,瑞利，中国）测定280nm处的吸光度值，根据牛血清白蛋白的标 准曲线计算不同时间点溶液中牛血清白蛋白的浓度，根据式（6)计算在第t min时微颗粒 对牛血清蛋白的吸附量仏丨!!^/^):
[0126] Qm= (C〇-Ct)V/m(6)
[0127] 式（6)中，CQ，Ct分别为第Omin和第tmin时牛血清白蛋白的浓度，V是牛血清白 蛋白水溶液的体积，m为微颗粒的质量。
[0128] 实施例3、对比例1制备的微颗粒，以及实施例2中的1#、2#样品对牛血清蛋白的 吸附量随时间的变化曲线如图22所示，由图22可知：
[0129] (1)实施例2的2#样品比1#样品相比，2#样品对牛血清蛋白表现出更快的吸附 速率和更高的吸附能力，这是由于纳米级孔结构的存在增加了微颗粒的比表面积，从而为 截留牛血清白蛋白提供了更大的空间。
[0130] (2)与实施例2的2#样品相比，对比例1制备的具有活性基团磁性纳米孔微颗粒 对牛血清蛋白的吸附能力更强，在第60min时，对比例1制备的纳米孔微颗粒对牛血清蛋白 的吸附量为2. 17mg/g。说明在纳米级孔结构的基础上，采用GMA进行修饰，在纳米孔颗粒的 表面及纳米级孔结构中引入活性基团，能够增强微颗粒对牛血清白蛋白分子的吸附作用。
[0131] (3)与对比例1制备的具有活性基团磁性纳米孔微颗粒相比，实施例3制备的具有 活性基团的磁性微米/纳米分级式孔的微颗粒对牛血清蛋白的吸附能力有显著提高，吸附 速率和吸附量都明显增加，在第60min时，实施例3制备的微颗粒对牛血清蛋白的吸附量为 3. 88mg/g。说明将微米级孔与纳米级孔相结合形成微颗粒，能够大大提高微颗粒的质量传 递和比表面积，从而有效提高微颗粒对蛋白质的吸附能力。
[0132] 实施例5
[0133] 本实施例中，制备具有微米/纳米分级式孔的聚（甲基丙烯酸甲酯-co-二甲基丙 烯酸乙二醇酯）微颗粒，步骤如下：
[0134] (1)中间相、内相、外相流体和收集液的配制
[0135] 配制中间相流体：在室温将MMA 4mL、EGDMA 4mL、聚蓖麻酸甘油酯4g、2-羟 基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮400 y L混合均勾，即得中间相流体。
[0136] 配制内相流体：将Pluronic F127、丙三醇加入去离子中混合均匀，即得内相流 体；所述去离子水与？1111'〇111(3?127的质量比为1 :0.005，去离子水与丙三醇的质量比为 1:0.1〇
[0137] 外相流体和收集液均与内相流体相同。
[0138] (2)微颗粒的制备
[0139] 在第一注射泵5、第二注射泵6和第三注射泵7的作用下，分别将内相流体、中间相 流体和外相流体注入毛细管微流体装置的注射管8、过渡管10和收集管12中形成单分散水 /油/水乳液，该过程中，控制内相流体的流量为100 y L/h，中间相流体的流量为1000 y L/ h，外相流体的流量为10000 y L/h，即形成水/油/水乳液，采用盛有收集液的容器收集上述 水/油/水乳液，然后将收集的水/油/水乳液放置20min，最后用250W紫外光照射所述水 /油/水乳液20min，MMA与EGDMA发生交联反应即分别形成微颗粒。
[0140] (3)分离纯化
[0141] 将步骤（2)所得微颗粒从收集液中分离出来，并用异丙醇洗涤去除微颗粒表面的 收集液，然后用去离子水洗涤去除微颗粒上的异丙醇。
[0142] 实施例6
[0143] 本实施例中，制备具有微米/纳米分级式孔的聚（甲基丙烯酸甲酯-co-二甲基丙 烯酸乙二醇酯-CO-甲基丙烯酸缩水甘油酯）微颗粒，步骤如下：
[0144] (1)中间相、内相、外相流体和收集液的配制
[0145] 配制中间相流体：在室温将MMA lmL、EGDMA 2mL、GMA 0. 5mL、聚蓖麻酸甘油酯 0. 4g、2-羟基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮20 y L混合均勾，即得中间相流体。
[0146] 配制内相流体：将Pluronic F127、丙三醇加入去离子中混合均匀，即得内相流 体；所述去离子水与？1111'〇111(3?127的质量比为1 :0.05，去离子水与丙三醇的质量比为 1:0. 05。
[0147] 外相流体和收集液均与内相流体相同。
[0148] (2)微颗粒的制备
[0149] 在第一注射泵5、第二注射泵6和第三注射泵7的作用下，分别将内相流体、中间相 流体和外相流体注入毛细管微流体装置的注射管8、过渡管10和收集管12中形成单分散水 /油/水乳液，该过程中，控制内相流体的流量为10 y L/h，中间相流体的流量为50 y L/h，外 相流体的流量为200 y L/h，即形成水/油/水乳液，然后采用盛有收集液的容器收集上述水 /油/水乳液，然后将收集的水/油/水乳液放置20min，最后用250W紫外光照射所述水/ 油/水乳液20min，MMA、GMA与EGDMA发生交联反应即形成具有活性基团的微颗粒。
[0150] (3)分离纯化
[0151] 将步骤⑵所得微颗粒从收集液中分离出来，并用丙酮洗涤去除微颗粒表面的收 集液，然后用去离子水洗涤去除微颗粒上的丙酮。
【主权项】
1. 具有微米/纳米分级式孔的微颗粒，其特征在于该微颗粒的基体为聚（甲基丙烯酸 甲酯-CO-二甲基丙烯酸乙二醇酯）或者聚（甲基丙烯酸甲酯-CO-二甲基丙烯酸乙二醇 酯-CO-甲基丙烯酸缩水甘油酯），所述基体中具有微米级孔和纳米级孔。2. 根据权利要求1所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒，其特征在于所述微米级孔 的孔径为20~500ym，纳米级孔的孔径为5~lOOOnm。3. 根据权利要求1或2所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒，其特征在于所述微颗 粒中含有磁性纳米粒子，该磁性纳米粒子的含量为0. 05wt%~5wt%。4. 具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在于工艺步骤如下： (1) 中间相、内相、外相流体和收集液的配制 配制中间相流体：将二甲基丙烯酸乙二醇醋、甲基丙烯酸甲酯、油溶性表面活性剂、光 引发剂混合均匀，即得中间相流体；所述甲基丙烯酸甲酯与二甲基丙烯酸乙二醇酯的体积 比为1: (0. 05~2)，甲基丙烯酸甲酯与光引发剂的体积比为1: (0. 005~0. 1)，油溶性表面 活性剂的加入量为每ImL甲基丙烯酸甲酯0. 05~Ig; 配制内相流体：将水溶性表面活性剂、丙三醇加入水中混合均匀，即得内相流体；所述 水与水溶性表面活性剂的质量比为1: (〇. 005~0. 05)，水与丙三醇的质量比为1: (0. 05~ 〇. D ; 配制外相流体：外相流体的配制方法与内相流体的配制方法相同； 配制收集液：收集液的配制方法与内相流体的配制方法相同； (2) 微颗粒的制备 分别将内相流体、中间相流体和外相流体注入毛细管微流体装置的注射管、过渡管和 收集管中形成单分散水/油/水乳液，采用收集液收集该单分散水/油/水乳液，并将所收 集的单分散水/油/水乳液放置至少l〇min，然后用紫外光照射所述单分散水/油/水乳液 使甲基丙烯酸甲酯与二甲基丙烯酸乙二醇酯发生交联反应，即形成具有微米/纳米分级式 孔的微颗粒； 所述内相流体的流量为10~400yL/h，中间相流体的流量为50~1000yL/h，外相流 体的流量为200~10000yL/h; (3) 分离纯化 将步骤（2)所得微颗粒从收集液中分离出来并用洗涤溶剂洗涤去除微颗粒表面的收 集液，然后用水洗涤去除微颗粒上的洗涤溶剂。5. 根据权利要求4所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在于所 述油溶性表面活性剂为聚蓖麻酸甘油酯。6. 根据权利要求4或5所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在 于所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮。7. 根据权利要求4或5所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在 于所述水溶性表面活性剂为嵌段式聚醚F127。8. 根据权利要求4或5所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在 于所述中间相流体中含有甲基丙烯酸缩水甘油酯，甲基丙烯酸缩水甘油酯与甲基丙烯酸甲 酯的体积比为〇. 5~1:1。9. 根据权利要求4或5所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在 于所述中间相流体中含有磁性纳米粒子，磁性纳米粒子的加入量为每ImL甲基丙烯酸甲酯 0. 005 ~0. 02g。10.根据权利要求4或5所述具有微米/纳米分级式孔的微颗粒的制备方法，其特征在 于所述洗涤溶剂为乙醇、异丙醇或者丙酮。
【专利摘要】本发明提供了一种具有微米/纳米分级式孔的微颗粒，该微颗粒的基体为聚(甲基丙烯酸甲酯-co-二甲基丙烯酸乙二醇酯)或者聚(甲基丙烯酸甲酯-co-二甲基丙烯酸乙二醇酯-co-甲基丙烯酸缩水甘油酯)，所述基体中具有微米级孔和纳米级孔。其制备方法如下：(1)配制中间相、内相、外相流体和收集液；(2)分别将内相流体、中间相流体和外相流体注入毛细管微流体装置的注射管、过渡管和收集管中形成单分散水/油/水乳液，采用收集液收集该单分散水/油/水乳液，并放置至少10min，再用紫外光照射所述单分散水/油/水乳液使甲基丙烯酸甲酯与二甲基丙烯酸乙二醇酯发生交联反应；(3)将形成的微颗粒分离纯化即得。
【IPC分类】B81B1/00, B81C99/00
【公开号】CN104909326
【申请号】CN201510140330
【发明人】张茂洁, 褚良银, 汪伟, 谢锐, 巨晓洁, 刘壮, 杨秀兰, 马冰
【申请人】四川大学
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年3月27日