一种立达霉中代谢产物6的合成方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于化学合成技术领域，涉及一种立达霉中代谢产物的合成方法，具体涉 及一种对立达霉中代谢产物6:N- (2，6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸的合成方法。
【背景技术】
[0002] 立达霉(Ridomil)为F.Scwinn于1977年首先报导的新型高效内吸杀菌剂，又名甲 霜灵，其性能较稳定，对pH的适应范围广泛（1.0~9.0)，对高温度和强光耐受性好。作为一 种新型高效内吸杀菌剂，其作用机理是通过作用于菌丝体、孢子的细胞壁，以使其选择通透 性，影响水霉菌对营养物质的吸收利用，使菌丝体细胞死亡、孢子失去萌发力，阻断其生活 史，现有研究证明它对鱼体和鱼卵的水霉病具有良好的防治效果，如复方立达霉粉一一"美 婦"的泼洒浓度为5~10g/m3、浸浴浓度为20g/m3时，可有效地防治鱼卵、鱼苗和成鱼的水霉 病。
[0003] 目前，国内主要使用的含立达霉的剂型有35 %拌种剂、25 %可湿性粉剂、5 %颗粒 剂和25 %乳油，常见混剂有58%甲霜灵?锰锌可湿性粉剂（立达霉+代森锰锌）、60 %甲霜 灵?锰锌可湿性粉剂、72%甲霜灵?锰锌可湿性粉剂等。
[0004] 2002年农药残留联席会议(JMPR)建立了立达霉的毒理学，并确立了立达霉的每日 容许摄入量(ADI)。同时，经研究表明，立达霉在动物体内代谢主要有16种代谢产物，其中， 根据在不同动物中检测出的含量，较多的（>〇.lmg/kg)的代谢产物为代谢物6、8、12、16。而 其中，代谢物6为N-(2,6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸，目前国内外尚未有合成获得该 种立达霉主要代谢产物的相关研究。
【发明内容】
[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种立达霉中代谢产物6 的合成方法，用于解决现有技术中缺乏合成立达霉中代谢产物6的方法的问题。
[0006]为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种立达霉中代谢产物6 的合成方法，包括以下步骤：
[0007] 1)取立达霉（I)为原料，溶于有机溶剂中，降温后加入催化剂，再升温后反应，得到 化合物（Π);
[0008] 2)将化合物（Π)再溶于有机溶剂中，降温后加入碱液，再升温后反应，得到代谢产 物 6(m);
[0009] 步骤1)和步骤2)的反应路线如下：
[0010]
[0011] 其中：所述立达霉⑴为N-(2,6-二甲苯基)-2-甲氧基乙醛基异丙基甲酯胺;所述 化合物（Π)为N-(2，6-二甲苯基)-(2-羟酰基)异丙基甲酯胺;所述代谢产物6(ΙΠ)为N-(2， 6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸。
[0012] 优选地，步骤1)中，所述有机溶剂选自二氯甲烷，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚，甲苯中 的任意一种。更优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷(DCM)。
[0013] 优选地，步骤1)中，所述催化剂选自三溴化硼、三氯化铝，吡啶盐酸盐、氢溴酸与醋 酸混合水溶液中的任意一种。更优选地，所述催化剂为三溴化硼。
[0014] 优选地，步骤1)中，所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为1:5-20(mmol/ml)〇
[0015] 更优选地，所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为l:5(mmol/ ml) 〇
[0016] 优选地，步骤1)中，所述催化剂根据需要加入。
[0017] 更优选地，所述催化剂与立达霉加入的摩尔比为1-2:1。进一步优选地，所述催化 剂与立达霉加入的摩尔比为1.5:1。
[0018] 优选地，步骤1)中，所述降温采用干冰和丙酮的混合物冷却。所述降温在杜瓦瓶中 进行。
[0019] 优选地，步骤1)中，所述降温后的温度为-78至0°C。更优选地，所述降温后的温度 为-40〇C〇
[0020] 优选地，步骤1)中，所述升温后的温度为室温。更优选地，所述室温为25°C。所述升 温干冰和丙酮的混合物在杜瓦瓶中冷却到一定温度后随着干冰的挥发而自然、缓慢升高温 度。
[0021] 优选地，步骤1)中，所述升温后反应时间为l-24h。更优选地，所述升温后反应时间 为5h。
[0022] 优选地，所述步骤1)中反应通过薄层色谱法(TLC)确定反应终点。
[0023] 更优选地，所述薄层色谱法(TLC)通过对反应产物的检测来确定反应终点。
[0024] 进一步优选地，所述TLC的检测条件为采用体积比为1:1(V:V)的二氯甲烷与石油 醚作为显色剂，在紫外光照射的检视下使反应产物的点样消失为反应终点。
[0025] 优选地，所述步骤1)中反应完毕后还要对化合物（Π)进行纯化，包括如下步骤：
[0026] A)加入碱液调节化合物（Π)的pH值到中性(S卩pH=7);
[0027]更优选地，所述碱液为碱的饱和溶液。
[0028] 更优选地，所述碱液中的碱选自碳酸钠，碳酸钾，碳酸氢钠，碳酸氢钾，三乙胺中的 任意一种。最优选地，所述碱为碳酸氢钠。
[0029] B)再加入有机溶剂振荡分层，形成水相和有机相后分离；
[0030] 更优选地，所述分层在分液漏斗中进行。所述化合物（Π)溶解在有机相中。
[0031] C)取水相采用有机溶剂进行多次萃取后，收集有机萃取物与所述有机相合并，并 去除水相；
[0032] 更优选地，所述水相采用有机溶剂的萃取次数为2-4次。
[0033] D)取步骤C)中合并后的有机相洗涤、干燥、脱色，放置过夜，过滤，即得纯化后的化 合物（Π)。
[0034] 更优选地，所述合并后的有机相要采用水进行多次洗涤。所述洗涤用于去除有机 相中溶于水的杂质。进一步优选地，所述洗涤次数为2-3次。
[0035] 更优选地，所述有机相干燥是将有机相与干燥剂在室温下搅拌干燥。
[0036] 进一步优选地，所述干燥剂选自碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、无水硫酸钠、无水硫酸 镁中的任意一种。最优选地，所述干燥剂为无水硫酸钠。
[0037] 进一步优选地，所述干燥剂加入的质量与步骤1)中溶解立达霉所需有机溶剂加入 的体积之比为〇 · 03-0 · 1:1 (g/ml)。
[0038] 最优选地，所述干燥剂加入的质量与步骤1)中溶解立达霉所需有机溶剂加入的体 积之比为0.05:1 (g/ml)。
[0039] 进一步优选地，所述搅拌干燥时间为1.5-2.5小时。最优选地，所述搅拌干燥时间 为2小时。
[0040] 更优选地，所述脱色采用脱色剂进行脱色。
[0041] 进一步优选地，所述脱色剂为活性炭。所述活性炭采用最常用的医用中性活性炭。
[0042] 进一步优选地，所述脱色剂加入的质量与步骤1)中溶解立达霉所需有机溶剂加入 的体积之比为0 · 02-0 · 05:1 (g/ml)。
[0043]更优选地，所述过滤为真空抽滤。
[0044] 更优选地，所述真空抽滤后，将过滤产物用有机溶剂进行多次淋洗。所述淋洗后回 收滤液有机溶剂。
[0045] 进一步优选地，所述淋洗次数为3次。
[0046]更优选地，在上述化合物（Π)纯化中，所述有机溶剂选自二氯甲烷，乙酸乙酯，甲 基叔丁基醚，甲苯中的任意一种。
[0047] 所述步骤D)中纯化后得到的化合物（Π)为白色固体。
[0048] 优选地，步骤2)中，所述有机溶剂为甲醇。所述化合物（Π)在甲醇中完全溶解到溶 液透明无悬浮物。
[0049] 优选地，步骤2)中，所述碱液为碱的饱和溶液。
[0050] 优选地，步骤2)中，所述碱液选自氢氧化钠溶液，氢氧化钾溶液，氢氧化|丐溶液，碳 酸钾溶液，碳酸钠溶液中的任意一种。更优选地，所述碱液为氢氧化钾溶液。上述溶液均为 水溶液。
[0051] 优选地，所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为l:5-20(mmol/ ml) 〇
[0052] 更优选地，所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为l:5(mmol/ ml) 〇
[0053]优选地，所述立达霉加入的摩尔数与碱液加入的体积之比为1:1-1.l(mmol/ml)。 [0054]更优选地，所述立达霉加入的摩尔数与碱液加入的体积之比为1:1.05(mmol/ml)。 优
[0055] 选地，所述降温采用冰水浴降温。
[0056] 更优选地，所述冰水浴降温后的温度为0-20°C。进一步优选地，所述冰水浴降温后 的温度为5°C。
[0057] 优选地，所述升温是撤除冰水浴，自然升温至室温后，再采用水浴锅加热。
[0058] 更优选地，所述升温后的温度为30_40°C。进一步优选地，所述升温后的温度为35V。
[0059] 优选地，所述升温后反应时间为l_24h。更优选地，所述升温后反应时间为2h。
[0060] 优选地，所述步骤2)中反应通过薄层色谱法(TLC)确定反应终点。
[0061] 更优选地，所述薄层色谱法(TLC)通过对反应产物的检测来确定反应终点。
[0062]进一步优选地，所述TLC的检测条件为采用体积比为1:1(V:V)的乙