一种高直链淀粉各组分含量的分析方法与流程

文档序号:12061168阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:

将高直链淀粉制备成溶液并冷却,过滤后上样到琼脂糖凝胶层析柱,用淋洗液清洗后,恒流速通入淋洗液并接样,通过蒽酮-硫酸法和碘比色法测定样品,计算其中支链淀粉组分、中间组分及直链淀粉组分的含量;

所述淋洗液包括24~26mmol/L NaCl与0.8~1.2mmol/L NaOH的混合液。

2.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述高直链淀粉制备成溶液,其是取高直链淀粉向其中加入蛋白酶溶液,混匀后在35~40℃、300~400rpm条件下孵育25~35min,混匀离心,去除上清液后加入亚硫酸氢钠溶液,混匀后在37℃、300~400rpm条件下反应25~35min,混匀离心去除上清液,快速加入溴化锂/二甲基亚砜,混匀,在75~85℃、300~400rpm条件下8~10h,取出冷却至室温,离心8~12min,去除上清液加底物体积3~5倍的无水乙醇,离心8~12min后去除上清液,吸水纸干燥8~12min,用60~80℃的水溶解样品,制成0.1~0.3%浓度的溶液,沸水浴25~35min后,得到高直链淀粉溶液。

3.如权利要求1或2所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述琼脂糖凝胶层析柱,其是将琼脂糖CL-2B作为填料,装柱后用所述淋洗液冲洗柱子20~28h,淋洗速度为0.4~0.6mL/min。

4.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述碘比色法,其中,淀粉的碘吸收光谱测定方法包括将样品、碘液及水混合,反应8~12min,用分光光度计测OD630nm处吸光度为淀粉碘吸收值,分析每管样品最大吸收峰的峰值对应的波长。

5.如权利要求2所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述蛋白酶溶液pH为7.0~8.0,酶活为2.0~3.0U/mL,其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04~0.06mL。

6.如权利要求5所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述蛋白酶溶液是用缓冲液溶解的,其中缓冲液的制作方法包括,将N-甘氨酸添加到水中,并将其pH调至7.0~8.0。

7.如权利要求2所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述亚硫酸氢钠溶液其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.04~0.06mL,其中,亚硫酸氢钠与溶液的质量体积比为0.004~0.005:1。

8.如权利要求2所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述溴化锂/二甲基亚砜,其添加量为每毫克所述高直链淀粉添加0.12~0.18mL,其中,溴化锂占二甲基亚砜的质量分数为0.4~0.6%。

9.如权利要求1或4所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述琼脂糖凝胶层析柱,其柱长为50cm,柱内径为1.6cm。

10.如权利要求1所述高直链淀粉各组分含量的分析方法,其特征在于:所述恒流速通入淋洗液,其通入流速为0.4~0.6mL/min。

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