用于稳定包含微生物的药物施用形式的方法

专利名称：：用于稳定包含微生物的药物施用形式的方法用于稳定包含^:生物的药物施用形式的方法本发明涉及用于稳定包含至少一种微生物的固体药物施用形式的方法，及含包装和含至少一种微生物的固体药物施用形式的袋。微生物常存在于固体药物施用形式中，后者可被口服、阴道或肛门施用。因此，例如，益生菌微生物在口服施用的药物中使用以改善或消除由于被扰乱或破坏的肠内菌丛引起的症状。进一步的实施例是包含微生物培养物的阴道栓剂，例如嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)菌株，其使用为了稳定阴道菌丛，并使得尿道感染复发频率降低(ReidG.等人乳酸菌阴道栓剂三天的抗微生物治疗对尿道感染复发的影响，ClinTher1992;14:11-6)。为了使制剂有效，制剂中的微生物在施用时以活的形式存在且能够繁殖是必要的。在包含微生物的药物施用形式的制备期间和接下来的贮存期间的目标因此是尽可能地维持存在的微生物的活性。用于制备和贮存包含微生物药物的方法是现有技术已知的。因此，例如，EP0131114A1描述了通过将细菌混悬液加之于粉状或颗粒状栽体材料之后将其干燥的乳酸菌制剂。在制备后，该制剂被引入无氧的保护气氛的包装中以便在贮存期间保持微生物的活性。DE19819475描述了用于微生物培养物的干燥方法，其称提高了培养物的长期贮存稳定性。所针对的靶质量是在被干燥材料中的水活性(aw)小于0.15。为了实现该耙质量，被干燥材料必须在流化床工艺中干燥，和/或必须加入具有aw值<0.01的辅剂。因以下原因中的至少一种，用于提高贮存稳定性的现有技术的已知方法是不能令人满意的1.方法在技术上非常复杂；2.对辅剂的水活性要求太高；3.施用形式的贮存稳定性太低；4.方法在商业上太昂贵；5.方法对微生物培养物和/或辅剂及活性化合物造成热破坏。本发明的目的是提供不再有现有技术所述缺点的方法。特别地，本方法实施起来简单且花费不高，允许使用任何水活性的辅剂，不会引起微生物和包含其的施用形式的热应变，且具有在药物的整个贮存期间即直至患者服用基本保持微生物活性的作用。令人惊异地，该目标通过将包含已按照现有技术制备的微生物的固体施用形式引入至吸收剂和至少一种通道形成剂是嵌入其内壁区域的至少部分中的包装中可以实现。本发明因此涉及用于稳定包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的方法，其特征在于固体药物施用形式被引入到吸收剂和至少一种通道形成剂嵌入其内壁的至少部分区域的包装中。在将固体药物施用形式引入至该包装中以后，后者例如以盖的形式封口。内壁意思是包装壁的内表面，即与存在其中的固体药物施用形式接触的包^面。该方法可用于所有在室温是固体物理状态且将用于例如口服、肛门或阴道施用的所有固体药物施用形式。所有在去除包装后直接施用的固体药物施用形式诸如例如，片剂、糖衣丸、硬胶嚢、颗粒、小丸、粉剂、小丸、栓剂、及在施用前可必须转化为可施用形式的诸如，例如，干汁，例如在施用前必须转变成溶液的粉末形式均包括在内。药物施用形式优选地是片剂、糖衣丸、硬胶嚢、颗粒产品、栓剂、小丸剂或粉剂。硬胶嚢有未加增塑剂的壳，可分为上、下部分，并由例如明胶或淀粉组成。上下文中〗吏用的药物施用形式意思是已知用于人类或动物施用的各种技术施用形式的术语，药物施用形式的表达因此与个别的法律状态无关，且绝不限于药物、成分，其可能存在各种物质，诸如，例如药物、食物增补剂和/或功能性成分。用于本发明目的的药物施用形式的实例可以是药物和食物增补剂的形式。可存在的^:生物是通常其自身存在于健康人体或动物身体或对健康、损伤或患病人体或动物身体具有健康促进作用的微生物。可存在的微生物是例如，细菌、真菌和/或酵母菌。优选的孩支生物是活的酵母菌，诸如，例如布拉酵母菌(Saccharomycesboulardii)、和/或细菌，特别优选细菌，非常特别优选地是益生菌，诸如例如，乳酸杆菌(lactobacilli)、双歧杆菌(bifidobacteria)和/或链球菌(streptococcic本文特别优选地给出以下菌林干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、双歧乳杆菌(Lactobacillusbifidum)、力口氏孝L軒菌(Lactobacillusgasseri)、植物^L杆菌(Lactobacillusplantarum)、约翰逊氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)、鼠李泮唐專L軒菌(Lactobacillusrhamnosus)、发酵享L軒菌(Lactobacillusfermentum)、副干赂專L軒菌(Lactobacillusparacasei)、巻曲乳軒菌(Lactobacilluscrispatus)、长双歧杆菌(Bifidobakteriumlongum)、两岐双岐杆菌(Bifidobakteriumbifidum)、长双歧杆菌、乳双岐杆菌(Bifidobakteriumlactis)、短双岐杆菌(Bifidobakteriumbrevis)、动物双岐杆菌(Bifidobakteriumanimals)、青春双岐杆菌(Bifidobakteriumadolescentis)、婴儿双岐杆菌(Bifidobakteriuminfantis)、嗜热链球菌(Bifidobakteriumthermophilus)和/或享Lt酸乳球菌(Lactococcuslactis)。适合的包装是聚合物容器。吸收剂和通道形成剂可一同存在，不论直接在聚合物形成容器的内壁中或可贴一层在聚合物容器的内壁上。吸收剂和通道形成剂可同样地嵌入嵌体，其作为惰性层引入到包装内，以便至少包装的部分内壁用其衬着。为了本发明的目的，容器是单剂量容器，诸如例如泡罩袋，和多剂量容器，诸如例如，旋盖容器或片剂管。可用作吸收剂和通道形成剂的混合物的聚合物是，特别地，热塑性塑料诸如例如，聚烯烃，诸如聚乙烯和/或聚丙烯、聚异戊二烯、聚丁二烯、聚丁烯、聚珪氧烷、聚酰胺、乙烯-醋酸乙烯共聚物、乙烯-甲基丙烯酸共聚物、聚苯乙烯、聚酯、聚酸酐、聚丙晞酸酯腈、聚磺酸酯、聚酯酰胺、聚丙烯酸酯、丙烯-马来酸酐、聚乙烯-马来酸酐、聚乙烯-氛基甲酸乙酯、聚乙烯-乙基乙烯醇、聚乙烯-尼龙和/或聚氨基甲酸乙酯。在其内表面提供以吸收剂和通道形成剂的这些壁具有基于聚合物混合物、通道形成剂和吸收剂的总重，以重量计聚合物含量为10-90%。存在的吸收剂基本上是任何形式的干燥剂，即结合水分的结合剂。可考虑这样三类干燥剂第一类包含与水形成水合物的化学物质。这种类型的化学物质的实例是无水盐，倾向于吸收水分或湿气并在此过程中形成稳定的7jc合物。水分被结合，且可通过化学反应防止其释放。第二类干燥剂包含反应性物质。这类物质与水或湿气反应形成新物质。新形成的物质通常在低温下稳定，需要消耗高的能量才能逆转。此类干燥剂主要用于干燥溶剂且在聚合物中作为水吸附材料，其自身必须保持水分还原状态。第三类干燥剂通过物理吸附结合水分。干燥剂包含具有可吸收水分的细毛细管的颗粒。本文千燥剂中的毛细管的孔径及其密度决定了其吸收特性。此类型的干燥剂的实施例是分子篩、珪胶、某些合成聚合物诸如例如，用于婴儿尿布的那些和淀粉。第三类干燥剂优选地存在于包装中因为它们基本上是惰性的且是水不溶性的。具有3至15埃孔径的分子筛和/或有24埃孔径的硅胶在这里是特别优选的。可考虑的通道形成剂是亲水性物质，诸如例如，聚合醇、乙基乙烯醇、甘油、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、乙烯吡咯烷酮、N-甲基吡咯烷酮、多糖、糖类和/或糖醇。优选的聚合醇是聚乙二醇和/或聚丙二醇。可使用的糖是例如葡萄糖、甘露糖、半乳糖和/或果糖。适合的糖醇是例如，甘露醇、山梨醇、己糖醇、半乳糖醇、木糖醇、核糖醇和/或赤藓糖醇。多糖是指例如糊精和/或羟基化淀粉。在内壁中提供以吸收剂和通道形成剂，通道形成剂可以有基于聚合物、通道形成剂和吸收剂的混合物总重的以重量计的10-40%的比例。吸收剂和通道形成剂被嵌入容器的部分区域或全部区域的内壁中。区域的部分意思是形成内壁的容器的总区域的至少部分包含吸收剂和通道形成剂。在整个区域意思是形成内壁的整个区域包含吸收剂和通道形成剂。根据优先的实施方案，吸收剂和通道形成剂至少存在于基于容器总内表面的至少10%、优选地至少50%、特别优选地至少90%的内壁。包含吸收剂和通道形成剂的的聚合物及用其制备的容器，容器可根据本发明的方法用作包装，是现有技术已知的并描述于例如，W097/32663Al、EP1000873A2和WO03/086卯0Al、EP1421991A1、WO00/76879中。可用于本发明方法的包装可商购，且可例如由CapitolSpecialtyPlasticsInc.,2039McMilanStreetAuburn,Alabama,USA,其商品名为Activ-Vial，或由StidChemieOstenriederStr.15，85368Moosburg，德国，以商品名2APMultipolymer提供。根据本发明的方法能够使稳定的、包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的供给不昂贵。这些可使用不昂贵的原材料制备，而这些不昂贵的原材料按照现有技术由于其高水活性值或在转化成药物施用形式前和/或后必需另外的干燥步骤是不能作为起始材料的。令人惊异地，根据本发明的方法亦能够提供包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的可上市产品，此前因为现有技术其不充分的贮存稳定性不适于上市。在施用形式转移至包装中后，水持续地长时间地由包装内壁中存在的吸收剂被从施用形式中去除。水分的去除发生在大面积区域和温和的条件下，且因此可使固体药物施用形式在其贮存期间稳定。包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的稳定化，使用与根据本发明相当的方法，甚至在制备后干燥可能不易实现，因为比较温和的条件下延长干燥时间从时间和成本方面的原因不能实施，且升温干燥导致药物施用形式的破坏，特别是存在其中的微生物。根据本发明的方法的稳定化作用U于包装对固体药物施用形式的影响，其因此可以提供贮存稳定的形式。根据本发明的作用的实现需要固体药物施用形式存在于该包装中，即施用形式和包装一同在一个袋子中。本发明因此亦涉及包含至少一种通道形成剂在至少部分区域与至少一种吸收剂被嵌入其内壁的包装，并包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式，如上下文中所描述。袋子可包含含至少一种微生物培养物的任何固体药物施用形式。根据本发明优选的实施方案，袋子包含，如固体药物施用形式的，是为了口服施用的固体药物施用形式，特别是片剂、糖衣丸、硬胶嚢、颗粒产品、栓剂或粉剂。存在于袋中的药物施用形式可包含任何数量的为了各自目的微生物。存在于袋中的固体药物施用形式优选地包含103至1012，特别优选地105至1011，且非常优选地107至10"益生微生物。口服施用后，益生微生物在其健康促进作用在人或动物小肠实现之前通过胃期间大大地失活。为了确保益生微生物在人体和动物小肠充分高的活性，因此对存在于袋中的固体口服药物施用形式优选地提供以衣层，该衣层保护微生物在通过胃期间不失活，然后溶解于小肠，以使;微生物在小肠得到^^放。适当的衣层是所有系统，优选pH-控制的，诸如例如，抗胃液衣层，即用在酸性胃液中不溶且在(更碱性的)小肠中是可溶的的材料制备的衣层，或时间控制的衣层，即在口服施用给人和动物后预定的时间段后衣层溶解，与环境的pH无关，^没定该时间段使其对应于施用形式从制剂消化至其到达小肠耙部位的时间。或者，微生物本身而非整个固体药物施用形式亦可被提供以保护衣层。根据更为优选的实施方案，存在于袋中的固体药物施用形式，特别是如果其用于口力艮施用，除益生孩i生物以外还包含营养相关添加剂。可存在的营养相关的添加剂优选地是微生素、矿物质、微量元素、膳食纤维、酶、植物提取物、蛋白质、糖和/或脂肪。如果口服施用形式包含其消化早在胃中开始的营养相关的添加剂，诸如例如，蛋白质，重要的是这些营养相关添加剂至少不完全地被衣层包衣。包含益生微生物的口服药物施用形式及另外的营养相关添加剂是从EP931543A1中已知的。如本文所述，包含益生微生物连同所述的营养相关添加剂的制剂是不稳定的。为了提供包含益生微生物和营养相关添加剂的口服施用形式，可设想益生微生物和营养相关添加剂彼此分开地分布在多层片中的不同层中。为了实现好的稳定性，包含微生物的层应具有非常低的水含量，其可通过非常仔细地干燥微生物培养物和载体物质再将它们混合而实现。但是，微生物和载体物质的干燥及多层片制剂的前提条件在设备方面是复杂的且是费时的，并且在总体上导致高的生产成本。令人惊异地，已发现可以贮存稳定的形式提供包含至少一种微生物培养物和营养相关添加剂的固体药物施用形式，微生物和载体材料可无需预先干燥，且/或微生物和营养相关添加剂存在于各层中，在每种情况下是彼此分开的，通过将包含微生物和营养相关添加剂的固体药物施用形式引入至其内壁至少一种通道形成剂连同至少一种吸收剂被嵌入的包装中，得到包含所述包装和包含^L生物的固体药物施用形式的袋子。本发明因此亦涉及袋子，其包含在内壁至少一种通道形成剂连同至少一种吸收剂被嵌入至少部分区域的包装，和包含至少一种微生物培养物和至少一种营养相关添加剂的固体药物施用形式。营养相关添加剂和微生物可优先地彼此以混合物的形式不形成不稳定产物地存在于在袋中的药物施用形式存在。在现有技术中描述的对具有层状结构特别是多层片的限制并不适用。根据本发明优选存在于袋中的固体药物施用形式的维生素是维生素A(P-胡萝卜素)、类胡萝卜素、维生素D、维生素C、维生素E、复合维生素B和/或维生素K、及其有相当活性的相关化合物。可优选存在的复合维生素B是叶酸、四氢叶酸和/或其衍生物，特别是(6S)-四氢叶酸、5-甲基-(6S)-四氢叶酸、5-甲酰基-(6S)-四氢叶酸、10-甲酰基-(6R)-四氢叶酸、5，10-亚甲基-(6R)-四氢叶酸、5，10-甲炔基-(6R)-四氢叶酸和/或5-亚氨甲基-(6S)-四氢叶酸。维生素的量一般依赖于各种维生素推荐的最低所需剂量，尽管亦可超出均值的50%至300%。优选的范围对于维生素C在50和300mg之间，对于维生素E在10至50mg之间，对于维生素A为<1.5mg，对于复合维生素B为10Mg至20mg之间。根据本发明优选地可存在于袋中的固体药物施用形式的矿物质是无机或有机钠、钾、钓、镁、锌和/或铁盐，其适合于消费，并优选地以碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氯化物、氟化物、枸橼酸盐和/或乳酸盐。矿物质的比例，基于固体药物施用形式的总重，优选地以重量计从20至40%。固体施用形式优选地包含作为微量元素的硅、铬、镁、碘、钼和/或顿。根据本发明存在于袋中的固体药物施用形式的膳食纤维优选地是大豆麸、玉米麸、麦麸和/或全谷，特别优选地是大豆麸。膳食纤维的比例，基于固体药物施用形式的总重，优选地是2至50%的重量。优选的酶或辅酶是脂酶和/或蛋白酶或辅酶Q、超氧化物歧化酶和/或谷胱甘肽过氧化物酶，其可促进胃和/或小肠功能和/或代谢。这些可以本质上已知的量和本质上已知的形式引入。根据本发明的存在于袋中的固体药物施用形式可另外包含益生物质，优选为寡果糖和/或其他寡糖。优选的植物提取物是干燥的提取物，且本文特别是包含生物类黄酮、多酚类、植物雌激素类和/或皂苷类，诸如例如来自菊科(Echinaceae)的提取物。才艮据本发明的袋中的固体药物施用形式优选地包含，如蛋白质、大豆蛋白质和/或乳蛋白质和/或，如脂肪，包含多不饱和脂肪酸的脂肪。根据本发明的袋中的固体药物施用形式可另外根据实施方案包含传统辅剂和添加剂。辅剂和/或添加剂的选择亦依赖于袋中存在的固体药物施用形式要使用的所在国的食品管理法规。使用的辅剂和/或添加剂例如，对于片剂、多层片剂、糖衣丸、硬胶嚢、颗粒、小丸制剂和/或粉剂，是淀粉(例如玉米淀粉)、滑石粉、微晶纤维素、乳糖、高度分歉的二氧化硅、聚乙烯吡咯烷酮和/或纤维素粉末。可作为粘合剂和/或释放剂存在的另外的成分是糖，诸如例如，甘露醇、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、糊精、麦芽糊精和/或高岭土和/或纤维素衍生物，诸如例如，甲基纤维素、羟丙基纤维素和/或羟丙基甲基纤维素、和/或碳酸钩、硬脂酸钩、硬脂酸镁和/或硬脂酸甘油酯。另外，袋中的固体药物施用形式亦可包含染料、香料和/或芳香剂，及润滑剂、抗氧剂和/或稳定剂。这些基本物质的含量在一方面取决于益生微生物、维生素、酶、膳食纤维、等的靶含量，在另一方面取决于决定口服施用形式的机糸^/物理性质的标准，诸如例如，>^变、可压性、大小、颜色和/或形状。根据本发明的口服施用形式可用本领域技术人员已知的各种方法制备。这些方法是已知的，例如，H.Sucker,P.Fuchs,P.Speiser，"PharmaceutischeTechnologie"(药物才支术)，Stuttgart1978或K.H.Bauer,K.H,Fr6mming，C.Ftihrer，"PharmaceutischeTechnologie，，(药物技术)，Stuttgart1986。本文以参考文献的方式引入，并因此是公开的一部份。实施例解释本发明而非借此限制。实施例1:包含益生菌的与EP931543Al相似的3层片制备以重量计3%的细菌制剂(包含加氏乳酸杆菌、两歧双歧杆菌、长双歧杆菌)、10.5%重量的菊粉、8.6%重量的磷酸钓、5.7%重量的纤维素、2.3%重量的辅剂(崩解剂、释放剂)(第一层)、矿物质、微量元素、染料、崩解剂、释放剂、纤维素(第二层)和维生素、^t量元素、崩解剂、释》文剂和纤维素(第三层)(每种情况中是基于总片重的百分数)的混合物在E.Hata的3层压片机(旋转压片机)中相继压制，得到18mmx8mm的卵圆形3层片。得到的片剂接下来提供以膜包衣(包含羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和释放剂的水溶液)，衣层相应于11mg/cii^的片表面积为基于片芯重量的5%。得到包衣的3层片，每片重1050mg。贮存与检验在耐受性研究中检查膜衣片的稳定性。为此，膜衣片被引入通道形成剂与吸收剂一同嵌入内壁的包装(包装A)中或带螺旋盖的聚丙烯盒(包装B)中并贮存于40°C/75%r.h.。在预定的时间后，取出片剂，存在于每种情况的微生物是由Koch稀释倒平板法通过计数测定的。结果示于表1(三个批次的均值)。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>表l实施例2包含细菌、维生素和矿物质的片剂制备50%重量的山梨醇、7.7%重量的维生素混合物、24%重量的矿物质、3%重量的细菌制剂(包含加氏乳酸杆菌、两歧双歧杆菌、长双歧杆菌)、6%重量的释放剂、4.5%重量的染料、2.3%重量的酸化剂、2.2%重量的芳香剂和0.06。/。重量的甜p未剂的混合物在FetteEl偏心压片机中压制得到重量为1000mg、直径为15mm的孩i鼓的圆形片剂。与实施例1相似地进行贮存与稳定性试验。在此实施例中包装B是带螺旋盖和干燥剂袋的聚丙烯盒。结果示于表2中。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表2实施例3包含细菌制剂的颗粒细菌制剂是用明胶水溶液在GlattGPCG3制粒机(0.5mm喷丝头)制粒，入口空气温度为65。C、出口空气温度约45'C、喷液速度12g/min。实施例4包含细菌制剂的硬明胶胶嚢98%的细菌制剂、1%的抗坏血酸和1%的菊粉的混合物装入硬明胶胶囊(O号大小)中。实施例5包含细菌制剂的硬明胶胶嚢至少包含细菌制剂(包含干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、两岐双岐杆菌)的混合物"硬明胶胶嚢(0号)中。与实施例1相似地进行贮存与稳定性试验。在此实施例中包装B是有机聚合物/铝泡罩袋。结果示于表3中。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3实施例6包含细菌制剂的硬明胶胶嚢将包含细菌制剂(包含乳杆菌GG)、微晶纤维素和硬脂酸镁的混合物装入硬明胶胶嚢(0号)中。与实施例1相似地进行贮存与稳定性试验。结果示于表4中。<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>权利要求1.用于稳定包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的方法，其特征在于固体药物施用形式被引入到至少一种通道形成剂和至少一种吸收剂嵌入其内壁的至少部分区域的包装中。2.根据权利要求1的方法，其特征在于固体药物施用形式为片剂、糖衣丸、胶嚢、颗粒产品、栓剂、小丸或粉剂。3.根据权利要求1和/或2的方法，其特征在于存在的微生物培养物是益生微生物。4.根据权利要求3的方法，其特征在于益生微生物为乳酸杆菌、M杆菌或链球菌，优选干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、双歧乳杆菌、加氏乳杆菌、植物乳杆菌、约翰逊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、发酵乳杆菌、副干酪乳杆菌、巻曲乳杆菌、长双歧杆菌、两岐双岐杆菌、长双歧杆菌、乳双岐杆菌、短双岐杆菌、动物双岐杆菌、青春双岐杆菌、婴儿双岐杆菌、嗜热链球菌和/或乳酸乳球菌。5.根据权利要求l的方法，其特征在于包装包含通过物理吸收结合湿气的作为吸收剂的干燥剂。6.根据权利要求5的方法，其特征在于千燥剂是分子筛或硅胶。7.包含根据权利要求1、5和6中的一项或多项的包装和根据权利要求1至4中的一项或多项包含至少一种微生物培养物的固体药物施用形式的袋子。8.根据权利要求7的袋子，其特征在于在包装中存在的固体药物施用形式用于口服施用。9.根据权利要求7和/或8的袋子，其特征在于在包装中存在的固体药物施用形式包含103至1012、优选10s至1011并特别优选107至101Q个微生物。10.根据权利要求7至9的一项或多项的袋子，其特征在于在包装中存在的药物施用形式还包含营养相关添加剂，优选维生素、矿物质、微量元素、膳食纤维、酶、植物提取物、蛋白质、糖和/或脂肪。全文摘要本发明涉及用于稳定固体药物施用形式的方法，除了包含包装材料的包装外，其含有至少一属微生物。本发明还涉及固体药物施用形式，其包含至少一属微生物。文档编号B65D81/26GK101272770SQ200680035574公开日2008年9月24日申请日期2006年8月30日优先权日2005年9月29日发明者A·克里斯特,H·拜茨,I·曼内克,M·鲁道夫,S·亨克申请人:默克专利有限公司