专利名称：一种用高效液相色谱法测定阿达帕林中间体有关物质的方法
技术领域：
本发明属涉及一种高效液相色谱分离分析方法，特别是一种用高效液相色谱法分 离分析阿达帕林中间体有关物质的方法。
背景技术：
阿达帕林是一种维甲酸类化合物，具有抗炎特性，是治疗痤疮的皮肤新药。其中间 体结构式分子式C27H26O3,分子量398.50该化合物的HPLC分析方法现无文献报告，也无专利申请报告。本法有效的对阿达帕林中间体进行纯度分析，本试验采用普通的色谱柱(C8色谱 柱)快速准确的实现了阿达帕林中间体有关物质的测定，从而实现了阿达帕林中间体杂质 的控制，保证了阿达帕林中间体的质量可控，在合成和制剂过程的质量控制方面具有重要 的现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种分离分析阿达帕林中间体有关物质的高效液相色谱 方法，从而实现对阿达帕林中间体的质量控制。申请人:发现，用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以缓冲盐溶液-有机改 性剂为流动相，可以实现阿达帕林中间体与其中间体的分离与分析，从而可以准确控制阿 达帕林中间体及其制剂的质量。本发明所用的高效液相色谱法分离分析阿达帕林中间体的方法，选用辛烷基硅烷 键合硅胶为填充剂的色谱柱。本发明采用的缓冲盐选自磷酸二氢钠，醋酸铵，优选自醋酸铵。本发明采用的有机改性剂选自乙腈、甲醇，最优选的有机改性剂为甲醇。本发明采用的色谱柱为辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，型号为 250mmX 4. 6mm,5 μ m。本发明方法的流动相中，醋酸铵溶液-甲醇溶液的体积比为20 80 10 90， 进一步为12 88。本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现(1)称取阿达帕林中间体样品适量，先用适量的四氢呋喃溶解，再用流动相稀释至
3刻度，配制成每Iml约含阿达帕林中间体0. 2mg 2mg的样品溶液。(2)设置流动相流速为0. 8 1. 2ml/min,检测波长为2；34歷。(3)取步骤(1)的样品溶液5-40 μ 1注入液相色谱仪，完成阿达帕林中间体的分离 与分析。其中高效液相色谱仪岛津LC-10ATvp，SPD-IOAvp,SCL-IOAvp, D⑶-12A色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱Q50mmX4. 6mm, 5 μ m)流动相醋酸铵溶液-甲醇=12 88流速L0ml/min检测波长2;34nm柱温室温进样体积10 μ 1本发明能够有效测定阿达帕林中间体的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高， 结果准确可靠。可用于阿达帕林中间体的质量控制，确保原料药和制剂的质量可控。
图1实施例1，醋酸铵溶液-甲醇(12 88)阿达帕林中间体与中间体混合样品高 效液相色谱2实施例2，醋酸铵溶液-甲醇(12 88)阿达帕林中间体高效液相色谱图
具体实施例方式以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围实施例1仪器与条件高效液相色谱仪日本岛津LC-10ATvp，SPD-IOAvp色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱Q50mmX4. 6mm, 5 μ m)流动相醋酸铵溶液-甲醇(12 88)流速L0ml/min检测波长2;34nm柱温室温进样体积10 μ 1实验步骤称取阿达帕林中间体10mg，中间体I，II，III各5mg，置于25ml容量瓶中，先用适 量的四氢呋喃溶解，摇勻，再用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述 色谱条件下进行高效液相色谱分析，记录色谱图，结果见附图1。图1中保留时间为6. 94分钟的色谱峰为阿达帕林中间体的色谱峰，保留时间为 3.4、12.5、20.0分钟色谱峰为中间体1，II，III的色谱峰。色谱图表明阿达帕林中间体与 其中间体及杂质可以在同一色谱条件下达到良好的分离。实施例2仪器与条件高效液相色谱仪日本岛津LC_10TAvp，SPD-IOAvp
色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱O50mmX4. 6mm, 5 μ m)流动相醋酸铵溶液-甲醇(12 88)流速L0ml/min检测波长2;34nm柱温室温进样体积10 μ 1实验步骤称取阿达帕林中间体10mg，置于25ml容量瓶中，先用适量的四氢呋喃溶解，摇勻， 再用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液。取供试品溶液，在上述色谱条件下进行高效液相 色谱分析，记录色谱图，结果见附图2。
权利要求
1.一种高效液相色谱法分离分析阿达帕林中间体有关物质的方法，其特征在于采用辛 烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以缓冲盐溶液-有机改性剂为流动相。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述色谱柱为辛烷硅基烷键合硅胶为填充 剂的色谱柱，规格为250mmX4. 6mm，5 μ m。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述有机改性剂选自乙腈、甲醇。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述有机改性剂为甲醇。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述缓冲盐选自醋酸铵，磷酸二氢钠。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述缓冲盐为醋酸铵。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于流动相中缓冲盐溶液与有机改性剂的体积 比为12 88。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步骤(1)称取阿达帕林中间体样品适量，先用适量的四氢呋喃溶解，再用流动相稀释至刻 度，配制成浓度为0. 2mg/ml的溶液。(2)设置流动相流速为0.8 1. 2ml/min，检测波长为234nm。(3)取步骤(1)的样品溶液5-40μ 1注入液相色谱仪，完成阿达帕林中间体及其有关物 质的分离与分析。
全文摘要
本发明公开了一种阿达帕林中间体有关物质的分离与分析测定方法，采用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱250mm×4.6mm，5μm，以醋酸铵溶液-有机改性剂为流动相，用于分离分析阿达帕林中间体的有关物质。
文档编号G01N30/02GK102116764SQ20091024438
公开日2011年7月6日 申请日期2009年12月30日 优先权日2009年12月30日
发明者刘秋叶, 康彦龙, 张燕 申请人:北京德众万全医药科技有限公司