sionEnergy)分别为：-36v，-35v，-10v〇 去簇电压(DeclusteringPotential)，射入电压（EntrancePotential)，碰撞室射出电压 (〇父卩）分别为：-14(^，--1(^，-15￥〇
[0154] 2、样品预处理
[0155]标准曲线的制备:取11和1系列标准溶液20yL，分别加入空白血浆80yL和内标的乙 腈溶液400yL，涡流混匀后12000g离心lOmin后取上清液200yL进样分析。标准曲线相当于血 浆浓度为：10，20，50，100，200，，400，600，800，1000，和2000ng/mL。
[0156] 样品处理:取100yL给药后的样品血浆，加入内标的乙腈溶液400yL，1500r/min涡 流40s后12000g离心1Omin后取上清液200yL进样分析。
[0157] 3、实验动物
[0158] Wistar雄性大鼠（清洁级）24只，体重220 ± 10g，购自山东大学实验动物中心。本发 明化合物1，11，12，13灌胃剂量3mg/kg(用大豆油配制），分别于给药后0.25，0.5，1.0，2.0， 4.0,6.0,8.0,10.0,12.0,24.0,36.0,48.0h采血200yL，分离得血浆储存于-20°C待用。
[0159] 4、实验结果
[0160] 表2化合物l，ll，12and 13a的药动学参数
[0163] a利用DAS 2.0计算得到的1，11，12和13及其代谢物的药动学参数.表中数值6只雄 性大鼠的平均值，〃士〃后的数值表示标准偏差。
[0164] NC:未计算。
[0165]实验结论：由图1可知，砜类化合物与亚砜类化合物在体内可相互转化，具体来讲， 砜类化合物可少量的转化为亚砜类化合物，亚砜类化合物相对大量地转化为砜类化合物。 化合物12可大量地转化为1。比较其曲线下面积可知化合物12比1(TAK-875)有更优良的生 物利用度。
[0166]实施例6:大鼠糖耐量实验。
[0167]本发明的化合物1，11，16和17的药效学作用是通过对链佐菌素(STZ)所致的大鼠 二型糖尿病模型的降血糖作用来实现。
[0168] 一、实验材料和仪器
[0169]材料：
[0170]链脲佐菌素（31:代口1:〇2〇(3；[11，312，美国3丨81]^公司原装）1，11，，16，17，1￥6611-80，葡 萄糖、枸橼酸、枸橼酸三钠均为分析纯。仪器：
[0171]北京怡成血糖仪5D-1型、血糖仪检测试纸条(北京怡成生物电子技术有限公司）， Lancet无菌采血针，lml-次性注射器，5mL-次性注射器，大鼠灌胃器。
[0172]动物：
[0173] Wistar大鼠（雄性，180_200g) 〇
[0174]二、实验方法
[0175] 1.血糖测定仪的标定和血糖含量的检测
[0176]按照怡成血糖测试仪说明书方法进行操作。经测试，血糖测试仪检测迅速简便、效 率高、数据稳定可靠、重现性好。
[0177] 2.糖尿病大鼠模型的建立
[0178]采用高糖高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模 型。
[0179] 第一阶段高糖高脂饲料喂养:Wistar大鼠普食喂养7d后，给予高糖高脂饲料(配方 为基础饲料57 %、猪油30 %、蔗糖10 %、蛋黄3 % )喂养28d;
[0180] 第二阶段小剂量SZT腹腔注射:上述高糖高脂饲料喂养大鼠禁食12h，给予腹腔注 射35mg/kgSTZ(STZ溶解在pH4.2的O.lmol/L柠檬酸缓冲液内，配制成1%的溶液，避光冰 浴即用），注射72h后，尾尖采血并用北京怡成生物技术有限公司5D-1型血糖仪测空腹血糖， 以空腹血糖2 13.9mmol/L且稳定7d以上为T2DM大鼠造模成功。
[0181] 三、糖尿病大鼠的降血糖药效学研究
[0182] 取糖尿病模型大鼠给药前禁食不禁水>10h后，称重，测空腹血糖值，随机分为1组、 11组、16组、17组和Control组，每组3只。分别将1、11、16、17用Tween-80溶成浓度为5%溶 液，给药剂量为5mg/kg，给药方式为口服灌胃；Control组只给予Tween-80溶液口服灌胃，三 组大鼠每天灌药1次。连续灌药21d后，对三组大鼠行0GTT实验，方法为:实验前大鼠禁食不 禁水>l〇h，测空腹血糖，给药lh后再测血糖，然后给予每只大鼠lg/kg葡萄糖灌胃前测血糖， 再分别在30、60、120分钟尾尖取血测血糖。
[0183] 分组方法：
[0184] 表3 1组、11组、16组、17组和Control组分组方法
[0185]
[0186] 四、实验结果
[0187] 见附图2。
[0188] 五、讨论
[0189] 连续3周灌药后，与control相比，1组、11组、16组、17组均有不同程度的降血糖作 用，且16组降糖作用较其他三组明显。
[0190] 综上所述，TAK-875的亚砜类似物不能明显的影响它们的体外活性，但是S构型亚 砜类似物的体内药效和药动都明显优于TAK-875。
【主权项】
1. TAK-875类似物，及其各种光学异构体，药学上可接受的盐，溶剂合物以及前药，具有 通式(I)所示的结构：其中通式(I)中:*是立体构型为R或S光学纯度或消旋体，优选是S构型光学纯异构体。2. 权利要求1所述的TAK-875类似物，其特征在于为如下化合物之一： 2-((35)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-(甲亚磺酰基)丙氧基-[1，1'-联苯基]-3-基）甲氧 基)-2，3_苯并二氛咲喃_3_基）乙酸、 2-((S)-6-((2'，6'_二甲基-4'-(3-((S)_ 甲亚磺酰基)丙氧基)-[1，Γ-联苯基]-3-基） 甲氧基)-2，3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸、 2-((S)-6-((2'，6'_二甲基-4'-(3-((R)_ 甲亚磺酰基)丙氧基)-[1，Γ-联苯基]-3-基） 甲氧基)-2，3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸。3. 权利要求1所述TAK-875类似物的制备方法，其特征在于包括如下方法之一： (1)合成路线1:2与对甲基苯磺酰氯反应得到化合物3,化合物4与3-醛基苯硼酸发生铃 木反应得到化合物5;在碳酸钾存在下，化合物3与化合物5反应得到化合物6，硼氢化钠还原 得化合物7;中间体8是根据文献报道(WO 2012/111849A1)方法合成;化合物7与中间体8发 生Mitsunobu反应得化合物9，最后经过氧化，水解得终产物11; 合成路线1:上述合成路线1反应式的试剂与条件是：（a)对甲苯磺酰氯，三乙胺，二氯甲烷，30°C， 77.0%(co%);(b)3-醛基苯硼酸，双三苯基膦二氯化钯，二甲基亚砜，碳酸钠（2M)，85°C， 71.5%(?%);((：)碳酸钾，二甲基甲酰胺，90°〇，80.0%(?%)4(1)硼氢化钠，甲醇，四氢呋 喃，〇°C-室温，87.7 % ( ω % ); (e)中间体8，三苯基膦，偶氮二甲酸二乙酯，四氢呋喃，室温， 65.8%(?%);(〇30%(?%)双氧水，三氟乙酸，甲醇，四氢呋喃，〇°〇室温，84.5% (?%);&)甲醇，四氢呋喃，21氢氧化钠，50°〇，盐酸(21〇,0°〇，61.5%(?%); 制备上述TAK-875类似物的关键中间体2-((3S)-6-((2'，6'_二甲基_4'-(3-(甲亚磺酰 基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2,3_苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯（10)，该中间体的制 备方法如下： 称量(S)-2-(6-((2'，6'_二甲基-4'-(3-(甲硫基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2,3_ 苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯于反应瓶中，加入甲醇和四氢呋喃，冰浴下，滴加30%双氧 水，滴加完双氧水后再滴加三氟乙酸，反应半小时后，撤冰浴，室温反应两天，浓缩，经柱层 析分离得到产物； 本发明的TAK-875类似物2-((35)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-(甲亚磺酰基)丙氧基)联 苯基-3-基）甲氧基)-2，3-苯并二氢呋喃-3-基)乙酸(11)的合成方法为： 称量2-((3S)-6-((2'，6'_二甲基_4'-(3-(甲亚磺酰基）丙氧基）联苯基-3-基）甲氧 基)-2,3_苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯溶于甲醇和四氢呋喃混合液中，加入2M氢氧化钠， 50°C反应2小时;移至冰浴中2M盐酸酸化，有大量白色固体析出，用乙酸乙酯萃取三遍，再用 饱和氯化钠溶液洗两遍，无水硫酸镁干燥后，浓缩，经柱层析分离得到产物； (2) 拆分路线2:利用CHIRALPAK ADH柱子，手性制备拆分化合物11，得化合物12和13. 拆分路线2:上述拆分路线2反应式的试剂与条件是：（a)CHIRALPAK ADH手性色谱柱，二氧化碳/甲 醇（60/40，V/V); (3) 合成路线3:在催化剂四异丙氧基钛，氧化剂过氧化羟基异丙苯，手性配体D-(-)_酒 石酸二乙酯的存在下，从化合物9不对称合成化合物14，水解得化合物16.化合物17的合成 相似于化合物16的合成，只是将手性配体换成了 L-( + )_酒石酸二乙酯； 合成路线3:上述合成路线3反应式的试剂与条件是：（a)四异丙氧基钛，过氧化羟基异丙苯，D-(-)_ 酒石酸二乙酯，二氯甲烷，_15°C，77 · 5% ( ω % ); (b)甲醇，四氢呋喃，2M氢氧化钠，50°C，2M 盐酸，0°〇，61.5%(?%)，66.4%非对映异构体过量值；（(：）四异丙氧基钛，过氧化羟基异丙 苯儿-(+ )-酒石酸二乙酯，二氯甲烷，-15°〇，72.5%(?%);((1)甲醇，四氢呋喃，21氢氧化 钠，50°C，2M盐酸，0°C，67 · 5% ( ω % )，71 · 0%非对映异构体过量值； 本发明制备上述了六1(-875类似物的关键中间体为2-((3)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3- ((S)-甲亚磺酰基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2,3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯（14) 或2-((S)-6-((2'，6'_二甲基-4'-(3-((R)_甲亚磺酰基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2， 3_苯并二氢呋喃-3-基)乙酸甲酯（15)，该中间体的不对称制备方法如下： 称量(S)-2-(6-((2'，6'_二甲基_4'-(3-(甲硫基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2,3_ 苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯于反应瓶中，加入溶剂，滴加四异丙氧基钛，再滴加 D-(-)_酒 石酸二乙酯或L-( + )_酒石酸二乙酯，室温搅拌5分钟，冷却至-15°C，滴加氧化剂，反应2小 时，浓缩，经柱层析分离得到产物； 所述的TAK-875类似物2-((5)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-((5)-甲亚磺酰基）丙氧基） 联苯基-3-基）甲氧基)-2,3_苯并二氢呋喃-3-基）乙酸（16)或2-((S)-6-((2'，6'_二甲基-4'-(3-((1〇-甲亚磺酰基）丙氧基）联苯基-3-基）甲氧基）-2,3-苯并二氢呋喃-3-基）乙酸 (17)的合成方法： 称量2-((5)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-((5)-甲亚磺酰基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧 基)-2,3_苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯或2-((5)-6-((2'，6'-二甲基-4'-(3-((1〇-甲亚磺 酰基)丙氧基)联苯基-3-基）甲氧基)-2,3_苯并二氢呋喃-3-基）乙酸甲酯溶于甲醇和四氢 呋喃混合液中，加入2M氢氧化钠，50°C反应2小时;移至冰浴中2M盐酸酸化，有大量白色固体 析出，用乙酸乙酯萃取三遍，再用饱和氯化钠溶液洗两遍，无水硫酸镁干燥后，浓缩，经柱层 析分离得到产物。4. 权利要求1或2所述的化合物在制备预防或治疗与GPR40相关的哺乳动物疾病的药物 中的应用;所述的与GPR40相关的哺乳动物疾病为:糖尿病，神经性疾病，癌症。5. -种适于口服给予哺乳动物的药物组合物，包括权利要求1或2的化合物和一种或多 种药学上可接受载体或赋形剂。6. -种适于胃肠外给予哺乳动物的药物组合物，包括权利要求1或2的化合物和一种或 多种药学上可接受载体或赋形剂。
【专利摘要】本发明涉及TAK-875类似物及其制备方法与应用。具体而言，本发明涉及具有通式(Ι)结构的化合物，还涉及其各种光学异构体，药学上可接受的盐，溶剂合物以及前药。本发明还涉及含有式(Ι)结构化合物的药物组合物及其制药用途。
【IPC分类】A61P25/00, A61K31/343, A61P3/10, C07D307/79, A61P35/00
【公开号】CN105418563
【申请号】CN201511003631
【发明人】张颖杰, 闫玉刚, 徐文方
【申请人】山东大学
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月28日