一种多靶项微流测试卡及制备方法与流程

本发明涉及微流测试卡领域，尤其涉及一种多靶项微流测试卡及制备方法。

背景技术：

微流测试片是一种交互集成的微全分析系统(miniaturizedtotalanalysissystems，或micrototalanalysissystems，μtas)，主要对微泵、微阀、微储液器和微检测元件等元器件用微管道进行连接，实现分析实验集成在微米级的空间内，把采样、稀释、反应、分离和检测等在微系统的环境下进行分析和执行。它的目的是最大限度地把分析实验室的功能转移到便携的分析设备中，甚至集成到方寸大小的芯片上，由于这个特征，其也被称为“芯片实验室”。

2004年9月美国business20杂志对芯片实验室有“改变未来的七种技术之一”的美誉。微流控芯片技术是现如今研究最广泛，活跃度最高的领域之一，它集中体现了将庞大的实验室分析系统缩小到微米级的芯片上，这种思想已成为目前分析仪器发展的重要研究方向。

微全分析系统的概念于1990年由瑞士ciba-eigy公司的manz与widmer首次提出，并在两年内，实现了在平板微芯片上毛细管电泳与流动注射分析，从而确定了微系统的在平板微芯片上一般厚度不超过5毫米，面积为数平方厘米至十几平方厘米。到1994年，美国橡树岭国家实验室ramsey等对芯片毛细管电泳的进样方法进行了改进，提高了微流控芯片实用性能。1995年，以研究微阵列的生物芯片为代表的首家微流控芯片企业calipertechnologies公司在美成立，这代表了微生物芯片已进入商品开发阶段。随着多领域科学技术的发展，微流控芯片技术也得到了大量的推广，相关产品的研究开发工作也逐步开始。1998年之后，一些微流控芯片企业与分析仪器生产厂家合作，开始生产出微流控分析仪器。在21世纪首届国际μtas会议上，有关微流控芯片的会议论文已经占总数的87％。随着对微芯片研究的深入，微流控芯片制作的材质也已从玻璃基质发展到玻璃与高分子聚合材料并重，尤其在芯片的产业化方面，高分子聚合材料因易于实现批量生产而更具有优势。我国在微流控分析方面的研究虽然比国外较晚，但经过多年的努力，已经取得重大的发展。2001年为了加快研究μtas的步伐，专门召开了讨论μtas发展的165次香山科学研讨会。

2002年以后，全国μtas学术报告会也相继召开，μtas的研究成果在色谱，毛细管电泳、生物芯片、微加工、微系统等相关领域逐步取得了很大的进步。如今，我国已经对非常μtas有了非常深入的创新开发研究。微流控芯片的快速发展对我国生命科学领域起着巨大的推动作用。

现有的微流控测试卡存在不可实现多靶向的缺点，而且微流控测试卡的生产工艺成本高，步骤复杂，工序多。

为此，设计一种多靶项微流测试卡及制备方法，解决以上问题。

技术实现要素：

本发明为克服以上不足，提供一种多靶项微流测试卡及制备方法。

一种多靶项微流测试卡，包括位于顶部的盖板、夹在中间的托板和位于底部的底板；

所述盖板顶部左侧设有前后布置的一排上微反应室观察区；所述盖板顶部右侧中部设有加样区，所述加样区中部设有点样口；

所述托板顶部左侧设有前后布置的一排微反应室，所述托板顶部右侧中部设有样品池，所述样品池中部设有汇样处；

所述底板顶部左侧设有前后布置的一排下微反应室载区；

一排所述上微反应室观察区、一排所述微反应室和一排所述下微反应室载区的设置位置一一对应；

所述加样区所述样品池的设置位置相对应，且所述加样区与所述样品池之间夹有过滤装置，所述过滤装置由多个过滤膜组成；所述点样口所述汇样处的位置对应；

每个所述微反应室的右侧均连接有一个分微管道，所述分微管道汇合连接有总微管道，所述总微管道连接到样品池。

进一步，所述托板的材质为纸质，所述盖板和所述底板的材质为pet、pvc、pe、ps或pp中的一种。

一种多靶项微流测试卡的制备方法，包括的步骤有：

(1)、按需求将所述盖板、所述底板和所述托板的原料板切割成规定的规格大小；

(2)、将原料板使用所述盖板、所述底板和所述托板的专用模具制成所述盖板和所述底板所述托板；所述专用磨具可勾勒出所述微管道、所述加样区、所述样品池、所述上微反应室观察区、所述微反应室、和所述下微反应室载区；

(3)、将所述盖板盖在所述托板的上方，在所述加样区与所述样品池之间夹好过滤装置，粘结所述盖板底部和所述托板的顶部；

(4)、所述托板置于所述底板顶部，粘结所述托板顶部和所述托板的底部；

(5)、将粘结好的所述盖板和所述底板所述托板进行压实。

所述步骤(3)和所述步骤(4)以上所述粘结的粘结处均避开所述微管道、所述加样区、所述样品池、所述上微反应室观察区、所述微反应室、和所述下微反应室载区；样品池内装载有干化学试剂涂层。

进一步，所述托板的材质为纸质，所述盖板和所述底板的材质为pet、pvc、pe、ps或pp中的一种。

进一步，一种多靶项微流测试卡为长方形，大小为分别为：长度：20～30mm，优选25mm；宽度：15～45cm，优选30mm；厚度：0.5～2mm，优选0.8mm。

进一步，所述的样品池大小为：凸起外径：10～20mm，优选15mm；深度：1～5mm，优选2mm；壁厚0.5～2mm，优选1mm；坡度5％～30％，优选20％；内陷直径：2～8mm，优选5mm；

进一步，所述微管道大小为：内径：0.1～1mm，优选0.3mm；长度：1mm～8mm，优选5mm；

进一步，所述微反应室大小为：内径：1～5mm，优选2mm；深度：0.05～1.5mm，优选0.5mm；小孔间距：0.01～5mm，优选1mm。

进一步，一种多靶项微流测试卡能应用在生物化学测定领域，其中包括血液、尿液、脑脊液、白带和机体渗出液等体液样品的多种生物化学指标的测定如肝功能，肾功能，血脂等相关指标的测定。

进一步，干化学试剂涂层由乳酸试剂涂层、过氧化氢浓度试剂涂层、白细胞酯酶浓度试剂涂层、唾液酸苷酶活性试剂涂层、胺实验试剂涂层、脯氨酸基肽酶底物试剂涂层、氧化酶试剂涂层、n-乙酰胺基己糖酶底物试剂涂层、滴虫特异性水解蛋白酶底物试剂涂层中的任意三个以上上述试剂涂层组合而成。

本发明的有益效果是：

本发明所述的一种多靶项微流测试卡及制备方法，使用方便,一种多靶项微流测试卡可实现多靶向，而且微流控测试卡的生产工艺成本低，步骤不复杂，工序少。

附图说明

图1为本发明所述的一种多靶项微流测试卡及制备方法的爆炸结构示意图；

其中：1-盖板；3-过滤装置；4-微管道；6-底板；7-托板；21-加样区；22-点样口；23-样品池；24-汇样处；41-分微管道；42-总微管道；51-上微反应室观察区；52-微反应室；53-下微反应室载区。

具体实施方式

以下将结合本发明的实施例参照附图进行详细叙述。

本发明涉及一种多靶项微流测试卡及制备方法。

一种多靶项微流测试卡，包括位于顶部的盖板1、夹在中间的托板7和位于底部的底板6；

所述盖板1顶部左侧设有前后布置的一排上微反应室观察区51；所述盖板1顶部右侧中部设有加样区21，所述加样区21中部设有点样口22；

所述托板7顶部左侧设有前后布置的一排微反应室52，所述托板7顶部右侧中部设有样品池23，所述样品池23中部设有汇样处24；

所述底板6顶部左侧设有前后布置的一排下微反应室载区53；

一排所述上微反应室观察区51、一排所述微反应室52和一排所述下微反应室载区53的设置位置一一对应；

所述加样区21所述样品池23的设置位置相对应，且所述加样区21与所述样品池23之间夹有过滤装置3，所述过滤装置3由多个过滤膜组成；所述点样口22所述汇样处24的位置对应；

每个所述微反应室52的右侧均连接有一个分微管道41，所述分微管道41汇合连接有总微管道42，所述总微管道42连接到样品池23；样品池23内装载有干化学试剂涂层。

进一步，所述托板7的材质为纸质，所述盖板1和所述底板6的材质为pet、pvc、pe、ps或pp中的一种。

进一步，所述托板7的材质为纸质，所述盖板1和所述底板6的材质为pet、pvc、pe、ps或pp中的一种。

进一步，一种多靶项微流测试卡为长方形，大小为分别为：长度：20～30mm，优选25mm；宽度：15～45cm，优选30mm；厚度：0.5～2mm，优选0.8mm。

进一步，所述的样品池23大小为：凸起外径：10～20mm，优选15mm；深度：1～5mm，优选2mm；壁厚0.5～2mm，优选1mm；坡度5％～30％，优选20％；内陷直径：2～8mm，优选5mm；

进一步，所述微管道4大小为：内径：0.1～1mm，优选0.3mm；长度：1mm～8mm，优选5mm；

进一步，所述微反应室23大小为：内径：1～5mm，优选2mm；深度：0.05～1.5mm，优选0.5mm；小孔间距：0.01～5mm，优选1mm。

进一步，干化学试剂涂层由乳酸试剂涂层、过氧化氢浓度试剂涂层、白细胞酯酶浓度试剂涂层、唾液酸苷酶活性试剂涂层、胺实验试剂涂层、脯氨酸基肽酶底物试剂涂层、氧化酶试剂涂层、n-乙酰胺基己糖酶底物试剂涂层、滴虫特异性水解蛋白酶底物试剂涂层中的任意三个以上上述试剂涂层组合而成。

进一步，一种多靶项微流测试卡可应用在生物化学测定领域，其中包括血液、尿液、脑脊液、白带和机体渗出液的液样品的多种生物化学指标的测定如肝功能，肾功能，血脂相关指标的测定。

一种多靶项微流测试卡的制备方法，包括的步骤有：

(1)、按需求将所述盖板1、所述底板6和所述托板7的原料板切割成规定的规格大小；

(2)、将原料板使用所述盖板1、所述底板6和所述托板7的专用模具制成所述盖板1和所述底板6所述托板7；所述专用磨具可勾勒出所述微管道4、所述加样区21、所述样品池23、所述上微反应室观察区51、所述微反应室52、和所述下微反应室载区53；

(3)、将所述盖板1盖在所述托板7的上方，在所述加样区21与所述样品池23之间夹好过滤装置3，粘结所述盖板1底部和所述托板7的顶部；

(4)、所述托板7置于所述底板6顶部，粘结所述托板7顶部和所述托板7的底部；

(5)、将粘结好的所述盖板1和所述底板6所述托板7进行压实。

所述步骤(3)和所述步骤(4)以上所述粘结的粘结处均避开所述微管道4、所述加样区21、所述样品池23、所述上微反应室观察区51、所述微反应室52、和所述下微反应室载区53；

使用方法：

使用本发明的多靶项微流测试卡行妇科疾病多项联合检测的操作步骤如下：

用无菌棉签从阴道后穹窿去分泌物；

加入300～500ul的稀释液稀释分泌物，让分泌物溶解到稀释液中；

吸取稀释样品50ul加入到样品池内；

将微流测试卡在室温静置10-20分钟，或37℃恒温箱中静置10分钟后可插入生化检测仪自动比色，读取定量数据，打印结果；

本发明微流测试卡检测后，生化检测仪判读结果

根据乳酸、过氧化氢(h2o2)和白细胞酯酶的定量检测结果，判断阴道的理论清洁度计算等级(doc)

根据各测试涂层定量检测结果，有胺试验阳性，脯氨酸氨基肽酶阳性、唾液酸苷酶阳性即可诊断bv。根据各测试涂层定量检测结果，有n-乙酰氨基己糖酶底物试验阳性表明白色念珠菌的存在。根据各测试涂层定量检测结果，有滴虫特异性水解蛋白酶底物试验阳性表明滴虫的存在。根据各测试涂层定量检测结果，有脯氨酸氨基肽酶和氧化酶同时阳性表明淋球菌的存在。

本实用干式生物化学多靶项微流测试卡可以同时测定乳酸、过氧化氢浓度、白细胞酯酶浓度、唾液酸苷酶活性、胺试验、脯氨酸氨基肽酶活性、氧化酶活性、n-乙酰氨基己糖酶活性、滴虫特异性水解蛋白酶活性，可以准确的反应妇女白带分泌物中细菌性阴道病，白色念珠菌，滴虫，淋球菌和生殖道微生物环境，阴道环境的损害程度和白带分泌物的清洁度，使得妇科白带检测全面一次完成，操作简便、快速。若配合干式化学仪读取则会更方便、快捷、准确。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。