一种依托咪酯注射液中依托咪酯的离子迁移谱检测方法与流程

本发明基于试剂分子辅助光电离正离子迁移谱技术，设计了一种依托咪酯注射液的离子迁移谱检测方法，采用了不同的提取剂，实现了依托咪酯注射液中依托咪酯的检测。

背景技术：

依托咪酯是一种催眠性静脉全麻药，属于咪唑类衍生物，是咪唑的羟化盐，分子式为c14h16n2o2，分子量为244.29，安全性大，是麻醉诱导常用的药物之一，用于静脉全麻诱导或麻醉辅助。依托咪酯的临床应用已有30年的历史，现广泛用于临床，具有起效迅速、作用强、诱导安静平稳、循环抑制轻、对心功能无明显影响等特点。中国药典2010年版二部中分别采用滴定法和紫外-可见分光光度法测定依托咪酯和依托咪酯注射液的含量。

目前，用于检测依托咪酯注射液中依托咪酯的方法主要有高效液相色谱技术hplc，检测时间比较长，操作复杂等缺点，不适于快速检测。

离子迁移谱(ionmobilityspectrometry,ims)作为一种检测爆炸物的主流技术，与质谱、色谱等传统技术相比，其具有结构简单、灵敏度高、分析速度快等特点，已被广泛地应用于爆炸物筛查、毒品稽查和vocs的在线监测等。离子迁移谱仪主要由离子源、离子门、迁移区和检测器组成。离子源使试剂分子电离，产生的试剂离子很容易与样品分子发生离子分子反应，得到多种产物离子。离子在电场的驱使下通过周期性开启的离子门进入迁移区，与逆流的中性漂气分子不断地碰撞，由于这些离子在电场中具有不同的迁移速率，使得不同的离子得到分离，先后到达检测器。为了实现依托咪酯注射液中依托咪酯的检测，本发明基于试剂分子辅助光电离正离子迁移谱技术，优化了依托咪酯注射液中依托咪酯的提取剂，设计了一种依托咪酯注射液中依托咪酯的检测方法。

技术实现要素：

本发明通过采用试剂分子辅助光电离正离子迁移谱技术，结合热解析进样技术，采用不同的提取剂，实现了依托咪酯注射液中依托咪酯的检测，提高了依托咪酯检测的灵敏度和选择性。

本发明采用如下方案：

一种依托咪酯注射液中依托咪酯的离子迁移谱检测方法：

基于试剂分子辅助光电离正离子迁移谱技术和热解析进样技术，优化筛选了依托咪酯注射液中依托咪酯的提取剂，从而对依托咪酯注射液中依托咪酯的热解析进样检测，提高了依托咪酯检测的灵敏度和选择性。

所述提取剂选自环己烷、一氯丁烷、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇、乙醇、异丙醇和丙二醇；

离子迁移谱所采用的试剂分子为丙酮。

具体提供一种检测方案：

1)用提取剂对依托咪酯注射液中的依托咪酯进行提取，得到依托咪酯提取液；

2)微量进样针取含有依托咪酯的清液滴加在采样布上，待溶剂稍挥发干后，将盛载有依托咪酯样品的采样布插入热解析进样装置中加热，样品载气将样品热解析出来的气态分子载带进入离子迁移管的离子反应区，同时通过试剂分子载气将反应试剂分子载带进入离子迁移管的离子反应区，气态分子与试剂分子在离子迁移管反应区中发生分子离子反应，生成产物离子，产物离子经过迁移区依次分离，到达法拉第盘被检测。

所述依托咪酯提取液中依托咪酯的浓度范围为1-100ngμl^-1。

优选的方案，依托咪酯提取液在使用前，先超声2-4min，然后10000-14000r/min离心5-7min取上清液再滴加于采样布上。

提供一种方案，热解析进样器内温度范围为140-200℃，离子迁移管内温度范围为100-130℃，迁移区环间电压196v，环间距0.54cm，迁移区电场强度363vcm^-1。

离子迁移谱包括带法拉第盘接收极的离子迁移管，靠近法拉第盘的离子迁移管迁移区一端设有漂气入口、远离法拉第盘的离子迁移管反应区一端设有样品载气入口，于漂气入口和载气入口之间的离子迁移管反应区末端，迁移区前端设有总出气口；

于远离法拉第盘的离子迁移管反应区一端设有载带反应试剂分子载气气流的进气口，进气口位于反应区远离法拉第盘的一端，反应试剂分子由进气口进入反应区；

提供一种方案，样品载气流速范围为200-300ml/min,试剂分子载气流速范围为50-100ml/min,漂气流速范围为500-600ml/min。

反应区内样品载气和试剂分子载气气流方向一致，与迁移区气流方向相反；

离子迁移管内的所有气体由总出气口离开离子迁移管；

所述的样品载气、试剂分子载气、漂气用的气体均为经活性炭、硅胶、分子筛过滤过的空气；

试剂分子进气口与样品载气入口成0°-180°角。

含有试剂分子的载气气体中试剂分子的浓度为20-30ppm。

本发明提供了一种真空紫外灯电离源为商业的10.0ev的氟化镁光窗的低压直流放电氪灯(cathodeonltd.,cambridge,u.k.)。

本发明的有益效果：

本发明通过试剂分子辅助光电离正离子迁移谱技术，结合热解析进样技术，采用不同的提取剂提取依托咪酯注射液中的依托咪酯，实现了依托咪酯注射液中依托咪酯的检测，提高了依托咪酯检测的选择性和灵敏度。

附图说明

图1为本发明中试剂分子辅助光电离正离子迁移谱的结构示意图，试剂分子持续通入反应区；

其中，1为样品载气入口，2为热解析进样器，3为试剂分子载气入口，4为试剂分子发生装置，5为总出气口，6为bradbury-nielsen门，7为导电环，8为栅网，9为漂气入口，10为放大器，11为5000v高压，12为限流电阻，13为10.0ev氟化镁光窗的低压直流kr灯(cathodeonltd.,cambridge,u.k.)。

图2为热解析装置结构示意图；

其中，14为样品载气入口，15为加热棒，16为采样布，17为进样器顶头，18为ims样品进入口。

图3为醇类提取剂(甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇)提取的依托咪酯注射液中依托咪酯的离子迁移谱图。

图4为烷烃和卤代烃类提取剂(环己烷、一氯丁烷、二氯甲烷和三氯甲烷)提取的依托咪酯注射液中依托咪酯的离子迁移谱图。

图5为环己烷、一氯丁烷、二氯甲烷和三氯甲烷作提取剂时，依托咪酯的产物离子峰1(10.80ms)和产物离子峰2(12.32ms)时的信号强度。

具体实施方式

下述实施例使用的离子迁移谱包括带法拉第盘接收极的离子迁移管，靠近法拉第盘的离子迁移管迁移区一端设有漂气入口、远离法拉第盘的离子迁移管反应区一端设有样品载气入口，于漂气入口和载气入口之间的离子迁移管反应区末端，迁移区前端设有总出气口；

于离子迁移管的侧壁上设有含试剂分子的气体的进气口，进气口位于反应区的前端，与样品载气入口成0°-180°角，试剂分子进入反应区；

含有有机试剂分子的载气中试剂分子的浓度为20-30ppm。

如图1，该方法涉及的离子迁移管的结构示意图，1为样品载气入口，2为热解析进样器，3为试剂分子载气入口，4为试剂分子发生装置，5为总出气口，6为bradbury-nielsen门，7为导电环，8为栅网，9为漂气入口，10为放大器，11为5000v高压，12为限流电阻，13为10.0ev氟化镁光窗的低压直流kr灯(cathodeonltd.,cambridge,u.k.)。

图2为热解析装置结构示意图，微量进样针取含有依托咪酯的清液1μl滴加在采样布上，待溶剂稍挥发干后，将盛载有依托咪酯样品的采样布插入热解析进样装置中加热，样品载气将样品热解析出来的气态分子载带进入离子迁移管的离子反应区，同时通过试剂分子载气将反应试剂分子载带进入离子迁移管的离子反应区，气态分子与试剂分子在离子迁移管反应区中发生分子离子反应，生成产物离子，产物离子经过迁移区依次分离，到达法拉第盘被检测。

在本发明下述的实施例中，使用的依托咪酯注射液为江苏恩华药业股份有限公司生产的样品。

实施例1

采用本发明的方法对依托咪酯注射液中依托咪酯进行测定，得到图3，具体测定方法如下：

取50μl依托咪酯注射液原液，加950μl提取剂，采用醇类提取剂如甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇，得到100ngμl^-1的依托咪酯提取液，超声2min，12000r/min离心6min，微量进样针取含有依托咪酯的清液1μl滴加在采样布上，待溶剂稍挥发干后，插入热解析进样器中，进样口温度范围为140-200℃,迁移管温度范围为100-130℃，漂气流速范围为500-600ml/min，样品载气流速范围为200-300ml/min，试剂分子载气流速范围为50-100ml/min，依托咪酯解析出来进入离子迁移谱的反应区，与丙酮试剂分子电离产生的试剂离子反应，生成依托咪酯的产物离子峰，生成的产物离子在电场的作用下通过周期性开启的离子门进入迁移区，迁移区环间电压196v，环间距0.54cm，迁移区电场强度363vcm^-1，由于迁移率的不同，先后到达检测器被检测，从而实现了依托咪酯注射液中依托咪酯的热解析检测，从图3可以看出，依托咪酯产物离子峰的迁移时间为10.80ms，但是醇类提取剂甲醇、乙醇、异丙醇和丙二醇在离子迁移谱中有产物离子峰，存在着背景干扰，和依托咪酯存在着竞争电离，影响依托咪酯检测的灵敏度。

实施例2

采用本发明的方法对依托咪酯注射液中依托咪酯进行测定，得到图4，具体测定方法如下：

取50μl依托咪酯注射液原液，加950μl提取剂，采用烷烃和卤代烃类提取剂如环己烷、一氯丁烷、二氯甲烷和三氯甲烷，得到100ngμl^-1的依托咪酯提取液，超声2min，12000r/min离心6min，微量进样针取含有依托咪酯的清液1μl滴加在采样布上，待溶剂稍挥发干后，插入热解析进样器中，进样口温度范围为140-200℃,迁移管温度范围为100-130℃，漂气流速范围为500-600ml/min，样品载气流速范围为200-300ml/min，试剂分子载气流速范围为50-100ml/min，依托咪酯解析出来进入离子迁移谱的反应区，与丙酮试剂分子电离产生的试剂离子反应，生成依托咪酯的产物离子峰，生成的产物离子在电场的作用下通过周期性开启的离子门进入迁移区，迁移区环间电压196v，环间距0.54cm，迁移区电场强度363vcm^-1，由于迁移率的不同，先后到达检测器被检测，从而实现了依托咪酯注射液中依托咪酯的热解析检测，从图4可以看出，依托咪酯产物离子峰的迁移时间为10.80ms和12.32ms，而且烷烃类提取剂没有背景信号，离子迁移谱图简单，没有其它干扰峰的存在，可用作注射液中依托咪酯的提取剂。从图5可以看出，环己烷作提取剂时，依托咪酯的产物离子峰1(10.80ms)和产物离子峰2(12.32ms)具有较高的信号强度，可选择环己烷作为依托咪酯注射液的提取剂。

常规的检测方法如高效液相色谱法，需要对色谱条件进行优化，还需要对依托咪酯注射液进行复杂的样品前处理，对处理后的依托咪酯样品色谱分离时间较长，而且处理依托咪酯的溶剂有信号响应，影响依托咪酯的检测。

本发明中采用的离子迁移谱用于依托咪酯注射液中依托咪酯的检测，相比于传统的高效液相色谱法，检测速度快，离子迁移谱图的采集时间是15ms,输出的离子迁移谱图由5张原始谱图平均得到，1秒钟可以获得12张平均后的离子迁移谱图；而且样品前处理简单，采用热解析进样，采样速度快且易于操作，复杂基质干扰小，非常适合于注射液中依托咪酯的检测；采用试剂分子辅助光电离正离子迁移谱，通过添加丙酮试剂分子提高了依托咪酯检测的选择性和灵敏度，可以消除依托咪酯注射液中一些辅助成分的干扰；通过优化依托咪酯注射液的提取剂，选择没有背景干扰的提取剂，提高了依托咪酯检测的灵敏度。