一种同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法
【专利摘要】本发明属于中草药的加工领域，具体涉及一种同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法。本发明通过将巴戟天全根干粉过80目筛后，按料液比1g:37ml加入体积分数为37%的乙醇溶液进行提取，提取温度为60℃，提取时间77min，同步获得含有蒽醌和多糖的提取液，最后经分离纯化分别得到蒽醌和多糖。在此条件下，测得巴戟天蒽醌最高提取率达到85%、多糖提取率为70%。该工艺同步提取巴戟天中的蒽醌和多糖提取率较高，同时大大提高原料利用率、缩短提取时间、减少提取成本，大规模减少试剂用量而实现环保、同步提取有效成分。
【专利说明】
-种同步提取己戟天中蔥酿和多糖的方法
技术领域
[0001] 本发明属于中草药的加工领域，具体设及一种同步提取己戟天中蔥酿和多糖的方 法。
【背景技术】
[0002] 己戟天(似OfficinaJis 别称鸡肠风、S角藤、鸡眼藤等，为茜草科多年生 藤本植物，长3~13畑1，宽1.5~5cm，前端短渐尖，基部纯形或圆形。己戟天的干燥根呈扁圆柱 形，略弯曲。盛产于福建、广东、海南、广西等热带和亚热带地区。生于山地疏、密林下和灌丛 中，常攀于灌木或树干上，亦有引作家种。药用植物，主治阳瘦遗精、宫冷不孕、月经不调、少 腹冷痛、风湿搏痛、筋骨瘦软。其化学成分有蔥酿类化合物、糖类、氨基酸类、微量元素等。根 含蔥酿类成分有甲基异茜草素，甲基异茜草素-1-甲酸，大黄素甲酸，2-径基径甲基蔥酿，1- 径基蔥酿，1-径基-2-甲基蔥酿，1，6-二径基-2，4-二甲氧基蔥酿，1，6-二径基-2-甲氧基蔥 酿，2-甲基蔥酿，还含环締酸祗成分;水晶兰武，四乙酷车叶草武。又含葡萄糖，甘露糖，0-谷 酱醇，栋桐酸及维生素C，十九烧，24义基胆酱醇。根皮含锋、儘、铁、铭等23种元素。
[0003] W往的工业提取，都是分别从己戟天中提取出蔥酿和多糖，运样周期很长、材料需 求量大，化学试剂用量大，有惇节能减排的宗旨。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种同步提取己戟天中蔥酿和多糖 的方法。本发明先同时提取出蔥酿和多糖，测得己戟天蔥酿最高提取率达到85%、多糖提取 率为70%，再对提取液进行分离操作。优化后的工艺工序少、周期短、节约材料。
[0005] 为实现本发明的目的，采用如下技术方案： 一种同步提取己戟天中蔥酿和多糖的方法:将己戟天全根干粉过80目筛后，按料液比 Ig: 37ml加入体积分数为37%的乙醇溶液进行提取，提取溫度为60°C，提取时间77min，获得 含有蔥酿和多糖的提取液，最后经分离纯化分别得到蔥酿和多糖。
[0006] 所述的分离纯化为将获得的提取液W4500r/min离屯、Smin后，加入无水乙醇至提 取液中乙醇体积分数为80%，4°C条件下静置2地后，再W4500r/min离屯、lOmin，分离得到蔥 酿溶液W及多糖沉淀物;将蔥酿溶液进行减压蒸发浓缩至原液体积的1/100,预冷至1-3°C 后冷冻干燥并密封保存;多糖沉淀物加少量蒸馈水溶解后蒸发除乙醇，预冷至1-3°C后冷冻 干燥并密封保存。
[0007] 本发明与现有技术比较具有W下优点： 本发明对乙醇溶液同步提取己戟天中蔥酿和多糖的工艺进行了优化，先同时提取出蔥 酿和多糖，测得己戟天蔥酿最高提取率达到85%、多糖提取率为70%，再对提取液进行分离操 作，即可分别得到蔥酿和多糖。优化后的工艺工序少、周期短，并且提取率较高，同时大大提 高了原料利用率、缩短提取时间、减少提取成本。
【附图说明】
[0008] 图1提取溫度对蔥酿和多糖得率影响曲线图； 图2提取时间对蔥酿和多糖得率的影响曲线图； 图3乙醇溶液体积分数对蔥酿和多糖得率的影响曲线图； 图4料液比对蔥酿和多糖得率的影响曲线图。
【具体实施方式】
[0009] 为进一步公开而不是限制本发明，W下结合实例对本发明作进一步的详细说明。 [001日]单因素试验 分别W提取溫度、提取时间、乙醇体积分数和料液比为单因素变量，提取次数为1次，提 取后计算得率，进行单因素试验，并重复=次试验。
[0011] 、提取溫度单因素试验 准确称取己戟天全根干粉lOOg，W体积分数40%乙醇溶液为提取液，固定料液比为1:35 (g/ml)，提取时间为70 min，提取次数为1次，并进行3次重复实验，考察提取溫度为40°C、45 °C、50°C、55°C、60°C、65°C对蔥酿和多糖提取率的影响。
[0012] 试验结果如图1所示，随着提取溫度的增加，蔥酿和多糖的溶解量都增加，由于溫 度超过60°C后，多糖的生物活性会急剧下降，故W60°C为最佳提取溫度。
[OOU]、提取时间单因素试验 准确称取己戟天全根干粉lOOg，W体积分数40%乙醇溶液为提取液，固定料液比为1:35 (g/ml)，水浴溫度60°C，提取次数为1次，并进行3次重复实验，考察提取时间为40min、 5〇111111、6〇111111、7〇111111、8〇111111、9〇111111对蔥酿和多糖提取率的影响。
[0014] 试验结果如图2所示，随着提取时间的延长，己戟天蔥酿和多糖逐渐溶解出来，两 物质提取率均呈上升趋势，溶解速度先慢后快，蔥酿在SOmin时基本达到最大值，SOmin- 90min基本保持不变，多糖提取率在70min时达到最大值。考虑到工业生产时间、成本问题， 故可选70min作为提取时间。
[0015] 、乙醇溶液体积分数试验 准确称取己戟天全根干粉lOOg，固定料液比为l:35(g/ml)，水浴溫度60°C，提取时间 为70min，提取次数为1次，并进行3次重复实验，考察乙醇溶液体积分数分别为25%、30%、 35%、40%、45%、50%时，对蔥酿和多糖提取率的影响。
[0016] 试验结果如图3所示，随着乙醇体积分数增加，蔥酿的提取量增加，当乙醇体积分 数为40%时达到最大值，之后随着乙醇体积分数增加，蔥酿提取量减少。运是因为不同体积 分数的乙醇溶液具有不同的极性，根据相似相容原理，乙醇体积分数较小时，极性较强，提 取出来的物质种类比较多，所W不太利于蔥酿的提取，乙醇体积分数较大时，极性较弱，醇 溶性杂质和脂溶性杂质都被溶解出来，提取效果也不理想；另一方面，乙醇体积分数大于 40%时，水溶性蔥酿的溶解能力就会减弱。所W在乙醇体积分数为40%时，蔥酿的提取率最 大。因为多糖是水溶性物质，所W多糖在乙醇体积分数较小时溶出量比较大，随着乙醇浓度 的增加，多糖的溶出量逐渐减少。
[0017] 、料液比单因素试验 准确称取己戟天全根干粉100g，W体积分数40%乙醇溶液为提取液，水浴溫度60°C，提 取时间为70min，提取次数为1次，并进行3次重复实验，考察提取料液比为1:25、1:30、1:35、 l:40、l:45、l:50(g/ml)，对蔥酿和多糖提取率的影响。
[0018] 试验结果如图4所示，己戟天蔥酿和多糖逐渐溶解出来，溶解速度逐渐变缓慢，在 料液比为1:35 g/ml时蔥酿、多糖提取率达到最大值。
[0019] 单因素试验得出的最佳提取因素条件如下表1所示。
[0020] 表1单因素试验得出的最佳提取因素条件
5、响应面优化提取工艺 依据Box-Behnken中屯、组合实验设计原理，结合单因素试验的结果，选取提取溫度、提 取时间、乙醇体积分数、料液比四个主要考察因素，分别用A、B、C、D表示，W蔥酿及多糖的提 取率为响应值。试验因素水平见表2。
[0021] 表2试验因素与水平
实验设计各结果见表3。 1 表3联合提取工艺实验方案及实验结果
采用Design Expert软件将响应值和各个因素进行多元回归拟合，得出影响因素的一 次效应、二次效应及多次效应的响应面的回归模拟方程。
[0023] 蔥酿提取率的回归模拟方程为： Y=+77.01+10.01*A+2.73 地+1.39*C+1.98蝴-0.18*A*B-0.55*A*C+0.75*A*D+0.016 地水 C+0.10地蝴巧.265E-003*OD-l. 59*A2-1.54地2-3.58地2-1.75蝴2; 式中：Y代表蔥酿的提取率;A、B、C、D分别代表提取溫度、提取时间、乙醇体积分数和料 液比。
[0024] 多糖提取率的回归模拟方程为： Y=+62.37+4.81*A+2.12 地-6.47*C+0.75蝴+0.45*A*B-0.59*A*C+0.27*A*D-0.36 地水 C+ 0.068地蝴-0.14*OD-l. 74*A2-2.14地2-1.87地2-2.77蝴2; 式中：Y代表多糖的提取率;A、B、C、D分别代表提取溫度、提取时间、乙醇体积分数和料 液比。
[0025] 蔥酿提取率回归模拟的方差分析表如下表4。
[00%]表4蔥酿提取率回归模拟的方差分析表
多糖提取率回归模拟的方差分析表如下表5。
[0027]表5多糖提取率回归模拟的方差分析表
对蔥酿回归模型进行方差分析，其结果见表4,整体模型达到了极显著水平，即P< 0.0001，表明该二次方程具有极显著性;模型失拟项P=O. 1434,不显著，表明该方程式对实 验拟合性较好;模型调整后的拟合系数R2=O. 9626〉0.85，表明该模型拟合优良度较高;模型 变异系数(CV)为2.91%，说明响应值的重复性好;信噪比为27.702〉〉4，精度足够高。由此表 明该模型与实际实验拟合程度良好，误差小，可W用此模型对试验结果进行分析和预测。 [002引由回归模型的系数显著性检验可知，模型的一次项A、B、D及二次项A2B2C 2D2对己 戟天中蔥酿提取的线性效应影响极显著，一次项C对己戟天中蔥酿的线性效应影响显著； 各因素对蔥酿提取率影响大小为提取溫度、提取时间、料液比、乙醇体积分数。由此表明该 回归模型能够较好地描述各因素与响应值之间的真实关系，可W用其确定最佳工艺条件。
[0029] 对多糖回归模型进行方差分析，其结果见表5,整体模型达到了极显著水平，即P< 0.0001，表明该二次方程具有高度显著性;模型失拟项P=O.8183,不显著，表明该方程式对 实验拟合性较好;模型调整后的拟合系数R2=O. 8956〉0.85，表明该模型拟合优良度较高;模 型变异系数(CV)为5.04%，说明响应值的重复性好;信噪比为14.286〉〉4，精度足够高。由此 表明该模型与实际实验拟合程度良好，误差小，可W用此模型对试验结果进行分析和预测。
[0030] 由回归模型的系数显著性检验可知，模型的一次项A、C及二次项A2B2C2D 2对己戟天 中多糖提取的线性效应影响极显著，一次项B对己戟天中多糖的线性效应影响显著;各因素 对多糖提取率影响大小为乙醇体积分数、提取溫度、提取时间、料液比。由此表明该回归模 型能够较好地描述各因素与响应值之间的真实关系，可W用其确定最佳工艺条件。
[0031] 溶剂提取法是传统方法中从成分复杂的天然药物中提取活性成分的最主要方法。 本设计的实验采用乙醇溶液水浴联合提取过80目筛己戟天全根干粉中的蔥酿与多糖，经响 应面分析法优化后W水浴提取溫度60°C、提取时间77min、乙醇体积分数37%、料液比1:37 (g/ml)为最佳提取条件进行蔥酿和多糖的提取，提取后于4500r/min离屯、Smin得到的提取 液并加入无水乙醇至乙醇体积分数为80%，并于4 °C冰箱中静置2地后4500r/min离屯、IOmin， 分离得到蔥酿溶液W及多糖沉淀物。将蔥酿溶液进行减压蒸发浓缩至原液体积的1/100,预 冷至1-3°C后冷冻干燥并密封保存;多糖沉淀物加少量蒸馈水溶解后蒸发除乙醇，预冷至1- 3 °C后冷冻干燥并密封保存。
[0032] W上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与 修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【主权项】
1. 一种同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法，其特征在于：将巴戟天全根干粉过80目 筛后，按料液比Ig: 37ml加入体积分数37%的乙醇溶液进行提取，提取温度为60°C，提取时间 77min，获得含有蒽醌和多糖的提取液，最后经分离纯化分别得到蒽醌和多糖。2. 根据权利要求1所述的同步提取巴戟天中蒽醌和多糖的方法，其特征在于:所述的分 离纯化为将获得的提取液以4500r/min离心Smin后，加入无水乙醇至提取液中乙醇体积分 数为80%，4°C条件下静置24h后，再以4500r/min离心10min，分离得到蒽醌溶液以及多糖沉 淀物。
【文档编号】A61K36/746GK105924540SQ201610540327
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年7月11日
【发明人】黄群, 安凤平, 宋洪波, 滕慧, 陈雷, 王艺伟, 许美玉
【申请人】福建农林大学