。如WO 2010/128096中所述制备卡泊芬净二乙酸盐。
[0034] HPLC 分析化V)
[0035] 柱； ￥日16'3乂81'1(1肖0〔18，长度为15〇1]1111，直径为2.1111111，颗粒直径为3.5 μL?
[0036] 注射体积： 5μ1
[0037] 检测； UV(210 和 270nm)
[003引流量； 0.35ml.min-i
[0039] 柱溫； 40°C
[0040] 流动相A: 700ml 50mM K2HP〇4(pH 7.0)+300ml乙腊
[0041 ] 流动相B: 75%乙腊
[00创梯度：
[0043]
[0044] LC-MS 方法
[0045] 柱； ￥日16'3乂8^(1旨0(：18，长度为15〇111111，直径为2.1111111，颗粒直径为3.5 μπι
[0046] 注射体积： 5μ1
[0047] 注射模式：满环进样
[004引流量； 0.35ml.min-i
[0049]柱溫； 40°C
[0化0]流动相A: 700ml 50mM乙酸锭(pH 6.8)+300ml乙腊
[0051] 流动相B: 75%乙腊
[0052]梯度；
[0化3]
[0054] MS
[0055] LC： Accela
[0056] IMS仪器：LTQ Orbitrap
[0057] LC/MS： ESI/pos m/z 300-1500
[005引 分辨率： 7500
[0059] NMR
[0060] 采用W下方法:称量约1 Omg样品加入合适的小瓶中并溶解在约0.6ml MeOD中。将 清澈的溶液转移到NMR管中并在配备有冷冻探针的600MHz Bruker Avance III分光仪上记 录 1h、2D-1H-1h(COSY，T0CSY)、2D-1H-UC化SQC，HMBC) (700MHz)和2D-1H-15n(HMBC)谱。利用标 准参数在300K下进行测量。通过ACD化学位移预测软件4.07版预测化学位移。
[0061 ] 实施例1
[006。在室溫下，由卡泊芬净（（1)，R = H)形成卡泊芬净径胺（（1)，R = 0H)
[0063] 将卡泊芬净二乙酸盐(50mg)溶解在乙醇(95%，10ml)中。在揽拌条件下，加入过乙 酸(32%，在乙酸中，2化1)并在室溫(20±3°C)下揽拌混合物90分钟。分别在5分钟、50分钟 和90分钟后取出样品并通过HPLC进行分析。加入另一部分过乙酸（32%，在乙酸中，1化1)， 在30分钟后（总时间是反应开始120分钟后）取出另外的样品并通过HPLC进行分析。在HPLC 分析之前，用甲醇将所有样品稀释10倍。下表中总结了HPLC结果(其中，卡泊芬净的相对保 留时间(RRT)被设定为1.00)。
[0064]
[00化]实施例2 闺]在〇-5°C下，由卡泊芬净（（1)，R=H)形成卡泊芬净径胺（（1)，R=0H)
[0067] 将卡泊芬净二乙酸盐(50mg)溶解在乙醇(95%，10ml)中。在揽拌条件下，在0-5°C 下加入过乙酸(32%，在乙酸中，3化1)并在该溫度下揽拌混合物3小时。在90分钟和3小时后 取出样品并通过HPLC进行分析。在0-5°C下加入另一部分过乙酸(32%，在乙酸中，1化1)，在 60分钟后（总时间是反应开始4小时后）取出另外的样品并通过HPLC进行分析。在HPLC分析 之前，用甲醇将所有样品稀释2倍。HPLC结果显示:相对于在实施例1中得到的结果，选择性 并未提高。
[006引实施例3
[0069] 制备卡泊芬净径胺（（l)，R = 〇H)
[0070] 将卡泊芬净二乙酸盐（Ig;0.8mmol)溶解在乙醇(95%，20ml)中。在揽拌条件下，加 入过乙酸(32 %，在乙酸中，0.5ml; 2.5mmol)并在室溫(20 ± 3°C)下揽拌混合物90分钟。加入 另一部分过乙酸(32%，在乙酸中，0.1ml) W使所加入过乙酸的摩尔量达到3mmol。揽拌30分 钟之后，在20°C下在真空中浓缩混合物并用水将残余物(5ml)稀释至50ml。将该溶液装载在 二氧化娃100C18柱（1个柱床体积(CBV): 100ml;直径为2.5cm，H= 20cm)上，所述柱用0.15% 乙酸预平衡。用8%乙腊/0.15%乙酸巧CBV)、15%乙腊/0.15%乙酸（10CBV)洗脱柱，然后用 75%乙腊(4CBV)再生，并用5CBV的0.15%乙酸(5CBV)平衡。级分收集：
[0071] -100ml 第一级分
[0072] -约20ml接下来的级分
[0073] 合并级分23和40并通过HPLC进行分析:81.5面积％的目标化合物;6.1面积％的卡 泊芬净和8.1面积％的未知化合物。在23°C下在真空中蒸发合并的级分并将残余物溶解在 0.15%乙酸巧ml)中。将产生的溶液装载在二氧化娃100C18柱（1个柱床体积(CBV) :100ml;直 径为2.5cm，H = 20cm)上，所述柱用0.15%乙酸预平衡。用13%乙腊/0.15%乙酸α0CBV)洗 脱柱，并收集如下的级分：
[0074] -200ml 第一级分
[0075] -约20ml接下来的级分
[0076] 合并级分37和40,然后在20°C下在真空中浓缩并冷冻干燥W产生0.19g作为白色 固体的目标产物，其HPLC纯度为89.3面积％。下表中总结了LC/MS分析的结果。
[0077]
[0078] 图1(反应混合物和经纯化的目标产物的HPLC结果)和图2(总离子色谱图和提取离 子色谱图）中描述了目标产物的UV和TIC色谱图。NMR数据请参见图3和4。
【主权项】
1. 通式（1)的化合物或其盐，其特征在于:R是羟基。2. 权利要求1所述的化合物，其中所述盐是药学上可接受的盐。3. 权利要求2所述的化合物，其中所述药学上可接受的盐是与有机酸的酸加成盐，所述 有机酸包括至少一种选自由乙酸、柠檬酸、谷氨酸、乳酸、马来酸、苹果酸、草酸、帕莫酸、丙 酸、琥珀酸和酒石酸组成的组中的有机酸。4. 权利要求3所述的化合物，其中所述药学上可接受的盐是二乙酸盐。5. 组合物，其包含根据权利要求1-4中任意一项所述的化合物和通式（1)的化合物，其 中R是氢。6. 根据权利要求5所述的组合物，其中所述根据权利要求1-4中任意一项所述的化合物 以0.01-2重量％的量存在。7. 制备根据权利要求1-4中任意一项所述的化合物的方法，所述方法包括:使卡泊芬净 或其盐与氧化剂接触。8. 根据权利要求7所述的方法，所述方法还包括色谱分析和分离。9. 根据权利要求7-8中任意一项所述的方法，其中所述氧化剂是过氧酸。10. 根据权利要求9所述的方法，其中所述过氧酸选自由间-氯过氧苯甲酸、过乙酸、过 氧单硫酸和过氧膦酸组成的列表。11. 根据权利要求1-4中任意一项所述的化合物作为抗真菌剂的用途。12. 根据权利要求1-4中任意一项所述的化合物在用于测定卡泊芬净样品的质量的方 法中的用途。
【专利摘要】本发明涉及新颖的环六肽、制备所述环六肽的方法和所述环六肽的用途。
【IPC分类】C07K7/56, A61K38/12, G01N33/68
【公开号】CN105531283
【申请号】CN201480049079
【发明人】保罗斯·伯纳德斯·玛利亚·格罗恩, 彼得·菲利普·兰克豪斯特, 布尔汗·奥匝普, 罗伯特斯·马特修斯·帕特·德
【申请人】中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2014年9月8日
【公告号】EP3044230A1, WO2015036354A1