比特嗪富马酸盐各 晶型对SW480细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图37。
[0303] (2)奥比特嗪富马酸盐各晶型对MGC-803细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M 至30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，MGC-803细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马 酸盐各晶型对MGC-803细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图38。
[0304] (3)奥比特嗪富马酸盐各晶型对A549细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 yM至 30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，A549细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马酸盐各 晶型对A549细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图39。
[0305] (4)奥比特嗪富马酸盐各晶型对U937细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M至 30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，U937细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马酸盐各 晶型对U937细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图40。
[0306] (5)奥比特嗪富马酸盐各晶型对Hep_G2细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M 至30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，Hep-G2细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马酸 盐各晶型对Hep-G2细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图41。
[0307] (6)奥比特嗪富马酸盐各晶型对Hela细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M至 30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，Hela细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马酸盐各 晶型对Hela细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图42。
[0308] (7)奥比特嗪富马酸盐各晶型对BT-325细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M 至30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，BT-325细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马酸 盐各晶型对BT-325细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图43。
[0309] (8)奥比特嗪富马酸盐各晶型对D341Med细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M 至30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，D341Med细胞的抑制率逐渐上升。奥比特嗪富马 酸盐各晶型对D341Med细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及图44。
[0310] (9)奥比特嗪富马酸盐各晶型对GBC-SD细胞均有明显的抑制作用，在0. 0046 y M 至30. 00 y M的浓度下，随着浓度的增加，GBC-SD细胞的存活率逐渐下降，抑制率逐渐上升。 奥比特嗪富马酸盐各晶型对GBC-SD细胞的抑制强度相近，其半数抑制浓度IC 5。值见表8及 图45。
[0311] 尽管本发明的【具体实施方式】已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根 据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保 护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。
【主权项】
1. 奥比特嗪-富马酸盐的晶型，其中，奥比特嗪-富马酸盐结构如式I所示，n值约为 1或2。2. 权利要求1的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以20角度表示的X射线粉末衍射图中， 至少包含以下位置处的峰：5. 9±0. 2,16. 8±0. 2和18. 1±0. 2。3. 权利要求2的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图中， 还包含至少一个选自以下位置处的峰：l〇. 1±〇. 2,14. 2±0. 2和22. 4±0. 2。4. 权利要求3的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以20角度表示的X射线粉末衍射图中， 还包含至少一个选自以下位置处的峰4±0. 2,20. 8±0. 2和23. 8±0. 2。5. 权利要求2~4任一项的晶型，其利用差示扫描量热法测定的熔点为 156. 27°C±3. 0°C。6. 权利要求5的晶型，其中n值约为1。7. 权利要求1的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图中， 至少包含以下位置处的峰：6. 5±0. 2,20. 0±0. 2和24. 9±0. 2。8. 权利要求7的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图中， 还包含至少一个选自以下位置处的峰：5. 3±0. 2,13. 3±0. 2和19. 5±0. 2。9. 权利要求8的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图中， 还包含至少一个选自以下位置处的峰：12. 0±0. 2,14. 8±0. 2和26. 7±0. 2。 1 〇.权利要求7~9任一项的晶型，其利用差示扫描量热法测定的熔点为 171. 45°C±3. 0°C。11. 权利要求10的晶型，其中n值为2。12. 权利要求1的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，至少包含以下位置处的峰：5. 7±0. 2,9. 5±0. 2和10. 0±0. 2。13. 权利要求11的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，还包含至少一个选自以下位置处的峰：14. 7±0. 2,19. 2±0. 2和26. 7±0. 2。14. 权利要求13的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，还包含至少一个选自以下位置处的峰：13. 3±0. 2,22. 2±0. 2和23. 6±0. 2。15. 权利要求12~14任一项的晶型，其利用差示扫描量热法测定的熔点为 156. 93°C±3. 0°C。16. 权利要求15的晶型，其中n值约为2。17. 奥比特嗪-富马酸盐水合物的晶型，其中，奥比特嗪-富马酸水合物结构如式II所 示，n值约为1，m约为1。18. 权利要求17的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，至少包含以下位置处的峰：7. 0±0. 2,17. 3±0. 2和21. 3±0. 2。19. 权利要求18的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，还包含至少一个选自以下位置处的峰：12. 9±0. 2,17. 9±0. 2和19. 7±0. 2。20. 权利要求19的晶型，其在使用Cu-Ka辐射、以2 0角度表示的X射线粉末衍射图 中，还包含至少一个选自以下位置处的峰：13. 4±0. 2,14. 7±0. 2和23. 5±0. 2。21. 权利要求17~20任一项的晶型，其具有双熔点特性。22. 权利要求21的晶型，其利用差示扫描量热法测定的两个熔点分别为 102. 18°C±3. 0°C和 153. 72°C±3. 0°C。23. 奥比特嗪-富马酸盐无定型，其中，奥比特嗪-富马酸盐结构如式I所示，n值约为 1〇24. 权利要求23的奥比特嗪-富马酸盐无定型，其利用差示扫描量热法测定的玻璃化 转变温度为51. 12°C±3. 0°C。25. 奥比特嗪-富马酸盐水合物，其中，奥比特嗪-富马酸水合物结构如式II所示，n 值约为1，m约为1。26. 权利要求2~6任一项所述的晶型的制备方法，其包含以下步骤： 奥比特嗪一富马酸盐、权利要求7~22任一项所述的晶型在溶剂中结晶，得到所述的 晶型。27. 权利要求26的制备方法，所述溶剂选自水，醇类（例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、 丁醇、异丁醇、叔丁醇、戊醇、异戊醇等）、酮类（例如丙酮、丁酮等）、烷烃或卤代烷烃（例如 正己烷、环己烷、正庚烷、二氯甲烷、氯仿等）、酯类（例如乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸叔丁 酯等）、醚类（例如异丙醚、甲基叔丁基醚、石油醚等）、四氢呋喃（THF)、1，4-二氧六环、甲 苯、乙腈、N，N-二甲基甲酰胺（DMF)、N，N-二甲基乙酰胺（DMA)、N-甲基吡咯烷酮（NMP)、二 甲亚砜（DMSO)等、或上述溶剂的组合。28. 权利要求7~11任一项所述的晶型的制备方法，其包含以下步骤： 权利要求2~6、权利要求12~16或权利要求17~22任一项所述的晶型在甲酸丁酯 中结晶，得到所述的晶型；任选地，还包含过滤、干燥的步骤。29. 权利要求28的制备方法，其中权利要求2~6任一项所述的晶型以甲酸丁酯为溶 剂，在室温结晶或在高温50~75°C，低温15~30°C重结晶得到所述的晶型。30. 权利要求12~16任一项所述的晶型的制备方法，其包含以下步骤： 权利要求2~6任一项所述的晶型在甲酸丁酯中结晶，得到所述的晶型；任选地，还包 含过滤，干燥的步骤。31. 权利要求30的制备方法，其中权利要求2~6任一项所述的晶型在40~50°C结 晶或在高温80~100°C，低温0~10°C的条件下重结晶，得到所述晶型。32. 权利要求17~22任一项所述的晶型的制备方法，其选自以下任意一项： 1) 权利要求2~6任一项所述的晶型在水、有机溶剂（例如乙酸乙酯）或有机溶剂（例 如乙醇、DMA、NMP或DMSO)与水的混合溶剂中结晶，得到所述晶型；任选地，还包括过滤或干 燥的步骤； 2) 权利要求12~16任一项所述的晶型在水中室温搅拌12~36小时，转化成所述的 晶型； 3)权利要求23或24所述的奥比特嗪-富马酸盐无定型在水中室温搅拌12~36小 时，转化成所述的晶型。33. 权利要求23或24所述的奥比特嗪-富马酸盐无定型的制备方法，其包含以下步 骤： 权利要求1~22任一项所述的晶型在有机溶剂中溶解（例如溶解在醇类或THF中，所 述醇类可以为甲醇或乙醇），并挥干或旋干有机溶剂得到奥比特嗪-富马酸盐无定型。34.药物组合物，其包含权利要求1~16任一项的奥比特嗪-富马酸盐的晶型、权利要 求17~22任一项的奥比特嗪-富马酸盐水合物的晶型、权利要求23~24任一项的奥比 特嗪-富马酸盐无定型或权利要求25的奥比特嗪-富马酸盐水合物，以及药学上可接受的 载体或赋形剂。35.权利要求1~16任一项的奥比特嗪-富马酸盐的晶型、权利要求17~22任一项 的奥比特嗪-富马酸盐水合物的晶型、权利要求23~24任一项的奥比特嗪-富马酸盐无 定型、权利要求25的奥比特嗪-富马酸盐水合物或权利要求34的药物组合物用于制备预 防和/或治疗肿瘤的药物的用途。36. 权利要求35的用途，其中所述肿瘤为与Caspase-3表达异常有关的肿瘤，例如选自 胃癌、结直肠癌、肝癌、胆囊癌、恶性淋巴瘤、宫颈癌、神经母细胞瘤、髓母细胞瘤和肺癌。37. 权利要求1~16任一项的奥比特嗪-富马酸盐的晶型、权利要求17~22任一项 的奥比特嗪-富马酸盐水合物的晶型、权利要求23~24任一项的奥比特嗪-富马酸盐无 定型、权利要求25的奥比特嗪-富马酸盐水合物或权利要求34的药物组合物用于制备试 剂的用途，所述试剂用于杀伤或杀死肿瘤细胞。38. 权利要求37的用途，所述肿瘤细胞为与Caspase-3表达异常有关的肿瘤细胞，例如 选自胃癌细胞、结直肠癌细胞、肝癌细胞、胆囊癌细胞、恶性淋巴瘤细胞、宫颈癌细胞、神经 母细胞瘤细胞、髓母细胞瘤细胞和肺癌细胞。
【专利摘要】本发明属于药物化学领域，具体涉及奥比特嗪-富马酸盐、水合物、晶型及其制备方法。具体地，本发明通过调整奥比特嗪与富马酸配比、采用不同结晶方法制备得到了奥比特嗪-富马酸盐的不同晶型、奥比特嗪-富马酸盐水合物及其晶型以及奥比特嗪-富马酸盐无定型。本发明为提供更高药学效果、更易制备并具有更好储存稳定性的奥比特嗪-富马酸盐提供了可能。
【IPC分类】A61P35/00, A61K31/551, C07D243/08
【公开号】CN105085421
【申请号】CN201510441970
【发明人】程笠人
【申请人】深圳市湘雅生物医药研究院
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年7月24日