双层细胞筛选培养芯片的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种新型细胞筛选和培养用芯片，从使用上讲，是生物医学工程方面细胞培养观察用的一种双层细胞筛选培养芯片。
技术背景
[0002]微流控芯片技术目前在生物学领域应用十分广泛，特别是在细胞学及分子生物学的科学研宄中，大量地使用了微流控技术。近年来，微流控芯片在细胞生物学研宄中的一些主要应用，包括细胞的培养、分选、裂解、凋亡、计数、迀移、单细胞捕获和细胞间相互作用等。在生物医学工程实验室科学研宄中，常常也会遇到对于血液细胞等多种细胞的分离和相同环境下增殖培养的比较研宄实验，以及对于同种细胞在不同条件下的因素刺激下的比较研宄实验，例如:药物、图案、生长因子、微环境的二氧化碳量等等变化因素。上述实验如果采用目前生物细胞实验中使用常规细胞培养皿或多孔板，则由于人工操作误差的影响，对实验的一致性和同一性方面的保证方面，具有一定难度和实验困难。如果采用微流控芯片技术，则有望大大降低保证实验的同一性和一致性的难度，同时，也可以替代目前常规的细胞培养器皿，来满足细胞的分离、培养、条件对比实验。
[0003]因此，借鉴微流控芯片技术，需要开发一种用于科学实验研宄用的，培养观察、实验对比用的一种细胞筛选培养微流控芯片。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型的目的在于提供结构简单便于制作，用于细胞科学实验研宄的、培养、观察、实验对比用的一种细胞筛选培养微流控芯片。
[0005]为了解决上述问题，本实用新型的技术方案为:一种双层细胞筛选培养芯片。其特征在于:双层芯片体由上下大小尺寸一致的上层芯片和下层芯片两层组成，并粘贴固定在硬质载片上。这样设计，便于芯片体细胞培养/分选单元的结构功能的加工。双层芯片体呈长方形，在下层芯片的上面，加工有相互盘绕成圆形的细胞培养分区A和细胞培养分区B ;在双层芯片体的上层芯片的下面，与圆盘形的细胞培养分区A和细胞培养分区B的细胞培养分区墙正上方的位置，加工有相对应的相互盘绕成圆盘形的进样通道和出样通道。圆盘的设计，一是为了增加筛选通道的长度，二是将筛选和细胞培养池集成结合，以充分利用芯片的地方。
[0006]所述圆盘形的细胞培养分区A和细胞培养分区B与圆盘形的进样通道和出样通道共同组成了细胞培养/分选单元，这种模块化设计，一是便于模板的统一设计和加工，二是便于开发和布局多种样式的双层细胞筛选培养芯片。
[0007]所述细胞培养/分选单元，在双层芯片体上排布第一个的，其圆形外面的进样通道的端头，加工有进样孔。出样通道伸出圆形细胞培养/分选单元后与连接通道相连，连接通道再连接第二个细胞培养/分选单元的进样通道；依次类推，I个双层芯片体共连接2- 6个细胞培养/分选单元。也就是说，有2个的、3个的、4个的、5个的、6个的共5种不同细胞培养/分选单元排布的双层细胞筛选培养芯片。最后一个的细胞培养/分选单元的出样通道，伸出圆形细胞培养/分选单元后与出样孔相通。每个细胞培养/分选单元的圆盘形的细胞培养分区A和细胞培养分区B，在各自圆盘的靠圆盘外侧的边处和圆盘中心处，都加工有细胞培养分区A进口孔，细胞培养分区A出口孔，和细胞培养分区B进口孔，细胞培养分区B出口孔。这样设计，便于细胞培养分区A、B的培养液、气体、实验药物或生长因子的加入，便于细胞的对比实验。
[0008]所述每个细胞培养/分选单元的进样通道和出样通道的两侧，加工有双侧宽度尺寸一致的细胞筛选孔。这样设计，可以使不同大小的细胞通过细胞筛选孔筛选，分别在细胞培养分区A和细胞培养分区B培养。细胞筛选孔的宽度尺寸，分别为10 μ m/10 μ m—组，20 μ m/20 μ m 一组，50 μ m/50 μ m 一组，80 μ m/80 μ m 一组，100 μ m/100 μ m 一组。
[0009]上述技术方案中，所述进样通道、出样通道、连接通道的尺寸在同一个双层芯片体上统——致；它们的宽X深的统一尺寸有:10Χ50μπι，50Χ50μπι，100Χ50μπι，10 X 100 μ m，50 X 100 μ m，100 XlOOym两个规格的深度，3个规格的宽度。这便于芯片的加工，芯片规格的制定和实验的选用。
[0010]上述技术方案中，所述上层芯片下面的进样通道和出样通道，与下层芯片上面的细胞培养分区A和细胞培养分区B通过细胞筛选孔相通；所述细胞培养分区A和细胞培养分区B的深度尺寸H，在同一个双层芯片体上统一一致，这样保证了芯片规格的统一。在同一个双层芯片体上，进样通道、出样通道、连接通道的深度h，尺寸是细胞培养分区A和细胞培养分区B的深度H的1/2，这样设计，是充分考虑细胞培养室的通气空间。
[0011]本实用新型技术特点是制作方便，专业性更强。
[0012]与现有的微流控细胞培养芯片相比，本实用新型有下列有益效果:(1)功能单元的模块化和集成化更高，可以通过不同连接管，变化出多种具有筛选/培养功能的芯片，适合实验室的不断变化的科学研宄的需要；(2)每个功能区分为A、B两处，一片芯片就可以同时进行2-6个不同细胞样本或4-12个条件因素的实验，大大提高了实验效率；(3)制作方便简单，使用成本低廉，节约成本。
【附图说明】
[0013]图1为本实用新型有2个细胞培养/分选单元的芯片体示意图。
[0014]图2本实用新型细胞培养/分选单元的局部A-A剖视示意图。
[0015]图3为本实用新型细胞培养/分选单元的上层芯片的加工形貌示意图。
[0016]图4为本实用新型细胞培养/分选单元的下层芯片的加工形貌示意图。
[0017]图中:1.双层芯片体；2.细胞培养/分选单元；3.细胞培养分区B进口孔；4.细胞培养分区A进口孔；5.进样通道；6.进样孔；7.出样通道；8.细胞培养分区A出口孔；
9.连接通道；10.细胞培养分区B出口孔；11.细胞培养分区A ; 12.细胞培养分区B ; 13.细胞筛选孔；14.出样孔；15.下层芯片；16.上层芯片；17.细胞培养分区墙。
【具体实施