一种小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒和检测方法
【专利摘要】一种小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒和检测方法，其特征在于：所述检测试剂盒由稀酸溶液、pH试纸、pH调节剂、增敏剂、显色剂和标准比色带组成。所述检测方法为：取小麦粉试样于50mL具塞三角瓶中，加入稀酸，摇匀后静置，用pH调节剂调节pH，然后加入增敏剂和显色剂，摇匀后静置，观察颜色并与标注比色带对比，得出小麦粉中过氧化钙的大致含量范围。本发明的试剂盒和方法操作简便，适合于现场检测。
【专利说明】一种小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒和检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于食品添加剂快速检测试剂盒的制备及其应用领域，具体的说涉及到一种小麦粉中过氧化钙快速定性检测的试剂盒以及检测方法。
【背景技术】
[0002]过氧化钙分子式为CaO2，一般用作防腐剂、杀菌剂、漂白剂等。过氧化钙添加到小麦粉中，可较高程度漂白小麦粉的同时提高面筋筋力和面团韧性，我国在过去曾广泛使用过氧化钙作为小麦粉处理剂并规定其最大添加量为50 mg/Kg。但最近研究表明，食用含有过量过氧化钙的小麦粉会刺激胃肠道，引发胃部不适，长期食用则可加重人体的肝脏代谢负担，导致慢性疾病。2011年2月，卫生部等7部门联合发布了《关于撤销食品添加剂过氧化苯甲酰、过氧化钙的公告(2011年第4号)》的文件公告，撤销了过氧化钙作为小麦粉处理剂。目前，关于小麦粉中过氧化钙的检测，尚无国标推荐方法，文献已报道的检测方法有组合分析法、比色法、化学发光检测法等，但这些方法由于操作繁琐、所需仪器昂贵、实验所需环境条件的限制，很难在现场进行。
【发明内容】
[0003]本发明的目的正是为了提供一种简便并可实现现场检测的小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒和基于此试剂盒的检测方法。
[0004]本发明的目的是通过下述技术措施来实现:
本发明的小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒包括稀酸溶液、PH试纸、pH调节剂、增敏齐IJ、显色剂和标准比色带。
[0005]本发明中所述稀酸为0.lmol/L?0.3 mol/L稀硫酸；pH试纸为精密pH试纸，pH值范围为4.5?9.0 ;所述pH值调节剂为0.2 mol/L的氢氧化钠溶液；所述增敏剂包括0.5%辣根过氧化物酶、0.05 mol/L碘化钾，其中，0.5%辣根过氧化物酶溶液由酶活力为250 U/mg的辣根过氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH为6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液制成，存放于棕色试剂瓶中，避光保存；所述显色液为0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液。所述标准比色带由渐变色带和刻度标尺组成，渐变色带的颜色自右至左依次加深，不同的颜色深度对应不同的刻度标尺标注的过氧化钙含量。
[0006]本发明中所述标准比色带的制作方法为:称取1.0g?3.0g空白小麦粉(不含任何添加剂)若干份，分别加入不同浓度的过氧化钙标准液，使过氧化钙的含量分别为O mg/Kg?1000 mg/Kg,然后分别加入20 mL的0.lmol/L?0.3 mol/L稀硫酸,摇勻后静置5 min,用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0左右,然后分别加入I滴(约40 μ L) 0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]，摇匀后静置5 min，取上层清液，利用扫描仪采集不同浓度的过氧化钙标准液显色后的颜色，利用Photoshop根据颜色的渐变规律进行渐变拟合，根据过氧化钙标准液的浓度加注标尺，得到过氧化钙测定的标准比色带。[0007]利用本发明检测试剂盒，检测方法为:
(1)取1.0g?3.0g小麦粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.1 mo I/L?0.3 mol/L稀硫酸，摇勾后静直5 min ；
(2)用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0
(3)分别加入I滴(约40μ L) 0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲烧],摇勻后静置5 min ；
(4)观察颜色并与标准比色带对比，得出小麦粉中过氧化钙的大致含量范围。
[0008]步骤(I)稀硫酸与小麦粉中的过氧化钙反应，生成过氧化氢而存在于上层清夜中；
步骤(3)中0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾充当增敏剂的作用，其加入可很大程度提升显色的灵敏度，0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]充当显色剂，在增敏作用下，步骤(I)中生成的过氧化氢氧化显色剂显色；
本发明的有益效果如下:
(I)本发明检测试剂盒携带方便，显色速度快，操作简便，可实现现场检测。
[0009](2)本发明中标准比色带刻度精确，其定性检测具有一定的准确性。
[0010]【专利附图】
【附图说明】:
图1为本发明的标准比色带。
[0011]【具体实施方式】:
下面结合实施例对本发明作进一步描述 实施例1
本发明检测试剂盒包括稀酸溶液、PH试纸、pH调节剂、增敏剂、显色剂和标准比色带。其中pH试纸为精密pH试纸，pH值范围为4.5?9.0 ；pH值调节剂为0.2 mol/L的氢氧化钠溶液；反应提取剂为0.2 mol/L稀硫酸；增敏剂包括0.5%辣根过氧化物酶、0.05 mol/L碘化钾，其中，0.5%辣根过氧化物酶溶液由酶活力为250 U/mg的辣根过氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH为6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液制成，存放于棕色试剂瓶中，避光保存；显色液为0.05 mol/L季胺[4，4’ - (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液；所述标准比色带由渐变色带和刻度标尺组成，渐变色带的颜色自右至左依次加深，不同的颜色深度对应不同的刻度标尺标注的过氧化钙含量。
[0012]标准比色带的制作方法为:
称取2.0 g空白小麦粉(不含任何添加剂)若干份，分别加入不同浓度的过氧化钙标准液，使过氧化I丐的含量分别为O mg/Kg、10 mg/Kg、15 mg/Kg >30 mg/Kg、40mg/Kg、50 mg/Kg、60 mg/Kg>70 mg/Kg、100 mg/Kg、300 mg/Kg、500 mg/Kg、700 mg/Kg、1000 mg/Kg,然后分别加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，摇匀后静置5 min，用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0左右，然后分别加入I滴(约40 μ L)0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’- (二甲氨基)-二苯基甲烷]，摇匀后静置5 min，取上层清液，利用扫描仪采集不同浓度的过氧化钙标准液显色后的颜色，利用Photoshop根据颜色的渐变规律进行渐变拟合，根据过氧化钙标准液的浓度加注标尺，得到过氧化钙测定的标准比色带。
[0013]利用本检测试剂盒的检测方法为: (1)取2.0g小麦粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，摇匀后静置 5 min ;
(2)用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0
(3)分别加入I滴(约40μ L) 0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲烧],摇勻后静置5 min ；
(4)观察颜色并与标准比色带对比，得出小麦粉中过氧化钙的大致含量范围。
[0014]实施例2
利用实施例1中的检测试剂盒和检测方法，对市售某品牌馒头粉进行检测试验，检测步骤如下:
(1)称取2.0 g某品牌馒头粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.2 mol/L稀硫酸，摇匀后静置5 min ；
(2)用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0左右；
(3)加入I滴(约40μ L)0.5%的辣根过氧化物酶和0.05mol/L的碘化钾溶液，然后加Al mL季胺[4，4’-(二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液，摇匀，静置5 min；
(4)观察三角瓶中样品溶液的颜色，该试样颜色为淡黄色，说明该试样含有过氧化钙，经与实施例1中的标准色带进行对比，得出其含量大致为36 mg/Kg。
[0015]上述实施例仅为对本发明的详细说明，而不用于限制本发明，应当指出的是，本行业的技术人员在不脱离本发明的技术和构思范围内对本发明的适当修改和修饰，也应当属于本发明权利要求的保护范围。
【权利要求】
1.一种小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒，其特征在于:所述检测试剂盒由稀酸溶液、PH试纸、pH调节剂、增敏剂、显色剂和标准比色带组成。
2.根据权利要求1所述的小麦粉中的过氧化钙检快速检测试剂盒的制备方法，其特征在于:所述稀酸为0.1 mol/L~0.3 mol/L稀硫酸；所述pH试纸为精密pH试纸；所述pH值调节剂为0.2 mol/L氢氧化钠溶液；所述增敏剂包括0.5%辣根过氧化物酶、0.05 mol/L碘化钾，其中，0.5%辣根过氧化物酶溶液由酶活力为250 U/mg的辣根过氧化物酶0.52 g溶于100 mL pH为6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液制成，存放于棕色试剂瓶中，避光保存；所述显色液为0.05 mol/L季胺[4，4’-(二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液。
3.所述标准比色带由渐变色带和刻度标尺组成，渐变色带的颜色自右至左依次加深，不同的颜色深度对应不同的刻度标尺标注的过氧化钙含量。
4.根据权利要求2所述的小麦粉中过氧化钙快速检测试剂盒，其特征在于:其中标准比色带的制备方法为:称取1.0g~3.0g空白小麦粉(不含任何添加剂)若干份，分别加入不同浓度的过氧化钙标准液，使过氧化钙的含量分别为O mg/Kg~1000 mg/Kg，然后分别加入20 mL的0.lmol/L^0.3 mol/L稀硫酸，摇匀后静置5 min，用0.2 mol/L氢氧化钠调节pH为6.0左右，然后分别加入I滴(约40 μ L)0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’ -( 二甲氨基)_ 二苯基甲烧]，摇匀后静置5 min,取上层清液，利用扫描仪采集不同浓度的过氧化钙标准液显色后的颜色，利用Photoshop根据颜色的渐变规律进行渐变拟合，根据过氧化钙标准液的浓度加注标尺，得到过氧化钙测定的标准比色带。
5.一种小麦粉中过氧化钙的快速检测试剂盒和检测方法，其特征在于:所述检测方法 为: (1)取1.0g~3.0g小麦粉于50 mL具塞三角瓶中，加入20 mL的0.1 mo I/L~0.3 mol/L稀硫酸，摇勾后静直5 min ； (2)用0.2mol/L氢氧化钠调节pH为6.0 ; (3)分别加入I滴(约40μ L) 0.5%辣根过氧化物酶和0.05 mol/L的碘化钾，再加入I mL的0.05 mol/L季胺[4，4’- (二甲氨基)-二苯基甲烷]溶液，摇匀后静置5 min ； (4)观察颜色并与标准比色带对比，得出小麦粉中过氧化钙的含量范围。
【文档编号】G01N21/78GK103983643SQ201410243446
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年6月3日 优先权日:2014年6月3日
【发明者】张玉荣, 张德伟, 周显青, 孙静 申请人:河南工业大学