一株盐单胞菌tf-1及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物生物技术和环境生物技术领域，具体设及一株盐单胞菌TF-I 及其在微生物采油中的应用。
【背景技术】
[0002] 微生物采油依靠微生物代谢产生酸、二氧化碳或生物气扩大含油层的孔隙，增加 原油的流动性；或是把重质的控类分解成更易流动的短链化合物，W及产生生物表面活性 剂、生物聚合物等来提高原油采收率。但是油藏环境往往具有高溫、高矿化度的特点，要在 运些油藏中进行微生物采油，必须具有耐溫、耐盐的高效菌种。在环境中耐高溫、高盐的菌 种不少，但在微生物采油上耐高溫耐盐且能降解原油乳化效果好的菌种较少，而且应用于 高溫高盐油藏中的菌种的报道也很少，因此针对上述情况，需要筛选出适合高溫高盐油藏 环境的嗜盐菌应用于微生物采油技术。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供一种盐单胞菌化IomonasSP.TF-I 及其在微生物采油中的应用。
[0004] 本发明提供的盐单胞菌化Iomonassp.TF-I菌株，W下简称TF-1，于2015年3月 12日保藏于"中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、"（北京市朝阳区北辰西路1 号中国科学院微生物研究所），其保藏编号为"CGMCCNo.10619"，分类命名中文名称为"盐 单胞菌"，拉下文名称为"化Iomonassp."。 阳00引本发明提供的盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619菌株，是从胜利油田油水井样品中通 过37°C、常压条件下W化Cl含量为6. 0%的高盐培养基富集培养筛选得到，并通过耐溫耐 盐性能考察反复筛选传代获得。
[0006] 盐单胞菌TF-1CGMCCNo. 10619的形态学特性：在好氧高盐固体培养基下培养1~ 2d出现大小一般为0. 4~0.8mm白色菌落，细胞形态为短杆状，大小4~8ymXO. 2~ 0. 5Jim。
[0007] 盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的生理生化特性：好氧，生长溫度30~60°C，最适 生长溫度37°C，生长抑值范围5~8,最佳生长抑范围7~7.5,化Cl的耐受性0~26%。 阳00引盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的营养培养基：葡萄糖0. 3mg/L、蛋白腺0. 3mg/L、 酵母粉 0. 3mg/l、K2HPO4O.27mg/l、氯化钢 6mg/l，抑值为 7. 0~7.5。
[0009] 盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619发酵条件：接种量2%，接种龄12h，初始抑7. 0， 溫度37°C，揽拌速度180巧m，pH= 7,通气量：lL/min。
[0010] 盐单胞菌TF-ICGMCCNo.10619的性能评价参数：W原油为唯一碳源的生长能力、 发酵液乳化降粘能力和物理模拟实验提高采收率值。
[0011] 盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的性能评价方法：
[0012] (1)W原油为唯一碳源的生长能力评价
[0013] 盐单胞菌TF-ICGMCCNo.10619接种于W原油为唯一碳源的控类培养基中，37°C、 ISOrpm下振荡培养，进行细菌密度测试。
[0014] 似发酵液乳化降粘能力评价
[0015] 脱水原油在60°C用旋转粘度计测其粘度y。，脱水原油和盐单胞菌菌液按照7 : 3 的比例在60°C水浴中恒溫30min，迅速揽拌测其60°C的粘度y1，根据降粘率计算公式f= [(y广y1) /y。]X100 %，则其乳化降粘率。
[0016] (3)物理模拟实验提高采收率值评价
[0017] ①岩屯、准备：装填岩屯、和灭菌，测定空气渗透率；
[001引②抽真空、饱和模拟地层水，测定岩屯、PV(孔隙体积）；
[0019] ③饱和原油，岩屯、老化7山计算束缚水饱和度；
[0020] ④一次水驱，水驱至采出水含水98%W上，计算一次水驱采收率；
[0021] ⑥注入盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619发酵液0. 2~0. 3PV;
[0022] ⑧二次水驱，水驱至产出液含水100 %，计算盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619发酵 液提高采收率值。 阳02引盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的性能：W原油为唯一碳源生长，细菌浓度大于 5XIO8个/mL;发酵液乳化降粘率大于90%;物理模拟实验提高采收率值大于15%。
[0024] 盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的现场应用工艺：一种是微生物单井吞吐，即通 过油井向地层注入发酵液，利用盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619繁殖代谢提高单井产能； 另一种是微生物清防蜡，即将发酵液从油套环空注入油井井筒，利用盐单胞菌TF-1CGMCC No.10619与井筒中的原油及井筒表面作用，减缓井筒结蜡。
[00巧]所述的微生物单井吞吐，其具体步骤为用累车将配制好的TF-I发酵液50~IOOm3 经油井油套环空注入地层，注入速度为6~8m3/h;油井关井培养10~20d后开井生产，利 用盐单胞菌TF-I繁殖代谢提高单井的产能。
[0026] 所述的微生物清防蜡，其具体步骤为用加药累将TF-I发酵液100~200kg由油井 的套管加入油套环空，加入速度为300~60化/min,每20~30d投加一次发酵液，利用盐单 胞菌TF-I在井筒中与原油及井筒表面作用，减缓井筒结蜡。
[0027] 本发明的优点和有益效果在于： 阳02引本发明提供的盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619生长溫度30~60°C，生长抑值范围 5~8,耐盐0~26%，能够W原油为唯一碳源生长，发酵液乳化降粘率大于90%;物理模拟 实验提高采收率值大于15%，该菌株发酵液应用于现场微生物单井吞吐，平均单井增油量 大于250吨，应用于现场微生物清防蜡，平均延长油井热洗周期120dW上。
【附图说明】
[0029] 附图1为TF-I菌株的形态图；
[0030]附图2为TF-I在不同盐度条件下培养的细菌浓度；
[00川附图3为TF-IW原油为碳源的生长曲线。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于 此： 阳〇3引 实施例I:
[0034] 本发明提供的盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619的形态特征和生理生化特征。
[0035]参照《Bergey'SMannualofSystematicBacteriology》的实验方法进行，检测 其革兰氏染色，菌体大小和形态，有无鞭毛和芽抱，生长溫度，W及触酶、淀粉水解、明胶液 化、半乳糖、木糖、乳糖等生化特征。
[0036] 研究结果表明，如图1所示，该菌株为革兰氏染色阳性、菌体呈短杆状、无周生鞭 毛、能运动、好氧，细胞大小4~SymX0. 2~0. 5ym，生长溫度30~60°C，最适生长溫度 37°C，生长抑范围5~8,最佳生长抑范围7~7. 5,化Cl耐受性0~26%，如图2。
[0037] 实施例2:
[0038] 本发明提供的盐单胞菌TF-1CGMCCNo.10619培养发酵及发酵液性能评价
[0039]发酵培养基：葡萄糖 0. 3mg/l、蛋白腺 0. 3mg/l、酵母粉 0