海胆肽口服液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物工程技术领域，具体地说是一种海胆肽口服液及其制备方法。
【背景技术】
[0002]海胆之名始载于《本草原始》，是一种在世界各地食用广泛的海洋水产。海胆的生殖腺是海胆黄，含有大量的蛋白质、氨基酸、高度不饱和脂肪酸、糖类和一些生理活性物质，不但具有很高的食用价值，还有极好的药用功能，对心血管病有较好的防治效果。中国的辽宁、山东、广东、福建和海南等地历来有吃海胆的习惯。日本、马来群岛、南美和地中海沿岸的一些国家，如法国、意大利、希腊等国家也有吃海胆的习惯，尤其是日本民众特别嗜好吃海胆。由此可见，海胆是一种营养价值很高的海产资源，具有广阔的市场空间，对它的研究具有十分重要的意义。
[0003]海胆的保鲜与储存问题是海胆产业发展的主要制约因素之一。海胆黄容易自溶，海胆捕捞出水后，放置半日至一日，就可能发软变质，失去食用价值。对海胆进行深加工，不但可以延长其保质期，还可提升其资源价值。目前，市场上的海胆深加工产品主要有海胆酱、海胆糜、酒精海胆。这些产品中海胆蛋白的主要存在形式是大分子蛋白质，不利于人体的吸收利用。如采用蛋白酶将海胆蛋白进行适度水解，生成以2-6个氨基酸组成的小肽为主要成分的海胆肽，可被人体不经消化而直接吸收。与海胆蛋白相比，海胆肽不仅具有更高的营养价值，而且还具有抗氧化、抗肿瘤、提高肌体免疫力等生理功能。本发明采用复合酶法对海胆进行适度水解制备海胆肽口服液，不仅更方便食用，而且将海胆蛋白水解成小分子活性肽，提高其营养价值与吸收利用率。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种营养价值高、吸收利用率高、口感淳厚，酸甜适中，鲜味十足的海胆肽口服液及其制备方法。
[0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种海胆肽口服液，其特征在于由新鲜海胆黄经脱脂后，采用复合酶法制备而成。
[0006]本发明所述海胆肽口服液的制备方法是以海胆黄为原料，首先采用脂肪酶进行水解，经超滤后获得海胆黄粗蛋白溶液，再采用复合蛋白酶进行适度水解，使海胆黄蛋白水解至分子量2000Da以下，再经过滤、浓缩、调配等工序，获得海胆肽口服液。
[0007]本发明所述海胆肽口服液及其制备方法的具体步骤如下:
(1)将新鲜海胆拨开，取出生殖腺，即海胆黄；
(2)将海胆黄与去离子水混合磨浆，加入脂肪酶进行酶解，超滤，收集截留液，即为海胆黄粗蛋白溶液；
(3)将海胆黄粗蛋白溶液与去离子水混合，搅匀，加热，使其适度变性，冷却后加入复合酶进行酶解；
(4)酶解结束后，将酶解液进行灭酶、过滤、浓缩得到海胆肽溶液； (5)向海胆肽溶液中加入枸杞提取液、山楂提取液、乳酸链球菌素，进行调配，获得海胆肽口服液。
[0008]本发明所述步骤(I)具体操作为:将挑选好的新鲜海胆洗净后，用剪刀撬开黑色带辐射状芒刺的软壳，用羹匙挖出壳内状似橘子瓣黄色的海胆卵，去掉内脏。
[0009]本发明所述步骤(2)的具体操作为:将海胆黄加水1:6~8混合均匀磨浆，得到海胆黄浆70?80°C加热10?15min，然后冷却至40土 1°C，加入脂肪酶进行酶解，酶解结束后，酶解液采用截断分子量为1000Da的超滤膜进行超滤，浓缩倍数为2~3倍，收集截留液，得到海胆黄粗蛋白溶液。
[0010]本发明所述脂肪酶的用量为100?200u/g海胆黄，酶解条件为pH8?10，40±1°C，时间 2 ?4ho
[0011]本发明所述步骤(3)具体操作为将海胆黄粗蛋白溶液与2~3倍体积的去离子水混合均匀，加热至90?100°C维持10?15min，冷却后至45~50°C，加入食品级菠萝蛋白酶，酶解2~3h后，加入3-3.5g/L蔗糖，充分溶解混合均匀，加入食品级生姜蛋白酶，继续酶解3~4h,
本发明所述菠萝蛋白酶的用量为5800?6200u/g海胆黄，生姜蛋白酶用量为50?100u/g海胆黄。
[0012]本发明所述步骤(4)的具体操作为:将酶解液90?100°C加热10?15min灭酶后，采用过滤或离心的方法进行固液分离，去除少量残渣，得到澄清液，澄清液采用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，透过液于70?80°C进行真空浓缩，真空度为0.06?0.08MPa，浓缩倍数为3?4倍，即为海胆肽溶液。
[0013]本发明所述步骤(5)中制备枸杞提取液具体操作为:按枸杞60~65g/kg海胆黄的用量称取枸杞，去离子水冲洗后，I: 3-4添加去离子水，浸泡2~3h，蒸煮20~30min，两层纱布粗过滤，分别收集滤液和残渣，残渣按1:2~3添加去离子水，蒸煮15~20min，两层纱布过滤后，合并两次得到的滤液，采用预铺有4?6_厚的硅藻土滤层的布氏漏斗进行抽滤，澄清透过液即为枸杞提取液。
[0014]本发明所述步骤(5)中制备山楂提取液具体操作为按山楂60~65g/kg海胆黄的用量称取山楂，去核，去离子水冲洗后，1:3~4添加去离子水，浸泡2~3h，胶体磨打浆，山楂浆蒸煮20~30min，两层纱布粗过滤，收集滤液，采用预铺有4?6mm厚的娃藻土滤层的布氏漏斗进行抽滤，澄清透过液即为山楂提取液。
[0015]本发明所述步骤(5)中乳酸链球菌素的用量为0.15-0.18g/kg海参肽口服液.本发明所述步骤(5)具体操作为:将枸杞提取液、山楂提取液以及乳酸链球菌素与海胆肽溶液混合均匀，即为海胆肽口服液。
[0016]本发明的有益效果是:
1、本发明使用复合酶制备海胆肽，所用复合酶均为植物蛋白酶，特别是生姜蛋白酶，从生姜中提取而来，生姜是药食兼用的蔬菜，资源丰富，因此使用生姜蛋白酶生产海胆肽口服液不仅经济而且保证了食品安全性；
2、本发明采用复合酶分阶段水解制备海胆肽的方式，首先采用菠萝蛋白酶进行酶解，海胆黄中的NaCl对其活性具有一定的保护作用，然后采用生姜蛋白酶继续酶解，并使用蔗糖作为其酶活激活剂，协同菠萝蛋白酶水解海胆黄蛋白，不仅提高了水解度，增加多肽和游离氨基酸含量，而且增强了海胆肽口服液的鲜味，更有利于人体对食物的消化吸收；
3、本发明将枸杞提取液和山楂提取液与海胆肽溶液进行调配，不添加任何化学物质，使海胆肽口服液口感淳厚，酸甜适中，鲜味十足。枸杞和山楂提取液中含有丰富的枸杞多糖、有机酸、苷类和黄酮类物质，其抗氧化活性大大提高了海胆肽口服液的稳定性，延长保质期，在调节免疫、保肝、抗肿瘤、抗衰老方面对海胆肽均有辅助作用。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例对本发明作进一步的说明:
以下实施例所用海胆产地为山东威海，所用食品级脂肪酶(酶活力为IXlO4 u/g)与菠萝蛋白酶(酶活力为3X 15 u/g)均购南宁东恒华道生物科技有限公司；生姜蛋白酶(酶活力为IXlO5 u/g)购自郑州康丰物科技。
[0018]实施例1
(1)将挑选好的新鲜海胆洗净后，用剪刀撬开黑色带辐射状芒刺的软壳，用羹匙挖出壳内状似橘子瓣黄色的海胆卵，去掉内脏，称取2000g，添加12?16L的去离子水，磨浆，SP为海胆黄浆，将海胆黄浆置于20L的酶解罐中，搅拌均匀，向夹套中通入蒸汽升温至70?80°C，维持10?15min，然后冷却至45±1°C，调节pH值至pH8?10 ；
(2)加入20?40g的脂肪酶(IX104u/g), 20?30rpm搅拌下于45±1°C恒温水解3?4h，其作用是将海胆黄中的油脂水解为脂肪酸和甘油，脂肪酸与碱形成皂盐，使其溶于水中，转入水相；
(3)酶解结束后，酶解液采用截断分子量为1000Da的超滤膜进行超滤，压差为0.02MP，浓缩比5，收集截留液，得到海胆黄粗蛋白溶液。
[0019](4)将收集的海胆黄粗蛋白溶液，加入6-8L去离子水后，转入20L酶解罐中，搅拌均勾，向夹套中通入蒸汽升温至90?100°C，维持10?15min，使海胆黄蛋白适度变性，易于酶解，然后冷却至45~50°C ；
(5)加入35?40g菠萝蛋白酶，20?30rpm搅拌下于45?50°C酶解2~3h;取鹿糖3-3.5g加入到酶解液中，充分溶解混合均匀后，加入I?2g生姜蛋白酶20?30rpm搅拌下于45?50 °C继续酶解3~4h ；
(6)酶解结束后，向夹套中通入蒸汽升温至90?100°C，维持10?15min，使蛋白酶变性失活，冷却至30?40°C后，将酶解液从酶解罐中放出；
(7)将放出的酶解液进行抽滤，使含少量杂质的酶解液通过预铺有4?6mm厚的娃藻土滤层，得到澄清滤液；采用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，透过液于70?80°C、真空度0.06?0.08MPa的条件下真空浓缩3?4倍，再与枸杞提取液、山楂提取液混合均匀，添加0.5-0.75g乳酸链球菌素，充分溶解后即为海胆肽口服液；
(8)所述枸杞提取液的制备:称取枸杞120~130g，去离子水冲洗后，添加0.5