C面积归一法测定获得代谢产物6样品1# 的纯度为99.66 %。
[0110] 实施例3
[0111] 称取2.79gl0mmol的立达霉，溶解在100mL乙酸乙酯中，用干冰和丙酮的混合物冷 却到-78度左右，滴加20mmol的三溴化硼，滴加完毕后缓慢升至室温反应24小时。通过TLC检 测上述反应完成后，在产物中用碳酸钠饱和溶液小心调节pH到中性，产物在分液漏斗中加 入50mL乙酸乙酯振荡分层，分层为水相和有机相，将水相用30mL乙酸乙酯萃取3次，将3次萃 取的乙酸乙酯合并到有机相中，并去除水相。然后，将合并后有机相用50mL纯水洗涤3次后， 用3g无水硫酸镁干燥、2.5g中性活性炭脱色，放置过夜，再进行真空抽滤后，在抽滤漏斗中 将滤饼用乙酸乙酯进行3次淋洗后，得到白色固体，并回收滤液乙酸乙酯。
[0112] 将白色固体直接用1OOmL甲醇溶解至透明，然后降温至10°C左右，滴加10mL75mmo1 的氢氧化钠水溶液，滴加完毕加热到30°C反应5小时。通过TLC检测有机相原料反应完全后， 产物在分液漏斗中加入50mL乙酸乙酯振荡分层，分层为水相和有机相，收集水相，水相用 10mL乙酸乙酯萃取3次后，水相用浓盐酸调节pH到2,再用30mL乙酸乙酯萃取3次，将3次萃取 的乙酸乙酯合并到有机相中。然后，将合并后有机相用50mL纯水洗涤2次后，用3g无水硫酸 镁干燥、2.5g中性活性炭脱色，放置过夜，再进行真空抽滤后，在抽滤漏斗中将滤饼用乙酸 乙酯进行3次淋洗后，得到1.95g代谢产物6样品2#，同时回收滤液乙酸乙酯。获得的代谢产 物6样品2#的摩尔收率为77.7%，所述摩尔收率的计算公式同上述计算公式(i)。
[0113] 实施例4
[0114] 将实施例3中获得的代谢产物6样品2#分别进行HNMR和HPLC检测。
[0115] 其中，如图1所示，通过HNMR检测可知，在1.12-1.14ppm(d，3H)为CH3脂肪甲基氢； 在2.16ppm和2.41ppm别为和苯环相连的两个甲基;在3.5_3.7ppm(dd，2H)为与氧和羰基相 连的亚甲基的化学位移值;在4.57-4.59ppm(t，1H)为与甲基相连的次甲基的化学位移;在 芳香区7.11-7.17ppm(2H，dd)为苯环上甲基邻位两个对称氢的化学位移;在7.22-7.24(d， 1H)为芳环上甲基间位氢化学位移。根据上述HNMR检测结果，根据一般的核磁纯度判断经 验，核磁谱上无明显杂峰或者杂峰氢积分面积小于0.05以下，我们可以判断产品纯度大于 95%。同时，根据上述HNMR检测结果，可以验证本发明中合成的产物为立达霉中代谢产物6: N-(2,6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸。
[0116] 通过HPLC检测可知，采用HPLC面积归一法测定获得代谢产物6样品2#的纯度大于 95%〇
[0117]所以，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。
[0118]上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟 悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因 此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完 成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
【主权项】
1. 一种立达霉中代谢产物6的合成方法，包括以下步骤： 1) 取立达霉（I)为原料，溶于有机溶剂中，降温后加入催化剂，再升温后反应，得到化合 物（Π ); 2) 将化合物（Π )再溶于有机溶剂中，降温后加入碱液，再升温后反应，得到代谢产物6 (m); 步骤1)和步骤2)的反应路线如下：其中：所述立达霉（I)为N-(2,6-二甲苯基)-2-甲氧基乙醛基异丙基甲酯胺;所述化合 物（Π )为N-(2，6-二甲苯基)-(2-羟酰基)异丙基甲酯胺;所述代谢产物6(ΙΠ )为N-(2，6-二 甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸。2. 根据权利要求1所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，步骤1)中，包括 如下条件中任一项或多项： al)所述有机溶剂选自二氯甲烷，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚，甲苯中的任意一种； a2)所述催化剂选自三溴化硼、三氯化铝，吡啶盐酸盐、氢溴酸与醋酸混合水溶液中的 任意一种； a3)所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为1:5-20; a4)所述催化剂与立达霉加入的摩尔比为1-2:1; a5)所述降温采用干冰和丙酮的混合物冷却;所述降温后的温度为-78至0°C; a6)所述升温后的温度为室温； a7)所述升温后反应时间为l-24h。3. 根据权利要求1所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，所述步骤1)中 反应完毕后还要对化合物（Π )进行纯化，包括如下步骤： A) 加入碱液调节化合物（Π )的pH值到中性； B) 再加入有机溶剂振荡分层，形成水相和有机相后分离； C) 取水相采用有机溶剂进行多次萃取后，收集有机萃取物与所述有机相合并，并去除 水相； D) 取步骤C)中合并后的有机相洗涤、干燥、脱色，放置过夜，过滤，即得纯化后的化合物 (Π )。4. 根据权利要求3所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，所述化合物 (Π )纯化包括如下条件中任一项或多项： bl)在步骤A)中，所述碱液中的碱选自碳酸钠，碳酸钾，碳酸氢钠，碳酸氢钾，三乙胺中 的任意一种； b2)在步骤C)中，所述水相采用有机溶剂的萃取次数为2-4次； b3)在步骤D)中，所述有机相干燥是将有机相与干燥剂在室温下搅拌干燥;所述干燥剂 选自碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、无水硫酸钠、无水硫酸镁中的任意一种； b4)在步骤D)中，所述脱色采用脱色剂进行脱色;所述脱色剂为活性炭； b5)在步骤D)中，所述过滤为真空抽滤;所述真空抽滤后，将过滤产物用有机溶剂进行 多次淋洗； b6)在所述化合物（Π )纯化中，所述有机溶剂选自二氯甲烷，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚， 甲苯中的任意一种。5. 根据权利要求1所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，步骤2)中，包括 如下条件中任一项或多项： cl)所述有机溶剂为甲醇； c2)所述碱液选自氢氧化钠溶液，氢氧化钾溶液，氢氧化钙溶液，碳酸钾溶液，碳酸钠溶 液中的任意一种； c3)所述立达霉加入的摩尔数与有机溶剂加入的体积之比为1:5-20; c4)所述立达霉加入的摩尔数与碱液加入的体积之比为1:1-1.1; c5)所述降温采用冰水浴降温;所述冰水浴降温后的温度为0-20°C; c6)所述升温是撤除冰水浴，自然升温至室温后，再采用水浴锅加热；所述升温后的温 度为 30-40°C; c7)所述升温后反应时间为l-24h。6. 根据权利要求1所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，所述步骤2)中 反应完毕后还要对代谢产物6进行纯化，包括如下步骤： a) 在代谢产物6中加入有机溶剂振荡分层，形成水相和有机相后分离； b) 取水相采用有机溶剂进行多次萃取，去除有机萃取物后，再用酸液调节水相的pH值； c) 将步骤b)中的水相再次采用有机溶剂进行多次萃取后，收集有机萃取物与所述有机 相合并，并去除水相； d) 取步骤c)中合并后的有机相洗涤、干燥、脱色，放置过夜，过滤，即得纯化后的代谢产 物6〇7. 根据权利要求6所述的立达霉中代谢产物6的合成方法，其特征在于，所述代谢产物6 纯化包括如下条件中任一项或多项： dl)在步骤b)中，所述水相采用有机溶剂的萃取次数为2-4次； d2)在步骤b)中，所述酸液为盐酸水溶液;所述经酸液调节后水相的pH为1.5-2.5; d3)在步骤c)中，所述水相再次采用有机溶剂的萃取次数为2-4次； d4)在步骤d)中，所述有机相干燥是将有机相与干燥剂在室温下搅拌干燥;所述干燥剂 选自碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钾、无水硫酸钠、无水硫酸镁中的任意一种； d5)在步骤d)中，所述脱色采用脱色剂进行脱色;所述脱色剂为活性炭； d6)在步骤d)中，所述过滤为真空抽滤;所述真空抽滤后，将过滤产物用有机溶剂进行 多次淋洗； d7)在所述代谢产物6纯化中，所述有机溶剂选自二氯甲烷，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚， 甲苯中的任意一种。8. -种立达霉中代谢产物6,由权利要求1-7任一所述的立达霉中代谢产物6的合成方 法制得。9. 根据权利要求8所述的一种立达霉中代谢产物6在杀菌剂、药物中的用途。10. 根据权利要求9所述的用途，所述杀菌剂为杀灭水产动物伤口处水霉菌的试剂;所 述药物为防治水产动物水霉病的药物。
【专利摘要】本发明提供一种立达霉中代谢产物6的合成方法，包括以下步骤：1）取立达霉（Ⅰ）为原料，溶于有机溶剂中，降温后加入催化剂，再升温后反应，得到化合物（Ⅱ）；2）将化合物（Ⅱ）再溶于有机溶剂中，降温后加入碱液，再升温后反应，得到代谢产物6（Ⅲ）。本发明还进一步提供了上述方法制备的代谢产物6及其用途。本发明提供的立达霉中代谢产物6的合成方法，能够获得纯度较高、收率较好的N–(2,6-二甲苯基)-N-(羟乙酰基)丙氨酸，具有比较可观的应用及市场前景。
【IPC分类】C07C231/12, A61P31/10, C07C235/16
【公开号】CN105461588
【申请号】CN201510954228
【发明人】吴映捷, 胡鲲, 梁楠, 杨先乐
【申请人】上海海洋大学
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年12月17日