一种上清丸的质量控制方法
【专利摘要】本发明属于药物的控制方法【技术领域】，具体涉及一种上清丸的质量控制方法。本发明主要解决了现有上清丸的质量控制方法存在无法对组成药物进行化学鉴别和无法控制制剂中有效成分含量的技术问题。本发明采用的技术方案为：一种上清丸的质量控制方法，包括成分检查步骤，其中：它还包括成分鉴别和成分含量测定步骤；本发明具有能有效控制制剂质量和提高质量标准的优点。
【专利说明】一种上清丸的质量控制方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物的控制方法【技术领域】，具体涉及一种上清丸的质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 上清丸系实火证类用药，具有清热散风、解毒和通便的功效，用于治疗头晕耳鸣、 目赤、鼻窦炎、口舌生疮、牙龈肿痛和大便秘结。现有上清丸的质量控制方法存在无法对组 成药物进行化学鉴别和无法控制制剂中有效成分含量的技术问题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是解决现有上清丸的质量控制方法存在无法对组成药物进行化学 鉴别和无法控制制剂中有效成分含量的技术问题，提供一种上清丸的质量控制方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
[0005] -种上清丸的质量控制方法，包括成分检查步骤，其中：它还包括成分鉴别和成分 含量测定步骤；
[0006] 所述成分鉴别步骤如下：
[0007] 1)显微镜鉴别：取上清丸，置显微镜下观察：草酸钙簇晶大，直径60?140μπι为 大黄；纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞壁木化增厚为黄柏； 纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细为黄芩；内果皮纤维上下层纵横交错，纤维短梭形为连翘； 花粉粒类圆形，直径24?34 μ m，外壁有刺，长3?5 μ m，具3个萌发孔为菊花；油管含金黄 色分泌物，直径约30μπι为防风；果皮石细胞镶嵌排列成层为桅子；
[0008] 2)黄柏的薄层色谱鉴别：取上清丸1. 2g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理20min，滤 过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏阴性样品，黄柏阴性样品 由除去黄柏以外的其他同等处方量的药材制成，同法制成阴性空白溶液；再取盐酸小檗碱 对照品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试 品溶液2 μ 1、阴性空白溶液2 μ 1和对照品溶液1 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙 酸乙酯-丙酮-甲酸-水10:7:1:1为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光 灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄绿色的荧光斑点，即为 上清丸中含盐酸小檗碱；
[0009] 3)大黄的薄层色谱鉴别：取上清丸1.2g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理20min，滤 过，滤液蒸干，残渣加水l〇ml使溶解，再加盐酸lml，置水浴中加热30min，立即冷却，用乙醚 振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另 取大黄对照药材〇. lg及大黄阴性样品，大黄阴性样品由除去大黄以外的其他同等处方量 的药材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液与阴性空白溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制 成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液4 μ 1、阴性 空白溶液4 μ 1、对照药材溶液2 μ 1和对照品溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 在30?60°C的温度下以石油醚-甲酸乙酯-甲酸15:5:1上层溶液为展开剂，展开，取出， 晾干，分别置日光下和波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱 及对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点；紫外光灯下显相同颜色的荧光斑 点，即为上清丸中含大黄素；
[0010] 4)桅子薄层色谱鉴别：取上清丸7g，剪碎，加硅藻土7g，研匀，加浓度为50%的甲 醇50ml，超声处理40min，滤过，滤液蒸干，残渔加无水乙醇5ml使溶解，挥发至约0. 5ml，作 为供试品溶液；另取桅子药材lg与桅子阴性样品，桅子阴性样品由除去桅子以外的其他同 等处方量的药材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液和阴性空白溶液；再取桅子苷对照品， 加无水乙醇制成每lml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶 液10 μ 1、阴性空白溶液10 μ 1、对照药材溶液10 μ 1、对照品溶液4 μ 1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5:5:1:1为展开剂，展开，取出，瞭干，喷以10% 硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同的紫红色斑点，即为上清丸中含桅子苷；
[0011] 5)黄芩的薄层色谱鉴别：取上清丸3g，剪碎，加硅藻土 3g，研匀，加乙酸乙酯-甲 醇3:1的混合溶液50ml，加热回流30min，自然冷却至常温，滤过，滤液蒸干，残渔加甲醇5ml 使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材lg与黄芩阴性样品，黄芩阴性样品由除去黄 芩以外的其他同等处方量的药材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液和阴性空白溶液；再 取黄芩苷对照品，加甲醇制成每lml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验， 吸取供试品溶液10 μ 1、阴性空白溶液10 μ 1、对照药材溶液4μ 1和对照品溶液各4μ 1，分 别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5:3:1.5:1为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以10%磷钥酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药 材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同的棕色斑点，即为上清丸中含黄芩苷；
[0012] 所述成分含量测定步骤如下：
[0013] 1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0. 2%磷酸溶液以48 : 52为流动相；检测波长为280nm ;理论板数按黄芩苷峰计算应 不低于5000 ;
[0014] 2)对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含黄芩苷 38 μ g的溶液，即得对照品溶液；
[0015] 3)上清丸供试品溶液的制备：取重量差异项下的上清丸，剪碎，精密称定5g，精密 加入等量硅藻土，研细，混匀，精密称定〇.6g，置具塞锥形瓶中，精密加50ml浓度为70 %的 乙醇溶液，称定重量，在功率为100W和频率为40kHz的情况下超声处理30min，自然冷却至 常温，再称定重量，用浓度为70%的乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得上 清丸供试品溶液；
[0016] 4)测定：分别精密吸取对照品溶液与上清丸供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱 仪，测定，即得，每lg上清丸含黄芩苷不得少于5. 21mg。
[0017] 所述的上清丸是由菊花、薄荷、川芎、白芷、荆芥、防风、桔梗、连翘、桅子、酒炒的黄 芩、酒炒的黄柏和酒炒的大黄制成，首先将各药材粉碎成细粉，然后过筛并混匀，最后向每 l〇〇g粉末中加入炼蜜90?110g，即得上清丸。
[0018] 为表明本发明具有良好的重复性，对上清丸进行6次含量测定试验，分别精密 称取上清丸6份，按上述拟定的方法制成供试品溶液，对6份样品进行含量测定，进样量 10μ 1，结果见表1。
[0019] 表1上清丸重复性试验结果
[0020]
【权利要求】
1. 一种上清丸的质量控制方法，包括成分检查步骤，其特征在于：它还包括成分鉴别 和成分含量测定步骤； 所述成分鉴别步骤如下： 1) 显微镜鉴别：取上清丸，置显微镜下观察：草酸钙簇晶大，直径60?140 μ m为大黄； 纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞壁木化增厚为黄柏；纤维淡 黄色，梭形，壁厚，孔沟细为黄芩；内果皮纤维上下层纵横交错，纤维短梭形为连翘；花粉粒 类圆形，直径24?34 μ m，外壁有刺，长3?5 μ m，具3个萌发孔为菊花；油管含金黄色分泌 物，直径约30 μ m为防风；果皮石细胞镶嵌排列成层为桅子； 2) 黄柏的薄层色谱鉴别：取上清丸1. 2g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理20min，滤过，滤 液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄柏阴性样品，黄柏阴性样品由除 去黄柏以外的其他同等处方量的药材制成，同法制成阴性空白溶液；再取盐酸小檗碱对照 品，加甲醇制成每lml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶 液2 μ 1、阴性空白溶液2 μ 1和对照品溶液1 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙 酯-丙酮-甲酸-水10:7:1:1为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下 检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同黄绿色的荧光斑点，即为上清 丸中含盐酸小檗碱； 3) 大黄的薄层色谱鉴别：取上清丸1. 2g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理20min，滤过，滤 液蒸干，残渣加水l〇ml使溶解，再加盐酸lml，置水浴中加热30min，立即冷却，用乙醚振摇 提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取大 黄对照药材O.lg及大黄阴性样品，大黄阴性样品由除去大黄以外的其他同等处方量的药 材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液与阴性空白溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液4μ 1、阴性空白溶 液4 μ 1、对照药材溶液2 μ 1和对照品溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，在30? 60°C的温度下以石油醚-甲酸乙酯-甲酸15:5:1上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，分 别置日光下和波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照 品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点；紫外光灯下显相同颜色的荧光斑点，即为 上清丸中含大黄素； 4) 桅子薄层色谱鉴别：取上清丸7g，剪碎，加硅藻土 7g，研匀，加浓度为50 %的甲醇 50ml，超声处理40min，滤过，滤液蒸干，残渔加无水乙醇5ml使溶解，挥发至约0. 5ml，作为 供试品溶液；另取桅子药材lg与桅子阴性样品，桅子阴性样品由除去桅子以外的其他同等 处方量的药材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液和阴性空白溶液；再取桅子苷对照品，力口 无水乙醇制成每lml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液 1〇μ 1、阴性空白溶液1〇μ 1、对照药材溶液1〇μ 1、对照品溶液4μ 1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水5:5:1:1为展开剂，展开，取出，瞭干，喷以10%硫酸 乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同的紫红色斑点，即为上清丸中含桅子苷； 5) 黄芩的薄层色谱鉴别：取上清丸3g，剪碎，加硅藻土 3g，研匀，加乙酸乙酯-甲醇3:1 的混合溶液50ml，加热回流30min，自然冷却至常温，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶 解，作为供试品溶液；另取黄芩对照药材lg与黄芩阴性样品，黄芩阴性样品由除去黄芩以 外的其他同等处方量的药材和蜂蜜制成，同法制成对照药材溶液和阴性空白溶液；再取黄 芩苷对照品，加甲醇制成每lml含3mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供 试品溶液10 μ 1、阴性空白溶液10 μ 1、对照药材溶液4μ 1和对照品溶液各4μ 1，分别点于 同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5:3:1. 5:1为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以10%磷钥酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱及 对照品色谱相应的位置上，显相同的棕色斑点，即为上清丸中含黄芩苷； 所述成分含量测定步骤如下： 1) 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-〇. 2%磷 酸溶液以48 : 52为流动相；检测波长为280nm ;理论板数按黄芩苷峰计算应不低于5000 ; 2) 对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含黄芩苷38 μ g 的溶液，即得对照品溶液； 3) 上清丸供试品溶液的制备：取重量差异项下的上清丸，剪碎，精密称定5g，精密加入 等量硅藻土，研细，混匀，精密称定0. 6g，置具塞锥形瓶中，精密加50ml浓度为70 %的乙醇 溶液，称定重量，在功率为100W和频率为40kHz的情况下超声处理30min，自然冷却至常温， 再称定重量，用浓度为70%的乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得上清丸供 试品溶液； 4) 测定：分别精密吸取对照品溶液与上清丸供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测 定，即得，每lg上清丸含黄芩苷不得少于5. 21mg。
2.根据权利要求1所述的一种上清丸的质量控制方法，其特征在于：所述的上清丸 是由菊花、薄荷、川；、白芷、荆芥、防风、桔梗、连翅、桅子、酒炒的黄苳、酒炒的黄柏和酒炒 的大黄制成，首先将各药材粉碎成细粉，然后过筛并混匀，最后向每l〇〇g粉末中加入炼蜜 90?110g，即得上清丸。
【文档编号】G01N30/90GK104155240SQ201410432876
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年8月28日 优先权日:2014年8月28日
【发明者】王六贵, 吕建英, 陈伟 申请人:山西振东开元制药有限公司