一种氟喹诺酮类药物包被抗原及其制备方法和检测试纸卡与流程

技术特征：

1.一种氟喹诺酮类药物包被抗原，为吡哌酸-鸡卵清白蛋白偶联物，具有式Ⅰ所示结构：

式I中，OVA为鸡卵清白蛋白。

2.权利要求1所述包被抗原的制备方法，包括以下步骤：

1)将3-氨基丁酸溶于氢氧化钠溶液，得到3-氨基丁酸溶液；

将吡哌酸溶于含N,N-二甲基甲酰胺的甲醇溶液中，得到吡哌酸溶液；

将所述3-氨基丁酸溶液滴加到所述吡哌酸溶液中，进行碳链衍伸化反应1.5～3h；

将所述反应得到的产物用乙酸乙酯萃取，将所述萃取得到的中间产物酸洗后用碳酸氢钠溶液反萃取，得到吡哌酸半抗原；

2)将所述步骤1)得到的吡哌酸半抗原溶于N,N-二甲基甲酰胺中，再与三乙胺混合，4～8℃反应活化1～2h，得到吡哌酸半抗原反应液；

将氯甲酸异丁酯与所述吡哌酸半抗原反应液混合，进行混合酸酐偶联反应1～2h，得到吡哌酸反应产物；

3)将鸡卵清白蛋白溶于碳酸盐缓冲液中，再与N,N-二甲基甲酰胺反应0.5～1h，得到鸡卵清白蛋白溶液；

4)将所述步骤2)得到的吡哌酸反应产物滴加到所述步骤3)得到的鸡卵清白蛋白溶液中，4～8℃反应5～8h后透析，得到包被抗原；

所述步骤2)和步骤3)之间、步骤1)和步骤3)之间没有时间顺序的限制。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中含N,N-二甲基甲酰胺的甲醇溶液中N,N-二甲基甲酰胺的体积百分含量为40～60％。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中吡哌酸半抗原的质量和三乙胺的体积比为(1.5～2.5)mg：1μL；所述吡哌酸半抗原的质量和氯甲酸异丁酯的体积比为(1.5～2.5)mg：3μL。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中吡哌酸反应产物的质量以吡哌酸半抗原计，与鸡卵清白蛋白的质量比为1：(2～3)。

6.基于诺氟沙星簇多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡，包括塑料盒体，所述塑料盒体一端设置有加样孔，设置在所述塑料盒体中的试纸条，所述试纸条包括支撑层，设置在所述支撑层上的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，其特征在于，所述检测线处设置有氟喹诺酮类药物包被抗原，所述质控线处设置有羊抗兔IgG，所述结合垫上灌注有胶体金标记的抗诺氟沙星簇多克隆抗体；

所述包被抗原为权利要求1所述的包被抗原或权利要求2所述制备方法制备得到的包被抗原。

7.根据权利要求6所述的试纸卡，其特征在于，所述抗诺氟沙星簇多克隆抗体是由诺氟沙星-牛血清白蛋白偶联物免疫新西兰大白兔制备得到；所述诺氟沙星-牛血清白蛋白偶联物具有式Ⅱ所示结构：

8.根据权利要求6所述的试纸卡，其特征在于，所述包被抗原的浓度为0.1～0.2μg/ml。

9.根据权利要求6或7所述的试纸卡，其特征在于，所述多克隆抗体的浓度为0.2～0.3mg/ml。

10.权利要求6～9任意一项所述试纸卡在检测检测氟喹诺酮类药物残留中的应用，所述氟喹诺酮类药物包括诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、恩诺沙星、依诺沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、氨氟沙星、二氟沙星、马波沙星、氟甲喹和恶喹酸中的一种或多种。