料切至约3-5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1:1(W/W)混合，放入汽爆罐，在1.5MPa压力下维压5min进行蒸汽爆破处理；
[0030](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I: 10(w/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0031](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为lOOODa，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0032](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以石油醚(0.01)、乙醚(2.9)、二氯甲烷(3.4)、氯仿(4.4)。依次进行萃取，最终得到氯仿萃取物即为漆酶天然介体。
[0033]实施例3
[0034](I)木质纤维素原料汽爆预处理:原料切至约3-5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1:2(W/W)混合，放入汽爆罐，在1.8MPa压力下维压5min进行蒸汽爆破处理；
[0035](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I: 15(ff/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0036](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为3000Da，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0037](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以正己烷(0.06)、乙醚(2.9)、二氯甲烷(3.4)、乙酸乙酯(4.3)依次进行萃取，最终得到乙酸乙酯萃取物即为漆酶天然介体。
[0038]实施例4
[0039](I)木质纤维素原料汽爆预处理:原料切至约3-5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1: 1.5(W/W)混合，放入汽爆罐，在1.5MPa压力下维压1min进行蒸汽爆破处理；
[0040](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I: 15(ff/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0041](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为5000Da，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0042](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以石油醚(0.01)、乙醚(2.9)、乙酸乙酯(4.3)依次进行萃取，最终得到乙酸乙酯萃取物即为漆酶天然介体。
[0043]实施例5
[0044](I)木质纤维素原料汽爆预处理:原料切至约3_5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1:2(W/W)混合，放入汽爆罐，在2.0MPa压力下维压2min进行蒸汽爆破处理；
[0045](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I: 15(ff/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0046](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为500Da，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0047](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以石油醚(0.01)、甲苯(2.4)、二氯甲烷(3.4)、乙酸乙酯(4.3)依次进行萃取，最终得到乙酸乙酯萃取物即为漆酶天然介体。
[0048]实施例6
[0049](I)木质纤维素原料汽爆预处理:原料切至约3_5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1:1(W/W)混合，放入汽爆罐，在1.6MPa压力下维压5min进行蒸汽爆破处理；
[0050](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I:5(ff/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0051](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为lOOODa，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0052](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以正己烷(0.06)、甲苯(2.4)、二氯甲烷(3.4)、氯仿(4.4)依次进行萃取，最终得到氯仿萃取物即为漆酶天然介体。
[0053]实施例7
[0054](I)木质纤维素原料汽爆预处理:原料切至约3-5cm，并以去离子水水洗3边去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1: 1.5(W/W)混合，放入汽爆罐，在1.8MPa压力下维压3min进行蒸汽爆破处理；
[0055](2)汽爆预处理水洗液的制备:上述得到的汽爆预处理原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为I: 10(ff/ff)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液；
[0056](3)水洗液膜过滤分级分离:步骤(2)中得到水洗液以膜过滤装置，选取膜的分子量为lOOODa，分别收集膜截留组分和膜过滤组分；
[0057](4)膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离:步骤(3)中得到的膜分级分离组分，分别以石油醚(0.01)、甲苯(2.4)、二氯甲烷(3.4)、氯仿(4.4)。依次进行萃取，最终得到氯仿萃取物即为漆酶天然介体。
【主权项】
1.本发明所述的一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法，包括如下步骤: I)木质纤维素原料汽爆预处理，得到汽爆木质纤维素原料;2)步骤I)中得到的汽爆木质纤维素原料，经水洗制备汽爆水洗液;3)汽爆水洗液膜过滤分级分离;4)步骤3)中得到的水洗液膜过滤组分，以不同极性有机溶剂进行连续萃取分级分离，即得到漆酶天然介体。2.根据权利要求1所述的一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法，其特征在于木质纤维素原料切至约3-5cm，并以去离子水水洗三遍去除泥土和灰尘等。切短的原料与水按照固液比1: 0.5?1: 2 (W/W)混合，放入汽爆罐，在1.0?2.0MPa压力下维压2?1min进行蒸汽爆破处理，即得到汽爆木质纤维素原料。3.根据权利要求1所述的一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法，其特征在于汽爆木质纤维素原料加入蒸馏水浸泡进行水洗，重复水洗三次，合并水洗液，调节最终汽爆原料干重与水洗液的固液比为1:5?1:15(W/W)，水洗液离心去除固体杂质，得到汽爆预处理水洗液。4.根据权利要求1所述的一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法，其特征在于汽爆水洗液以膜过滤装置按照不同分子量进行分级分离，得到膜分级分离组分。5.根据权利要求1所述的一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法，其特征在于膜分级分离组分按照有机溶剂极性的大小依次进行连续萃取，即得到富含酚类物质的漆酶天然介体。6.根据权利要求2所述的木质纤维素原料包括:玉米秸杆、麦杆、稻杆、木材、林地荒草。7.根据权利要求4所述的过滤膜分子量范围500?5000Da。8.根据权利要求5所述的有机溶剂包括:石油醚、正己烷、甲苯、乙醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿。
【专利摘要】本发明涉及一种从木质纤维素原料汽爆水解液中分离漆酶天然介体的方法。包括以下步骤：木质纤维素原料汽爆预处理；汽爆预处理水洗液的制备；水洗液膜过滤分级分离；膜过滤组分有机溶剂连续萃取分级分离，即得到富含酚类物质的漆酶天然介体“鸡尾酒(cocktail)”。此发明充分利用木质纤维素原料水解液中多种天然介体共存的特点，克服现有方法中天然介体分离纯化成本高、单一介体催化效率低的问题，从而有望降低漆酶天然介体的分离成本，并提高介体的催化效率。
【IPC分类】C07C37/54
【公开号】CN105566070
【申请号】CN201510965211
【发明人】邱卫华, 韩业君
【申请人】中国科学院过程工程研究所
【公开日】2016年5月11日
【申请日】2015年12月21日