本发明涉及药物检测技术领域，具体涉及一种利格列汀原料物质的检测方法。
背景技术：
利格列汀（Linagliptin Tablets），利格列汀是一种二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂，可在饮食控制和体育锻炼的基础上改善2型糖尿病（T2DM）成年患者的血糖控制水平。在制备过程中会用到很多原料，但是当前对原料的检测方法操作负责、分离度低、检测结果准确性低。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷，提供一种利格列汀原料物质的检测方法。
为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：一种利格列汀原料物质的检测方法，其方案如下：
1）配制利格列汀样品溶液，所述利格列汀样品溶液包括系统适用性溶液、供试品溶液、对照品溶液；
（2）将步骤（1）所得样品溶液注入高效液相色谱仪，用流动相进行洗脱，并记录色谱图；其中，所述供试品溶液的制备方法包括下述步骤：取本品适量，用乙腈-水70∶30溶解并定量稀释制成每1ml约含2mg的溶液，作为供试品溶液，另取利格列汀对照品适量，用乙腈-水70∶30溶解并定量稀释制成每1ml含2μg的溶液，作为对照品溶液，照高效液相色谱法试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以pH2.5磷酸盐缓冲液为流动相A；甲醇-乙腈1∶1为流动相B，照下表进行梯度洗脱，流速为每分钟1.0ml，检测波长为218nm，柱温55℃，取利格列汀杂质M、杂质X、杂质Z，各约2mg，置10ml量瓶中，加乙腈-水70∶30溶解并稀释至刻度，精密量取1ml，加入事先放有利格列汀系统适用性试验用对照品10mg的5ml量瓶中，用乙腈-水70∶30稀释至刻度，取2μl注入液相色谱仪，记录色谱图，所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
优选的，所述流动相的配制：流动相A为pH2.5磷酸盐缓冲液；流动相B为甲醇-乙腈1∶1。
优选的，所述磷酸盐缓冲溶液取磷酸二氢钾3.0g，溶于1000ml水中，用磷酸调节pH至2.5。
优选的，所述高效液相色谱法的色谱柱，柱温为55℃，检测波长为218nm。
优选的，在高效液相色谱法检测步骤（2）中，取对照品溶液2μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%；精密量取供试品溶液与对照品溶液各2μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；优选地，注入液相色谱仪中样品溶液的量均为2μl。
本发明的检测方法在同一液相条件下测定利格列汀原料中的有关物质，所述检测方法操作简便、分离度高、测定方法专属性强、检测结果准确可信。
实施方式
实施例1
该方法是采用高效液相色谱法进行的，包括下述步骤：
（1）配制利格列汀样品溶液，所述利格列汀样品溶液包括系统适用性溶液、供试品溶液、对照品溶液
（2）将步骤（1）所得样品溶液注入高效液相色谱仪，用流动相进行洗脱，并记录色谱图；其中，所述供试品溶液的制备方法包括下述步骤：取本品适量，用乙腈-水70∶30溶解并定量稀释制成每1ml约含2mg的溶液，作为供试品溶液。另取利格列汀对照品适量，用乙腈-水70∶30溶解并定量稀释制成每1ml含2μg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录D）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径5μm，15cm×4.6mm，Intertsil ODS-2，以pH2.5磷酸盐缓冲液为流动相A，磷酸盐缓冲液用磷酸二氢钾3.0g，溶于1000ml水中，用磷酸调节pH至2.5；甲醇-乙腈1∶1为流动相B，照下表进行梯度洗脱，流速为每分钟1.0ml，检测波长为218nm，柱温55℃。取利格列汀杂质M、杂质X、杂质Z，各约2mg，置10ml量瓶中，加乙腈-水70∶30溶解并稀释至刻度，精密量取1ml，加入事先放有利格列汀系统适用性试验用对照品10mg的5ml量瓶中，用乙腈-水70∶30稀释至刻度，取2μl注入液相色谱仪，记录色谱图。所述高效液相色谱法的色谱柱固定相填充剂用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径5μm，15cm×4.6mm，Intertsil ODS-2已适用。