专利名称：一种治疗流感的药物及其制剂的制备方法及质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药制剂领域，涉及一种中药，特别涉及一种治疗流感的药物及其制剂的制备方法及质量控制方法。
背景技术：
流行性感冒(Influenza)简称流感，是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病，传染性强，发病率高，容易引起暴发流行或大流行。其主要通过含有病毒的飞沫进行传播，人与人之间的接触或与被污染物品的接触也可以传播。典型的临床特点是急起高热、显著乏力，全身肌肉酸痛，而鼻塞、流涕和喷嚏等上呼吸卡他症状相对较轻。秋冬季节高发。本病具有自限性，但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发 症而导致死亡。据有关统计资料表明，我国每年约有75%的人至少每年患一次感冒。流感不仅影响到人们的生活和工作，对于老年人、婴幼儿、孕妇及一些有其他疾病的人来说，流感是一种十分危险的疾病，随流感而出现的并发症甚至会对生命产生威胁。由于流感发病急促、症状复杂多样、因而至今没有一种药物能解决所有这些问题。西医通常采用解热镇痛药，神经氨酸酶抑制剂，M2离子通道阻滞剂，抗病毒药等，但西药普遍存在副作用大的特点，并且极易产生耐药性，在治疗流感的同时，一定程度上还降低了人体免疫力，不能从根本上达到治愈的目的。中医学认为感冒是由于风邪乘人体御邪能力不足时，侵袭肺卫皮毛所致。临床上以风寒、风热两种症候最为多见，此外，时令之署、湿、燥邪也能杂感而为病。因此中医治疗流感，通常采用辩证论治，从整体观念出发，以多途径、多层次、调节机体免疫功能，防止病态发展，并且中药毒副作用小，显示了良好的发展优势。因此研制开发安全有效、月艮用方便，能从根本上达到治疗目的的感冒药品是一项非常有意义的工作。鉴于收载于《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药》第一册的品种“九味竺黄散”，其组方合理，处方如下力嘎都、榜嘎止痛除瘟；丛菔清肺热；兔耳草清“龙”血合并症；天竺黄、红花、牛黄、檀香清热镇痛止咳祛痰；甘草调和诸药，清热解毒，补脾益气。诸药相伍共奏利肺，消炎，止咳之功，对小儿流感引起的肺炎、上呼吸道感染效果明显。因此我们对该品种进行了进一步的研究开发。九味竺黄散的处方为天竺黄20g红花15g牛黄5g力嘎都50g榜嘎15g甘草IOg丛菔15g兔耳草15g檀香7.5。传统的制备方法为以上九味，除牛黄另研细粉夕卜，其余共研成细粉，过筛，加入牛黄细粉，混匀，即得。九味竺黄散为西藏林芝宇拓藏药有限责任公司独家产品，国药准字Z20023221。专利检索结果，未检索到相关专利；公开文献检索结果，检索到文献《九味竺黄片的质量标准研究》报道了处方中人工牛黄、力嘎都、红花的TLC近别方法和榜嘎的乌头碱限量检查方法。现有关于九味竺黄散药物的制备采用的是传统方法，原料药的有效成分释放缓慢，严重影响到药物有效成分的吸收利用。现有关于九味竺黄散药物的质量控制方法暂无含量测定项，文献报道的乌头碱限量检查方法为采用紫外-可见分光光度法，显色后测定，但样品溶液本身具有颜色，会干扰测定。
发明内容
本发明的目的是在提取工艺上进行改革，在技术上采用现代化的新设备、新技术、新方法，制定了合理科学的生产工艺，适合工业化大生产。如采用现代提取纯化技术，对处方药材进行了提取，加快了有效成分的溶出；又如对含挥发油药材，提取挥发油，采用β_环糊精包合技术进行包合，可有效减少成品在储存过程中挥发油的损失，并掩盖了挥发油的不良气味，改善了成品服用时的口感；再如在制剂技术方面，采用一步制粒，具有避免传统制剂中加热时间长，有效成分破坏的不足，并大大缩短了生产周期，高效先进。本发明的另一目的在于针对原九味竺黄散剂型的不足之处，进行合理的剂型改革，研制出服用携带方便的颗粒剂，考虑原散剂服用方法是用水冲服，但服用时容易糊口，不易吞服。此外，本品为每袋装15g，一次服用I. 5g，服用不方便，且剂量不宜准确控制。将其剂型改革为颗粒剂，每袋O. Sg相当于原散剂I. 5g，可充分发挥颗粒剂吸收快、显效迅速，服用及携带方便，口感好的特点。为本方剂又增添了一个新剂型，适应广大患者对不同剂型的需求。本发明的又一目的是在颗粒剂制剂过程中采用不同辅料进行筛选，优选利于颗粒剂成型的辅料，保证了颗粒剂的稳定性。其中所述的辅料选择糊精、蔗糖的一种或二种，其 用量为成品颗粒的50% 80%。本发明的再一目的是对制剂进行了详细深入的质量标准研究，在原标准的基础上进行完善和改进。原散剂项下未制定鉴别及含量测定，本品在研制过程中，对处方中各味药材均进行了较深入的鉴别研究，建立了甘草、人工牛黄、兔耳草、檀香的薄层鉴别方法。方法均简便可行，特征斑点明显，专属性强。红花、力嘎都为方中主药，其主要有效成分分别为羟基红花黄色素A、红景天苷，采用高效液相色谱法，测定本品中的羟基红花黄色素A、红景天苷的含量，结果表明方法简便可行，具有较好的准确性和精密度，可有效地控制本品质量，保证了临床疗效。榜嘎为乌头属植物，含有酯型生物碱类毒性成分，采用采用高效液相色谱法，控制本品中的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱限量，保证了本品的临床用药安全。本发明的技术方案如下
一种治疗流感的药物及其制剂的制备方法及质量控制方法，所述治疗流感的药物的原料药组成为原九味竺黄散处方组成。制备方法包括以下步骤
(1)按原料药组成配比取红花、檀香，加水8倍重量，采用水蒸汽蒸馏法，提取挥发油4h，收集挥发油，药液滤过，得提取液A’和药渣A ;
将收集得到的挥发油加入重量体积百分比4%的β环糊精饱和水溶液中，挥发油与β环糊精的体积重量比为Iml :4g，搅拌条件下，保持温度50°C，搅拌4h，0°C_4°C冷藏过夜，抽滤，取沉淀即得挥发油包合物B ；
(2)按原料药组成配比取天竺黄、力嘎都、榜嘎、甘草、丛菔、兔耳草共6味药材，与步骤
(I)提取挥发油后的药渣A混合，加水回流提取2次，第一次加水的量是所述6味药材与药渣A总重量的10倍，提取3h，滤过，药渣再加水的量是所述6味药材与药渣A总重量的8倍，提取2h，滤过，合并两次提取液并与步骤(I)提取挥发油后的提取液A’合并，减压浓缩，浓缩至25°C条件下相对密度为I. 08-1. 12的流浸膏C ；
(3)按原料药组成配比取人工牛黄及上述步骤(I)所得挥发油包合物B，加入到上述步骤(2)所得的流浸膏C中，胶体磨混匀，以糊精、蔗糖的一种或二种，作为底料，底料用量为成品颗粒的509Γ80%，用沸腾喷雾一步制粒，整粒，包装O. Sg/袋，即得本发明的颗粒剂。本发明的颗粒剂服用方法为，口服，每日2-3次，每次I袋。本发明的颗粒剂的质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种鉴别。甘草的鉴别取本品4g，研细，加水30ml使溶解，滤过，滤液用石油醚萃取3次，每次30ml，弃去石油醚液，水液再用醋酸乙酯萃取3次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材lg，加甲醇30ml，超声 处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为对照药材品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ L，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(5 :4:0. 3)为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。兔耳草的鉴别取本品4g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤蒸干，残渣加水25ml使溶解，用醋酸乙酯萃取3次，每次25ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为供试品溶液。另取兔耳草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤蒸干，残渣加水25ml使溶解，用醋酸乙酯萃取3次，每次25ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ L，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。檀香的鉴别取本品4g，研细，加石油醚30ml，超声处理30min，滤过，滤液低于60°C条件下蒸干，残渣加醋酸乙酯Iml溶解，作为供试品溶液。另取檀香对照药材O. 5g，力口石油醚30ml，超声处理30min，滤过，滤液低于60°C条件下蒸干，残渣加醋酸乙酯Iml溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ L，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲醇(5 :4 :0. 4)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以质量体积比1%香草醛硫酸溶液，105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。人工牛黄的鉴别取本品4g，研细，加二氯甲烷30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。另取胆酸对照品，加甲醇制成每Iml各含O. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ L，点于同一硅胶G薄层板上，以乙醚-三氯甲烷-冰醋酸(2:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以体积比10%的硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰。置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。含量测定
A.红花的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-O. 8%冰醋酸(25:75)为流动相；检测波长为403nm。理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于2500 ；
对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加20%甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，即得；
供试品溶液的制备本品研细后，取粉末2g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入20%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，用20%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，SP得。力嘎都的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定； 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-O. 2%磷酸溶
液(15 85)为流动相；检测波长为220nm。理论板数按红景天苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备取红景天苷对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成每Iml含4(^g的溶液，即得；
供试品溶液的制备本品研细后，取粉末2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。酯型生物碱限量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定;
色谱条件与系统适用性试验乙腈-四氢呋喃(5:3)为流动相Α，以O. lmol/L醋酸铵溶液为流动相B，按下表I中的规定进行梯度洗脱，检测波长为235nm。理论板数按新乌头碱峰计算应不低于2500 ；
表I梯度洗脱流动相
权利要求
1.一种治疗流感的中药制剂，其特征在于制备方法包括以下步骤 (1)按九味竺黄散处方中的原料药配比取红花、檀香，加水8倍重量，采用水蒸汽蒸馏法，提取挥发油4h，收集挥发油，药液滤过，得提取液A’和药渣A ； 将收集得到的挥发油加入重量体积百分比4%的0环糊精饱和水溶液中，挥发油与3环糊精的体积重量比为Iml 4g,搅拌条件下，保持温度50°C，搅拌4h，(TC _4°C冷藏过夜，抽滤，取沉淀即得挥发油包合物B ； (2)按九味竺黄散处方中的原料药配比取天竺黄、カ嘎都、榜嘎、甘草、丛菔、兔耳草共6味药材，与步骤(I)提取挥发油后的药渣A混合，加水回流提取2次，第一次加水的量是所述6味药材与药渣A总重量的10倍，提取3h，滤过，药渣再加水的量是所述6味药材与药渣A总重量的8倍，提取2h，滤过，合并两次提取液并与步骤(I)提取挥发油后的提取液A’合并，减压浓缩，浓缩至25°C条件下相对密度为I. 08-1. 12的流浸膏C ； (3)按九味竺黄散处方中的原料药配比取人工牛黄及上述步骤(I)所得挥发油包合物B，加入到上述步骤(2)所得的流浸膏C中，胶体磨混匀，以糊精、蔗糖的ー种或ニ种，作为底料，底料用量为成品颗粒的509^80%，用沸腾喷雾一歩制粒，即得。
2.权利要求I所述的ー种治疗流感的中药制剂，其特征在于其质量控制方法包括如下鉴别和/或含量測定方法中的ー种或几种 鉴别 甘草的鉴别取本品4g，研细，加水30ml使溶解，滤过，滤液用石油醚萃取3次，毎次30ml，弃去石油醚液，水液再用醋酸こ酯萃取3次，毎次30ml，合并醋酸こ酷液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为对照药材品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各IOy L，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇(5 4 :0. 3)为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； 兔耳草的鉴别取本品4g，研细，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤蒸干，残渣加水25ml使溶解，用醋酸こ酯萃取3次，毎次25ml，合并醋酸こ酷液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为供试品溶液；另取兔耳草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤蒸干，残渣加水25ml使溶解，用醋酸こ酯萃取3次，毎次25ml，合并醋酸こ酷液，蒸干，残渣加甲醇Iml溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各IOii L，点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸こ酷(9:1)为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以体积比10%硫酸こ醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； 檀香的鉴别取本品4g，研细，加石油醚30ml，超声处理30min，滤过，滤液低于60°C条件下蒸干，残渣加醋酸こ酷Iml溶解，作为供试品溶液；另取檀香对照药材0. 5g，加石油醚30ml，超声处理30min，滤过，滤液低于60°C条件下蒸干，残渣加醋酸こ酷Iml溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 y L，点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲酸こ酷-甲醇(5 :4 :0. 4)为展开剂，展开，取出，晾干；喷以质量体积比I %香草醛硫酸溶液，105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； 人工牛黄的鉴别取本品4g，研细，加ニ氯甲烷30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取胆酸对照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5yL，点于同一硅胶G薄层板上，以こ醚-三氯甲烷-冰醋酸(2 :2:1)为展开剂，展开，取出，晾干；喷以体积比10%的硫酸こ醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰；置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同顔色的突光斑点； 含量測定 红花的含量測定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)測定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0. 8%冰醋酸(25:75)为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于2500 ； 对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加20%甲醇制成姆Iml含0. Img的溶液，即得； 供试品溶液的制备本品研细后，取粉末2g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入20%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，用20%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOul，注入液相色谱仪，測定，SP得;力嘎都的含量測定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)測定；色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0. 2%磷酸溶液(15 85)为流动相；检测波长为220nm ;理论板数按红景天苷峰计算应不低于2500 ；对照品溶液的制备取红景天苷对照品适量，精密称定，加60%甲醇制成每Iml含40呢的溶液，即得； 供试品溶液的制备本品研细后，取粉末2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各IOW，注入液相色谱仪，測定，即得; 酷型生物碱限量測定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)測定；色谱条件与系统适用性试验こ腈-四氢呋喃(5:3)为流动相A，以0. lmol/L醋酸铵溶液为流动相B，按下表I中的规定进行梯度洗脱，检测波长为235nm，理论板数按新乌头碱峰计算应不低于2500 ；
全文摘要
本发明涉及一种治疗流感的药物，其特征在于是由剂型改革而成的中药制剂-九味竺黄颗粒的制备方法，其技术方案是在提取工艺上进行优化和筛选，在技术上采用现代化的新设备、新技术、新方法，适合工业化大生产；质量标准研究是在原标准的基础上进行完善和改进，新制定了薄层鉴别、含量测定方法和酯型生物碱限量检查方法，产品质量标准先进可控，保证了临床疗效及用药安全。
文档编号G01N30/90GK102861255SQ20121036131
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月26日 优先权日2012年9月26日
发明者孔倩倩, 邵成明, 庞大坤 申请人:济南星懿医药技术有限公司