一种抑制激肽释放酶klk7的化合物、制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药领域，特别是指一种抑制激肽释放酶KLK7的化合物、制备方 法和用途。
【背景技术】
[0002] 特应性皮炎（AtopicDermatitis,AD)是一种广泛传播的慢性炎症性皮肤病，特点 是干燥、鳞状皮肤、炎症、皮肤渗透性增加，AD病人的皮肤对环境中常见的而对正常人无害 的因素也会很敏感从而易于受到表面感染。在过去的30年间工业化国家的特应性皮炎的 发病率增长了 2到3倍，据估计儿童的特应性皮炎患病率达到了 15-30%，成人的特应性皮 炎患病率达到了 2-10%。由于发病机制的复杂性，对AD的发病机制了解得不多，但皮肤屏 障功能紊乱已经被证实是AD发展过程中的关键因素之一。皮肤屏障的稳定依赖于颗粒层 的角质形成细胞分化为角质细胞和皮肤表层角质细胞脱落（即脱肩）之间的平衡，皮肤的 脱肩过程包括由KLKs参与的桥粒的降解，由于桥粒是角质细胞的粘连蛋白，桥粒的降解则 会导致角质细胞脱落而致皮肤脱肩。证据显示，局部或暂时性的KLKs活性控制的失调，是 AD病人皮肤屏障稳定缺失的主要原因之一。
[0003] KLKs(Kallikreins，激肽释放酶）是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特异性的丝氨 酸蛋白酶，其编码基因定位于19ql3. 4,编码15个分泌型丝氨酸蛋白酶KLK1-KLK15。已 经证明，KLKs存在于正常人的角质层细胞中，目前发现，至少有8种KLK(KLK5,KLK6,KLK 7，KLK8,KLK10,KLK11，KLK13和KLK14)存在于人的角质层和汗液中，其中KLK7占总量 的40 %。KLK7可能是皮肤损伤的一个关键酶，而且在AD病人中它可能参与一个系统性炎 症反应，在AD的角质层KLK7升高最为突出，这提示KLK7在AD的发病机制上可能是至关重 要的，因此，抑制KLK7的活性对于AD的治疗显得最为重要。
[0004] LEKTI(Lympho-epithelialKazal-type-relatedinhibitor,淋巴上皮组织 Kazal型相关蛋白抑制剂）是由SPINK5基因编码的丝氨酸蛋白酶抑制剂家族的成员，LEKTI 前体包含一个信号肽和彼此隔开的15个丝氨酸蛋白酶抑制域（D1-D15)，表达后迅速被弗 林蛋白酶水解为几个蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳 蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的内源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14,它们共 同参与皮肤的脱肩过程。在AD病人，LEKTI表达水平严重降低，导致了KLK7活性的异常升 高。尽管LEKTI是表皮内KLK7的天然抑制剂，但作为治疗AD的外用药，其不能透过皮肤角 质层，而且其大分子蛋白质的特性也会导致吸收扩散速度过慢、降解速度过快的问题，因而 作用非常有限。到目前为止，还没有一种有效的KLK7抑制剂应用于临床。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提出一种抑制激肽释放酶KLK7的化合物、制备方法 和用途，抑制激肽释放酶KLK7的化合物能够有效的抑制KLK7的活性，加入适当的辅料和助 剂可制备成抑制KLK7活性的药物制剂。
[0006] 基于上述目的本发明提供的一种抑制激肽释放酶KLK7的化合物，具有式I所示结 构：
[0007]
[0008] 式I所示化合物的的制备方法包括以下步骤：
[0009] 步骤1，取式II所示化合物与卤代丙烷在第一溶剂、第一催化剂和加热回流条件 下发生亲核取代反应生成式III所示化合物；
[0010] 步骤2,取式III所示化合物与卤化试剂在溶剂和温度条件下发生卤化反应，式 III所示化合物的卤化产物在碱性条件下发生水解反应得到式IV所示化合物；
[0011] 步骤3,取式IV所示化合物与水合肼在乙醇和加热回流条件下发生缩合反应生成 式V所示化合物；
[0012] 步骤4,取式V所示化合物和式VI所示化合物在第二溶剂、第二催化剂和加热回流 条件下发生亲核取代反应生成式VII所示化合物；
[0013] 步骤5,取式VII所示化合物与拆分剂和无机酸溶液混合，在60_100°C下搅拌1~ 2. 0小时，冷却至室温，过滤，向滤出的固体中加碱即得式I所示化合物；
[0014]
[0016] 在本发明的一些实施例中，式VI所示化合物制备方法包括以下步骤：
[0017] (1)取式VIII所示化合物与三苯基氯甲烷在第三溶剂、第三催化剂和室温条件下 进行氨基保护反应得到式IX所示化合物，所述有机碱为三乙胺或吡啶；
[0018] (2)取式IX所示化合物与对甲基苄氯在第四溶剂、第四催化剂和加热回流条件下 发生亲核取代反应生成式X所示化合物；
[0019] (3)取式X所示化合物在80%醋酸水溶液中加热回流1~3小时后加入碱性溶液 反应，得到式XI所示化合物；
[0020] (4)取式XI所示化合物溶于第五溶剂、第五催化剂，并缓慢滴加氯乙酰氯，室温条 件下发生氮酰基化反应得到式VI所示化合物，反应时间1~3小时；
[0022] 在本发明的另一些实施例中，所述步骤2中，取式III所示化合物和二苯醚加热至 120~140°C，在光照下通入氯气，继续加热至160~170°C发生卤化反应，通完氯气后冷却 至100~110°C，加入磷酸锌和碳酸钠水溶液在加热回流条件下发生水解反应得式IV所示 化合物；所述式III所示化合物、氯气、磷酸锌、水、氢氧化钠的摩尔比为1. 〇 :2. 1~2. 5 : 0· 001 ~0· 003 :1· 4 ~1. 8 :0· 3 ~0· 8 ;
[0023] 在本发明的另一些实施例中，所述式II所示化合物、1-氯丙烷、第一催化剂的摩 尔比为 1. 0 :1. 1 ~1. 5 :1· 0 ~1. 2 ;
[0024] 所述式IV所示化合物、水合肼的摩尔比为1. 0 :1. 5~2. 0 ;
[0025] 所述式V所示化合物、式VI所示化合物、第二催化剂的摩尔比为1. 0:1. 0~ 1. 4:1. 0 ~2. 0 ;
[0026] 所述式VII所示化合物与拆分剂的摩尔比为1 : 1.0~1.2。
[0027] 所述式VIII所示化合物、三苯基氯甲烷、第三催化剂的摩尔比为1.0:1.1~1.5: 1. 2 ~2. 3 ;
[0028] 所述式IX所示化合物、对甲基苄氯，第四催化剂的摩尔比为1.0 :1. 1~1.5 : 1. 0 ~2. 0 ;
[0029] 所述式X所示化合物、醋酸的摩尔比为1 :8~11. 0 ;
[0030] 所述式XI所示化合物、氯乙酰氯、第五催化剂的摩尔比为1 :1. 0~1.3 :1. 2~ 2. 3。
[0031] 在本发明的一些实施例中，所述拆分剂为右旋二苯甲酰酒石酸（D-DBTA)，反应温 度为60~10(TC，反应时间为1~3小时；所述无机酸为盐酸、硫酸、硝酸或磷酸。
[0032] 所述亲核取代反应加热回流温度为60~140°C，反应时间1~4小时；
[0033]所述缩合反应的加热回流温度为78~100°C，反应时间6~12小时；
[0034] 所述氨基保护反应的温度为室温，反应时间1~5小时；
[0035] 所述氮酰基化反应的温度为室温，反应时间1~5小时。
[0036] 可选地，所述第一溶剂、第二溶剂、第三溶剂、第四溶剂和第五溶剂分别独立地任 意选自甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙腈、二氧六环、氯仿、乙醚中的任意一种或一 种以上；
[0037] 所述第一催化剂、第二催化剂、第三催化剂、第四催化剂和第五催化剂分别独立地 任意选自无机碱或有机碱，所述无机碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、碳酸铯或氢氧化钾，所 述有机碱为三乙胺或吡啶。
[0038] 式I所示化合物在抑制激肽释放酶KLK7活性的药物的应用。
[0039] 从上面所述可以