专利名称：类神经酰胺含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种类神经酰胺鲸腊基-PG轻乙基棕榈酰胺(Cetyl-PG HydroxyethylPalmitamide)含量低的测定方法。通过本发明的方法，能够快速的分析出类神经酰胺的含量，适用于人工合成的中间控制及成品分析。
背景技术：
神经酰胺是近年来开发出的新一代保湿剂，它和构成皮肤角质层的物质结构相近，能很快渗透进皮肤，和角质层中的水结合，形成一种网状结构，锁住水分。承担着改善皮肤保持水份能力，修复皮肤屏障功能，缓解角质层脱屑症状，帮助表皮再恢复，改善皮肤外观；也能避免、减少紫外线照射引起的表皮剥脱，而有助于皮肤抗衰老，为现代功能性化妆品的新型添加剂。 以前主要是从动物中提取神经酰胺，但自从1986年“疯牛病”发生以来，由动物脑组织提取的神经酰胺制品已被植物性神经酰胺替代，市场上植物性神经酰胺有用大米、小麦、玉米和魔芋等原料制成的相应产品。但植物中神经酰胺类物质含量较低，分离提纯比较困难，因此上世纪90年代开始采用人工合成。现已成功合成了类似神经酰胺的结构物质，称类神经酰胺。目前人工合成的类神经酰胺的品种多样，本发明涉及的类神经酰胺目前没有文献报导测定其含量的方法，为化妆品厂家选择原料带来了一定的困惑。为了更好地控制产品质量，保证化妆品质量，本发明提供了一种成本较低，操作简便的测定方法。该方法通过液相色谱外标曲线法即能够快速分析出类神经酰胺的含量，由于本方法耗时短，操作简单，精密度和准确度数据较满意，因此适用于类神经酰胺的人工合成生产及成品分析。
发明内容
本发明目的是提供一种类神经酰胺含量的测定方法。本发明的方法是用该类神经酰胺的标准品溶解于有机溶剂中，配制成不同浓度的类神经酰胺标准溶液，采用外标标准曲线法，直接进样进行液相色谱分析，绘制出标准曲线。分析类神经酰胺样品时，取一定量的样品，配制成样品溶液，在相同条件下进行液相色谱分析，由标准曲线即可查出其质量分数。所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、甲苯或其混合溶剂。所采用的液相色谱条件是VWD检测器，检测波长范围为215nm — 225nm ;色谱柱采用C8或者C18烷基硅胶柱；柱温为20°C—50°C。所采用的流动相为乙腈-异丙醇混合溶剂，体积比为1:2 5:1 ;亦可采用梯度洗脱，A相为乙腈-异丙醇混合溶剂，体积比=1:2 5:1，B相为5%甲醇水溶液，梯度洗脱Omin — 5min — 20min ； 7%B — 7%B — 50%B。即开始从 Omin 至 5min,走 7% 的 B 流动相和93%的A流动相；从5min至20min，由7%的B流动相逐步走至50%的B流动相，即A流动相从93%逐步走至50%。
所述的样品溶液其浓度范围建议为0. 5 10mg/ml。本发明相对成本较低，操作简便，使用的试剂也均为实验室常用试剂，标准溶液及样品溶液的配制也十分简单。该方法就是采用液相色谱外标标准曲线法就能够快速分析出类神经酰胺的含量。由于本方法耗时短，操作简单，适用于化工厂日常生产的中控及成品分析等。采用本发明的方法，精密度< ±1.0%，准确度> 99.0%。
具体实施例方式通过下面具体实例有助于理解本发明，但并不限制本发明的适用范围。实施例I仪器与试剂Agilent 1100系列高效液相色谱、VffD检测器215nm、 色谱柱TC-C18，150mm*4. 6_ 5um、精密电子天平类神经酰胺标准品、色谱级乙腈、色谱级异丙醇、色谱级甲醇、AR级甲醇、色谱条件流动相A相乙腈异丙醇的体积比=1:2 B相5%甲醇水溶液梯度洗脱0min— 5min — 20min ；7%B — 7%B — 50%B色谱柱TC-C18，150mm*4.6mm，5iim柱温20°C检测波长215nm流速lml/min进样量20u I操作步骤精确称取类神经酰胺标准品0. 2g (精确至0. lmg)，溶于AR级甲醇，并用甲醇定容至100ml，混匀，配制成类神经酰胺标准品溶液，作为储备液备用。精密移取5ml、10ml、15ml、20ml上述溶液，用AR级甲醇定容至100ml，混匀，再0. 45 u针式滤头过滤，直接进样进行液相色谱分析，记录该物质的峰面积。以类神经酰胺的含量(mg/100ml)为横坐标，峰面积为纵坐标，分别绘制标准曲线，并计算回归方程。同时精确称取神经酰胺样品50. Omg (精确至0. Img),溶于AR级甲醇,并用甲醇定容至100ml，混匀，配制成类神经酰胺样品溶液，再0.45 y针式滤头过滤，直接进样进行液相色谱分析，最后可根据回归方程或者标准曲线即可得到类神经酰胺的含量。结果计算测得同一批类神经酰胺的含量数据如下(精密度实验数据)
权利要求
1.一种类神经酰胺鲸蜡基-PG羟こ基棕榈酰胺含量的測定方法，其特征是用该类神经酰胺的标准品溶解于有机溶剂中，配制成不同浓度的类神经酰胺标准溶液，采用外标法，直接进样并用流动相洗脱进行液相色谱分析，绘制出标准曲线；按照相同的方式配制成含有类神经酰胺鲸蜡基-PG羟こ基棕榈酰胺0. 5 10mg/ml的待测样品溶液，相同条件下进行液相色谱分析，由标准曲线即可查出其质量分数。
2.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的类神经酰胺标准溶为0.ro. 4mg/ml不同浓度的类神经酰胺标准溶液。
3.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的含有类神经酰胺鲸蜡基-PG羟こ基棕榈酰胺的待测样品溶液的浓度为0. 5 10mg/ml。
4.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的有机溶剂是甲醇、こ醇、异丙醇、こ腈、甲苯或其混合溶剤。
5.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的色谱条件是VWD检测器，检测波长范围为215nnT225nm ;色谱柱采用C8或者C18烷基硅胶柱；柱温为20°C 50°C。
6.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的类神经酰胺的标准品为已知含量的类神经酰胺E。
7.如权利要求I所述的方法，其特征是所述的流动相为こ臆-异丙醇混合溶剂，体积比为1:2 5:1 ;亦可采用梯度洗脱，A相为こ腈-异丙醇混合溶剤，体积比依次=1:2 5:1，B相为5%甲醇水溶液，梯度洗脱开始从Omin至5min，走7%的B流动相和93%的A流动相；从5min至20min,由7%的B流动相逐步走至50%的B流动相，即A流动相从93%逐步走至50%。
全文摘要
本发明是一种类神经酰胺含量的测定方法，系将类神经酰胺溶解于有机溶剂中，再选择流动相和色谱柱通过外标法测定类神经酰胺的含量。该方法简便快捷，适用于人工合成生产的中间控制及成品分析。
文档编号G01N30/88GK102778528SQ20121031597
公开日2012年11月14日 申请日期2012年8月30日 优先权日2012年8月30日
发明者张扬, 方慧静, 江志洁, 蔡芳 申请人:上海奥利实业有限公司