一种利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及制药工程技术领域，尤其涉及一种利用离子液体高效提取雷公藤生物 碱的方法。
【背景技术】
[0002] 雷公藤（TripterygiumwilfordiiHook.f.)为卫矛科雷公藤属植物，以根、叶、花 以及果入药，已广泛应用于治疗各种自身免疫性疾病，如肾炎、红斑狼疮、接触性皮炎和类 风湿性关节炎等自身免疫性疾病。雷公藤生物碱是雷公藤植株内产生的一类具有较高生 理活性的天然化学物，因其具有特殊的化学结构及作用机制，特别是在临床上对自身免疫 性疾病（如红斑狼疮、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎和过敏性紫癜等）有独特疗效，药理 研宄证明其具有抗炎、免疫抑制、抗肿瘤、抑制雄性生育、抗艾滋病、杀虫等作用。近几年， 人们对雷公藤生物碱的化学成分和药理作用进行了大量的研宄，已发现了 30多种结构明 确的雷公藤生物碱，如雷公藤春碱（wilfortrine)、雷公藤次碱（wilforine)、雷公藤定碱 (wilfordine)和雷公藤碱乙（wilforgine)等倍半猫大环内醋类生物碱。其中有些具有明 显的免疫抑制、抗肿瘤作用和较小的毒性，充分显示了雷公藤生物碱良好的应用前景。雷公 藤春碱、雷公藤次碱、雷公藤定碱以及雷公藤碱乙的结构式如下：
【主权项】
1. 一种利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 超声强化提取：雷公藤根、茎、叶等干燥粉碎，过40~80目筛，按固液比1:5~100 加入体积比为1:0. 1~2. 0:0. 5~2. 0的乙醇、水和咪唑类离子液体I混合液，于超声功率 密度10~200W/cm2及超声频率20~IOOkHz下，20~95°C超声提取5~90min，固液分离 得含雷公藤生物碱的提取液； 2) 有机溶剂萃取：将有机溶剂加入到所述步骤1)得到的提取液中，按提取液与有机溶 剂的体积比1~10:1萃取1~5次，分离有机相得雷公藤生物碱萃取相，萃取余液循环使 用，该萃取余液即上述咪唑类离子液体I; 3) 重结晶：将所述步骤2)中得到的萃取相经盐酸化处理以去除有机相，而水相用氢氧 化钠溶液碱化后过滤，将过滤得到的沉淀物再溶于甲醇中进行重结晶，得到雷公藤总生物 喊粗品； 4)HSCCC分离纯化：选择HSCCC溶剂系统，按体积（mL)/重量（g)比100~600:1将 HSCCC溶剂系统以及上述雷公藤总生物碱粗品加入到分液漏斗中，震荡、静置分层，平衡后， 将上、下相分开，以溶剂系统的上相为固定相，溶剂系统的下相为流动相，调整转速，以一定 流速泵入流动相，根据检测器的谱图分步收集目标物，分别获得各雷公藤生物碱溶液； 5) 真空冷冻干燥：将上述各雷公藤生物碱溶液，在适当温度、干燥压力下真空冷冻干 燥，回收有机萃取剂，分别得到纯度均大于95%的雷公藤春碱、雷公藤次碱、雷公藤定碱和 雷公藤喊乙。
2. 如权利要求1所述的利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于： 所述咪唑类离子液体I为1-乙基-3-甲基咪唑氯盐、1-乙基-3-甲基咪唑溴盐、1-丁 基-3-甲基咪唑溴盐、1-辛基-3-甲基咪唑氯盐、1-烯丙基-3-甲基咪唑氯盐中的至少一 种。
3. 如权利要求1所述的利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于：所 述步骤1)中乙醇、水和咪唑类离子液体I混合液的体积比为3:2:5。
4. 如权利要求1所述的利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于：所 述有机溶剂为丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷和四氯化碳中的至少一种。
5. 如权利要求1所述的利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于：所 述HSCCC溶剂系统为体积比为6:4:5:8:0. 05正已烷-醋酸乙酯-乙醇-水-咪唑类离子液 体II配制的HSCCC溶剂系统、体积比为2:4:2:5:0. 05甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水-咪 唑类离子液体II配制的HSCCC溶剂系统或者体积比为5:4:3:0. 05氯仿-乙醇-水-咪唑 类离子液体II配制的HSCCC溶剂系统中的任意一种。
6. 如权利要求5所述的利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，其特征在于：所 述咪唑类离子液体II为1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸 盐、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐中的至少一种。
【专利摘要】本发明涉及一种利用离子液体高效提取雷公藤生物碱的方法，该方法包括以下步骤：1)超声强化提取：提取液为体积比为1:0.1～2.0:0.5～2.0的乙醇、水和咪唑类离子液体Ⅰ混合液，超声处理功率密度为10～200W/cm2，频率为20～100kHz；2)有机溶剂萃取：采用有机溶剂萃取上述雷公藤生物碱提取液；3)重结晶：上述萃取相去除有机相后经碱化、过滤，重结晶得雷公藤总生物碱粗品；4)HSCCC分离纯化：选择HSCCC溶剂系统，以离子液体Ⅱ为流动相添加剂，经HSCCC分离纯化得各雷公藤生物碱溶液；5)真空冷冻干燥。该方法大大减少了有机溶剂的使用，显著降低了提取过程中的污染和危害，大大改善了提取效果和提取效率，并且离子液体能大大缩短HSCCC的分离时间，得到的四种雷公藤生物碱的纯度均大于95％。
【IPC分类】C07D491-18
【公开号】CN104817565
【申请号】CN201510116285
【发明人】金米聪, 陈晓红, 蔡美强
【申请人】宁波市疾病预防控制中心
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年3月17日