),3.63(s,3H),3.65-3.75(m,lH),4.09(t,J=6.0Hz,2H),4.20(dd,J = 2.4Hz,6.6Hz,lH),4.67(t,J= 9.0Hz,lH),5.09(s,2H) ,6.46-6.49(m,2H) ,6.70(s,2H), 7.04-7.09(m,2H) ,7.13(s, 1H),7.36-7.47(m,2H).13CNMR(75MHz,DMS〇-d6)520.68,22.15, 37.03,38.06,38.59,49.89,51.41,66.05,69.32,76.86,96.95,107.03,113.27,121.62, 124.50,125.77,128.53,128.73,133.82,136.55,137.31,140.24,157.02,159.15,160.65, 171.93.ESI-MSm/z:523.5[M+H]+；
[0090] (8)2-((5)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-((5)-甲亚磺酰基）丙氧基）联苯基-3-基） 甲氧基)-2，3-苯并二氢呋喃-3-基)乙酸(16)的合成：
[0091] 称量2-((s)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-((S)_甲亚磺酰基)丙氧基)联苯基-3-基） 甲氧基)-2,3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯（0.6g)溶于甲醇（3.5mL)和四氢呋喃（7.OmL) 混合液中，加入2M氢氧化钠(2.OmL)，50°C反应2小时。移至冰浴中用5mL的2M盐酸酸化，有大 量白色固体析出，用乙酸乙酯萃取三遍，再用饱和氯化钠溶液洗两遍，无水硫酸镁干燥后， 用甲醇/二氯甲烷体系过f lash柱，蒸干，真空干燥得0.34g淡黄色油，产率61.5%。66.4%de [柱子，CHIRALPAK TA(4.6mm I .D· X 250mm. 5um);流动相，n_hexane/ethanol/EtOAc/TFA = 75/10/15/0 · 1 (V/V/V/V);流速，0 · 8mL/min;检测，UV 286nm;温度，室温];[a]25D+8 · 36° (c 0.8,acetonitrile).IR(KBr)3418,2918,2577,1718,1619,1599,1496,1470,1316,1275, 1182,1154,1003,828,797,712,633.? NMR(300MHz，DMS0-d6)Sl.92(s，6H),2.04-2.14(m, 2H),2.44-2.50(m,lH),2.58(s,3H),2.66-2.98(m,3H),3.62-3.72(m,lH),4.09(t,J= 6.0Hz,2H),4.18(dd ,J = 2.1Hz,6.6Hz,lH),4.68(t ,J = 9.0Hz,lH),5.09(s,2H),6.46-6.49 (m,2H) ,6.71(s,2H),7.04-7.14(m,3H),7.37-7.47(m,2H),12.36(s,lH) ,13C NMR(75MHz, DMSO-de)δ20.69,22.15,37.04,38.03,39.11,49.86,66.02,69.29,77.07,96.89,106.93, 113.24,121.90,124.51,125.78,128.53,128.72,133.81,136.55,137.31,140.23,157.01, 159.07,160.64,173.07.ESI-MS m/z :507.5[M-H]_.HRMS(AP-ESI)m/z calcd for C29H32O6S [M-H]-507·1920.Found:507·1854;
[0092] ""-((幻^^'^'-二甲基-斗'-^-"幻-甲亚磺酰基丨丙氧基丨联苯基-:^-基） 甲氧基)-2,3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸（17)的合成：
[0093]合成步骤与2-((S)-6-((2'，6'_二甲基_4'-(3-((5)-甲亚磺酰基）丙氧基）联苯 基-3-基）甲氧基)-2，3-苯并二氢呋喃-3-基)乙酸(16)的合成的类似。
[0094]淡黄色油；产率：67.5% ;71.0%de[柱子，CHIRALPAK IA(4.6mm I.D. X 250mm · 5um);流动相，n_hexane/ethanol/EtOAc/TFA = 75/10/15/0.1(V/V/V/V);流速， 0.8mL/min;检测，UV 286nm;温度，室温];[α]%-18·12° (c 0.2，acetonitrile) .IR(KBr) 3423,2918,2577,1718,1619,1599,1496,1470,1316,1275,1182,1154,1004,829,798,712， 634.? NMR(300MHz,DMS0-d6)5l.92(s,6H),2.04-2.13(m,2H),2.44-2.50(m,lH),2.57(s, 3H) ,2.66-2.97(m,3H) ,3.62-3.72(m,lH) ,4.09(t,J = 6.3Hz,2H) ,4.18(dd,J = 2.1Hz, 6.9Hz,lH),4.68(t J = 9.0Hz,lH),5.09(s,2H),6.46-6.49(m,2H),6.71(s,2H),7.04-7.14 (m,3H),7.36-7.47(m,2H),12.35(s,lH). 13C NMR(75MHz,DMS〇-d6)520.70,22.14,37.04, 38.04,39.10,49.86,66.02,69.29,77.07,96.89,106.93,113.25,121.90,124.51,125.78, 128.53,128.73,133.81,136.55,137.31,140.23,157.01,159.07,160.64,173.06.ESI-MS m/z:507.5[M-H]-.HRMS(AP-ESI)m/z calcd for C29H32〇6S[M-H]-507.1920.Found: 507.1854。
[0095] 实施例4:体外GPR40激动活性实验。
[0096] 本发明的化合物11，12，13以及对照药物1(TAK-875)体外GPR40激动活性是通过 HEK293/GPR40/NFAT/ma细胞系钙流活性实验来实现。具体步骤如下：
[0097] 实验材料 [0098] 试剂与耗材：
[0099] l.HEK 293/GPR40/NFAT/ma，辉源生物科技有限公司
[0100] 2 .DMEM，美国Invitrogen，货号：10566-024
[0101] 3 .FBS，法国Biowest，货号：S1810-500
[0102] 4.DMS0,美国Sigma，货号：D8418
[0103] 5.Hygromycin B，美国CABI0CHEM，货号：400052
[0104] 6.Linolenic acid，sigma,货号：L2376
[0105]7·BSA，美国GENVIEW，货号：FAO16-50G
[0106] 8.HBSS10X，Gibco,货号 14065056
[0107] 9.HEPES，美国Sigma，货号H3375
[0108] 10.Fluo8washfreecalciumassaykit，辉源生物科技有限公司，货号：HD02_ 0010
[0109] 11.ECHO384LDVplate,美国Labcyte，货号：LP-0200
[0110] 12.384polypropyleneplates，美国Greiner，货号：781201
[0111] 13.384孔黑边底透灭菌板，美国Corning，货号:3712
[0112] 14.FLIPR读板仪，美国Molecular Devices
[0113] 15.MultidropCombi(ThermoScientific)
[0114] 溶液与缓冲液：
[0115] 1.细胞生长培养基
[0116] 向90%DMEM加入10%FBS，并添加HygromycinB至终浓度为100g/mL，储存在4°C备 用
[0117] 2.冻存液
[0118] 仅在使用前，向90%的FBS中加入10%的DMS0。
[0119] 3.HBSS缓冲液
[0120] 将100ml10X的HBSS母液，用纯净水稀释到900ml，加入4.766克HEPES干粉，充分搅 拌，完全溶解后定容到l〇〇〇mL，并调节pH值到7.4。储存在4°C备用 [0121 ] 4.assay缓冲液
[0122] 仅在使用前，向HBSS中分别加入终浓度为0.1%BSA。
[0123] 工作溶液可在4°C放置24小时。
[0124]实验方法：
[0125]化合物的配制
[0126] 1.根据化合物的排列顺序，用自动加样器在ECHOLDV板3-12列，14-23列加入10.8 yL的DMS0。
[0127]2.用DMS0将1，11，12和13分别稀释到4mM，0.4mM,0.12mM和40mM。此溶液作为化合 物的初始浓度。
[0128]3.用DMS0将阳性化合物Linolenic acid稀释到40mM。此溶液作为阳性化合物的初 始浓度。
[0129]4.根据化合物的排列顺序在2列和13列分别加入10yL的待测化合物和阳性化合物 初始浓度。
[0130] 5.使用Bravo液体工作站进行halflog梯度稀释。从第一个浓度点取出5yL化合物 与下一孔中的1 〇.8yLDMS0混合，吹吸3次混匀之后吸取5yL与再下一孔中DMS0混合。依次直 至完成到第11个浓度点的稀释。
[0131] 6.整版稀释完成后在第1列和第24列，按照排布，加入10yLDMS0或12mM Linolenicacid。
[0132] 7.用ECHO将化合物梯度从ECHOLDV板中转移500nL至化合物板中（货号：781201。） 用封板机封板备用。
[0133] 8.及至使用前，用MultidropCombi往化合物板每孔加入49.5yLassaybuffer。 震荡混合均匀后使用。
[0134] 操作步骤：
[0135] 1.将培养的细胞用胰酶消化，计数后用细胞生长培养基重悬。对于本实验，每孔最 佳的细胞数量15000个，每孔为30yL，因此可将细胞稀释至5X105/mL。
[0136] 2.用MultidropCombi将30yL含有细胞悬浮液加入到384孔黑边透明底板中 (Corning，货号：3712) 〇
[0137] 3.放入37度5%C02培养箱中，培养24小时。
[0138] 4.培养24小时之后，去掉384孔板中的培养基，并加入30yLFluo8Fluo8wash free calciumassaydye。
[0139] 5.将上一步骤的384孔板置于37度孵育1小时。
[0140] 6.孵育完成后将细胞板，化合物板和枪头放到FLIPR的相应板位上进行读板。
[0141] 数据处理：
[0142] 将实验结果用ScreenWorks软件导出，导出算法为Max-Min。利用作图软件Prism5 制作化合物浓度曲线，计算EC50值。
[0143] 实验结果：
[0144] 表1化合物l，ll，l2，l3，亚麻酸的体外活性·
[0145]
[0146] 3表中数值为三次试验的平均值，标准偏差小于平均值的20% .
[0147] 麻酸的EC5Q值，单位是uM，表中数值为三次实验的平均值，标准偏差小于平均值 的 20%.
[0148] 实施例5:药物动力学研究实验
[0149] 本发明的11，12，13以及对照药物1 (TAK-875)的药物动力学研究具体步骤如下：
[0150] 1、仪器条件
[0151] 美国ABSCIEX公司三重四级杆质谱仪API5000,配有岛津LC-20XR高效液相色谱 仪;离子化方式：电喷雾离子化(ESI)，负离子方式检测；扫描方式:多反应离子检测(MRM); 喷雾电压（IS):-4500V;温度(TEM):450°C;雾化气(GAS1)和辅助气(GAS2)均为50psi;喷撞 气(CAD)为 6psi;气帘气(CUR)为 15psi。
[0152] 色谱柱为Agilent Z0RBAX38-(：18柱（5以111粒径，150X4.6mm);流动相为乙腈和水 (含0.1%甲酸）（75:25^八）；流速:0.5111171^11 ;柱温：30°(3。
[0153]质谱条件：1'1:01/03为523.2/147.5;了2 :01/03为507.3/147.4;内标（右旋布洛 芬）：Q1/Q3为205.4/160.6。优化后碰撞电压（Colli