确认到通过使用在制造葡萄糖的过程中产生的副产物即 脱水母液及制造高粱淀粉时的副产物作为基质来代替葡萄糖，能够极好地制造赤藓糖醇， 并且确认到通过使丛梗孢酵母菌株突变而提高赤藓糖醇的收率和生产性的突变菌株适于 制造赤藓糖醇，从而能够在赤藓糖醇生产中降低制造成本的同时提高赤藓糖醇生产性，由 此完成了本发明。
【发明内容】
[0008] 所要解决的课题
[0009] 提供一种制造赤藓糖醇的方法，其包括在包含葡萄糖母液和玉米浸渍液或玉米浸 渍液的加工物的培养基中培养赤藓糖醇生产菌株的步骤。
[0010] 本发明的另一目的是，提供用于生产赤藓糖醇的赤藓糖醇生产菌株培养用培养基 组合物，其包含葡萄糖母液和玉米浸渍液或玉米浸渍液的加工物。
[0011] 本发明的另一目的是，提供具有赤藓糖醇生产能力的丛梗孢酵母SYC-ERY1菌株 (保藏号KCTC18261P)。
[0012] 本发明的另一目的是，提供赤藓糖醇制造用生物催化剂组合物，其包含丛梗孢酵 母SYC-ERY1菌株。
[0013] 解决课题的方法
[0014] 作为用于实现上述目的的一个方式，本发明涉及一种制造赤藓糖醇的方法，其包 括在包含葡萄糖母液和玉米浸渍液或玉米浸渍液的加工物的培养基中培养赤藓糖醇生产 菌株的步骤。
[0015] 优选地，上述培养基可以以培养基内的葡萄糖浓度为5至45 (w/v)%的方式包含 葡萄糖母液。
[0016] 此外，优选地，上述葡萄糖母液可以包含700至900g/L的葡萄糖。
[0017] 此外，优选地，上述培养基可以包含0. 5至5(w/v)%的玉米浸渍液或玉米浸渍液 的加工物。
[0018] 此外，优选地，可以直接使用或浓缩使用玉米浸渍液，或者可以使用通过对玉米浸 渍液进行离心分离或沉淀而得的上清液与水以3:1~1:3的比率混合而成的玉米浸渍液的 加工物。此外，优选地，上述培养步骤可以在30~35°C的温度下实施。
[0019] 此外，优选地，上述培养步骤可以在pH 5至6下实施。
[0020] 此外，优选地，上述培养步骤可以实施3至10天。
[0021] 此外，优选地，上述培养步骤可以是分批式、补料分批式或连续式形式的培养。
[0022] 此外，优选地，在上述培养步骤中，如果培养时发酵槽内葡萄糖浓度变为50g/L以 下，则间歇性加料（feeding)葡萄糖母液。
[0023] 此外，优选地，上述加料葡萄糖母液可以使上述发酵槽内葡萄糖浓度保持为10至 100g/L〇
[0024] 此外，优选地，上述培养基可以进一步包含酵母提取物（Yeastextract)。
[0025] 此外，优选地，上述培养基可以在培养基内包含大于0且小于或等于0. 5 (w/v)% 的酵母提取物。
[0026] 此外，优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是在上述培养步骤之前进行种菌培养 (seedculture)而得的。
[0027] 此外，优选地，上述种菌培养可以在包含选自由含葡萄糖、硝酸钾（KN03)、磷酸二 氢钾（KH2P04)、硫酸锰（MnS04)及硫胺素（Thiamine)组成的组中的一种以上的培养基中进 行培养。
[0028] 此外，更优选地，上述种菌培养可以在pH5至6、温度28至32°C下培养1至3天。
[0029] 此外，优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是选自由丛梗孢酵母（Moniliella pollinis)、Moniliellatomentosavar.pollinis、Moniliellaacetoabutens、短梗霉属 (Aureobasidiumsp.)、Trichosporonoidesmadida、木兰假丝酵母（Candidamagnolia)、 圆酵母属（Torulasp.)、毕赤酵母属（Pichiasp.)和Pseudozymatsukubaensis的组中的 一种以上。
[0030] 此外，优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是丛梗孢属（Moniliellasp.)。
[0031] 此外，优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是丛梗孢酵母。
[0032] 此外，优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是丛梗孢酵母SYC-ERY1菌株。
[0033] 作为另一个方式，本发明涉及用于生产赤藓糖醇的赤藓糖醇生产菌株培养用培养 基组合物，其包含葡萄糖母液和玉米浸渍液或玉米浸渍液的加工物。
[0034] 优选地，上述赤藓糖醇生产菌株可以是丛梗孢酵母SYC-ERY1菌株。
[0035] 作为另一个方式，本发明涉及具有赤藓糖醇生产能力的丛梗孢酵母SYC-ERY1菌 株。
[0036] 作为另一个方式，本发明涉及赤藓糖醇制造用生物催化剂组合物，其包含丛梗孢 酵母SYC-ERY1菌株。
[0037] 以下，更详细说明本发明。
[0038] 在本发明的具体实施例中，培养蜂巢并筛选出生产赤藓糖醇的4种菌株，从其中 筛选出赤藓糖醇产量最优异的1种菌株（实施例1)。之后，向韩国生命工学研宄院微生物 资源中心申请鉴定，确认筛选的菌株为丛梗孢酵母菌株（实施例2)。
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