一种云南重楼或其多芽品系中多种甾体皂苷的UPLC检测方法与流程

技术特征：

1.云南重楼或其多芽品系中多种甾体皂苷的UPLC检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

(1)取干燥的待检样品，粉碎，以醇类溶剂或含水醇类溶剂提取，合并提取液，除去溶剂后所剩残渣用甲醇、含水甲醇、乙腈或含水乙腈复溶，制备供试品溶液；

(2)取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷中的任意四种或四种以上的甾体皂苷混合物，制备对照品溶液；

(3)将供试品溶液、对照品溶液分别注入超高效液相色谱仪中，采用外标法检测即可；其中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料

ELSD检测器条件：漂移管温度55±2℃，氮气压力40±2psi，增益500，冷却模式；

流动相：乙腈(A)-水(B)系统，其梯度程序如下：

0～1min(5％或10％)～25％A；1～2.5min，25％～30％A；2.5～4min，30％～35％A；4～6min，35％～40％A；6～(8min或9min)，40％～(42％或45％)A；(8或9min)～21min，(42％或45％)～50％A；(21～22～23min，50％～70％～90％A)或者(21～23min，50％A～90％A)；

流动相流速0.2mL·min^-1；柱温40±2℃。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，醇类溶剂选自甲醇、乙醇或丙醇，含水醇类溶剂选自含水甲醇、含水乙醇或含水丙醇；提取方式选自超声、浸渍、渗漉或回流。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，采用减压蒸发的方式除去溶剂。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，所述任意四种或四种以上的甾体皂苷混合物中，至少含有重楼皂苷I、II、Ⅶ和H；进一步地，取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷中任意5～7种的混合物，制备对照品溶液。

5.根据权利要求1或4所述的检测方法，其特征在于：步骤(2)中，对照品溶液的溶剂选自甲醇、含水甲醇、乙腈或含水乙腈。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤(3)中，所述色谱柱填料的粒径为1.7～3.5μm，为1.7～1.8μm，更优选为1.8μm。

7.根据权利要求1或6所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱尺寸为：2.1×(50mm～100mm)；优选地，所述色谱柱尺寸为：2.1×50mm；进一步优选地，所述色谱柱的型号为： BEH C18色谱柱，2.1mm×50mm，1.7μm。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：流动相：乙腈(A)-水(B)系统，其梯度程序如下之一：

梯度程序一：0～1min 10％～25％A；1～2.5min，25％～30％A；2.5～4min，30％～35％A；4～6min，35％～40％A；6～8min，40％A～42％A；8～21min，42％A～50％A；21～23min，50％A～90％A；

梯度程序二：0～1min 5％～25％A；1～2.5min，25％～30％A；2.5～4min，30％～35％A；4～6min，35％～40％A；6～9min，40％A～45％A；9～21min，45％A～50％A；21～22min，50％A～70％A；22～23min，70％A～90％A；

梯度程序三：0～1min 10％～25％A；1～2.5min，25％～30％A；2.5～4min，30％～35％A；4～6min，35％～40％A；6～8min，40％A～45％A；8～21min，45％A～50％A；21～23min，50％A～90％A。

9.云南重楼或其多芽品系的UPLC检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

(1)取干燥的待检样品，粉碎，以醇类溶剂或含水醇类溶剂提取，合并提取液，除去溶剂后所剩残渣用甲醇、含水甲醇、乙腈或含水乙腈复溶，制备供试品溶液；

(2)将供试品溶液注入超高效液相色谱仪中，采用指纹图谱技术检测即可；其中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料

ELSD检测器条件：漂移管温度55±2℃，氮气压力40±2psi，增益500，冷却模式；

流动相：乙腈(A)-水(B)系统，其梯度程序如下：

0～1min(5％或10％)～25％A；1～2.5min，25％～30％A；2.5～4min，30％～35％A；4～6min，35％～40％A；6～(8min或9min)，40％～(42％或45％)A；(8或9min)～21min，(42％或45％)～50％A；(21～22～23min，50％～70％～90％A)或者(21～23min，50％A～90％A)；

流动相流速0.2mL·min^-1；柱温40±2℃。