银杏内酯k晶k型及制备方法和其组合物与用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及发现了银杏内酯Κ在固体状态下存在的晶Κ型状态形式;涉及发明了晶 Κ型的制备方法;涉及发明了含有银杏内酯Κ晶Κ型及含任意非零比例晶Κ型的混合晶型的药 物组合物;本发明还涉及银杏内酯Κ晶Κ型作为药物有效成分，在制备各种心脑血管疾病、糖 尿病、免疫系统疾病及神经系统疾病防治药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 银杏内酯Κ属于银杏二萜内酯，其结构式如下所示，该化合物为天然PAF受体拮抗 剂。其对中枢神经系统、缺血损伤具有保护作用，可用于治疗缺血性脑血管疾病及相关疾 病。
[0004] 银杏内酯Κ的分子结构式
[0005] 在中国专利CN101824041(公开号）[1]中，记载了广东省中药研究院发明的"一种银 杏内酯Κ的制备方法"，其中涉及了利用银杏内酯Β加酸脱水浓缩后使用乙醇或甲醇溶液进 行重结晶，制得银杏内酯Κ。
[0006] 在中国专利CN102002052(公开号）[2]中，记载了江苏康缘药业股份有限公司发明 的"银杏内酯K及其复合物及其制备方法与用途"，其中涉及了银杏内酯B的溶解，转化，加酸 沉淀或浓缩析晶及将沉淀物或结晶进行重结晶的步骤。其中将沉淀物或结晶用乙醇、甲醇、 丙酮或正丁醇溶液重结晶可制得银杏内酯K。
[0007] 在中国专利CN101747338(公开号）[3]中，记载了广州艾格生物科技有限公司发明 的"一种银杏内酯类化合物制备方法"，其中涉及了银杏内酯K的提取、柱层析、浓缩及重结 晶步骤。其中使用95%甲醇溶液重结晶可制得银杏内酯K。
[0008] 在中国专利CN1424315(公开号）[4]中，记载了江苏康缘药业股份有限公司发明的 "银杏内酯化合物及其制备方法和含有该化合物的药物组合物"，其中涉及了分离纯化银杏 内酯K的方法。将银杏内酯粗品经乙酸乙酯或丙酮溶液进行回流提取，经柱层析纯化，用石 油醚-乙酸乙酯洗脱后合并浓缩洗脱液，放置出现沉淀，将沉淀用丙酮溶解以制备型高效液 相纯化，可得银杏内酯K。
[0009] 文献《银杏萜内酯的分离、纯化和结构鉴定》[5]中用采用银杏叶的乙酸乙酯回流 液，柱层析纯化后，用CH 2Cl2-MeOH洗脱，收集银杏内酯粗品洗脱液，重结晶后经过制备型RP- HPLC纯化，制得银杏内酯K纯品。
[0010] 《Determination of the derivative from ginkgolide Β》等文献中[6-7]涉及了 将银杏内酯B用甲醇溶液溶解后使用RP-HPLC/UV法在半制备色谱柱上进行分离，流动相为 甲醇-水，检测波长为216nm，得到了一种银杏内酯B的衍生物即为银杏内酯K。
[0011]《银杏内酯提取物中微量成分的LC/DAD/ESI/MS分析及结构鉴定》中使用70%丙酮 溶液将银杏内酯提取物完全溶解，后经过制备分离方法得到银杏内酯K纯品[8]。
[0012] 上述专利与文献公开的银杏内酯K固体样品，经试验证实均为银杏内酯K的不同溶 剂合物。经国内外专利与文献检索，未发现有关银杏内酯K的其它晶型专利或文献报道。
[0013] 本发明发现了与上述专利或文献研究报道内容不同的一种新的银杏内酯K固体物 质存在状态，即银杏内酯K的晶K型，其含有一分子结晶水，发现了该晶K型的制备方法，以及 其安全性与稳定性方面的优势特征。
[0014] 本发明的研究目的是从银杏内酯K的晶型固体物质存在状态研究入手，通过晶型 筛选技术、晶型生物活性评价技术，在药物的有效成分原料层面上寻找、发现晶型固体物质 存在种类与状态特征，将晶型物质与药效学研究相结合，为寻找、发现、开发具有最佳临床 疗效的银杏内酯K的优势药用晶型固体物质提供基础科学数据；同时，也为从银杏内酯K固 体药物原料物质基础上申请国家或国际的知识产权发明专利保护提供科学依据
【发明内容】
[0015] 本发明目的之一:提供银杏内酯K晶K型的存在状态和描述方式。
[0016]本发明目的之二:提供银杏内酯K晶K型的制备方法。
[0017]本发明目的之三:提供含有银杏内酯K晶K型纯品、或含有任意非零比例晶K型的混 合晶型的固体药物及其组合物。
[0018]本发明目的之四：提供使用银杏内酯K晶K型作为药物活性成分的药物组合物，其 每日用药剂量在50yg~100mg范围内。
[0019]本发明目的之五:提供使用银杏内酯K晶K型作为药物活性成分原料而制备开发出 供临床使用的片剂、胶囊、丸剂、针剂、缓释或控释制剂药物。
[0020] 本发明目的之六:提供银杏内酯K晶K型在安全性及稳定性方面的优势特征。
[0021] 本发明目的之七:提供使用银杏内酯K晶K型作为活性成分，在制备各种心脑血管 疾病、糖尿病、免疫系统疾病及神经系统疾病防治药物中的应用。
[0022] 本发明提供了银杏内酯K在固体状态下的晶K型形式，晶K型样品的制备方法;发现 使用银杏内酯K的晶K型作为活性成分制备开发出的药物及其组合物用于制备各种心脑血 管疾病、糖尿病、免疫系统疾病及神经系统疾病防治药物中的应用。
[0023] 技术特征
[0024] 1.银杏内酯K晶A型固体物质形态特征：
[0025] 1.1本发明涉及的银杏内酯K晶K型，其特征在于，含有一分子结晶水，当使用粉末X 射线衍射分析采用CuKa辐射实验条件时，表现为衍射峰位置:2-Theta值(°)或d值（A)和衍 射峰相对强度：峰高值(H e i g h t % )或峰面积值(A r e a % )具有如下特征峰值时的固体物质 (表1，图1):
[0026] 表1银杏内酯K晶K型的粉末X射线衍射峰值
[0029] 1.2本发明涉及的银杏内酯K晶K型，其特征在于，使用衰减全反射傅立叶红外光谱 法进行分析时，在 3565，3509，3143，2970，2951，2918，2867，1790，1762，1709，1629，1508， 1471，1442,1407,1379,1371，1360,1345,1311，1286,1264,1243,1235,1219,1189,1179， 1154，1129，1115，1081，1067，1043，1025，999，961，939，928，901，892,833，798,754,730， 721，696,655cm- 1处存在红外光谱特征峰，其中红外光谱特征峰的允许偏差为± 2cm-1(图 2)〇
[0030] 1.3本发明涉及的银杏内酯K晶K型，其特征在于，使用差示扫描量热技术分析时， 表现为在30~300°C范围内，当升温速率为每分钟10°C的DSC图谱中，分别在133°C±5°C及 293°C ±5°C温度处存在2个吸热峰（图3)。
[0031] 1.4本发明涉及的银杏内酯K晶K型，其特征在于，使用热重技术分析时，表现为在 30~200°C温度范围内，升温速率为每分钟10°C的TG图谱中，在80~200°C温度范围内存在1 个溶剂成分失重台阶，失重比例为4% ±1% (图4)。
[0032] 2.银杏内酯K晶K型固体物质的制备方法特征：
[0033] 2.1本发明涉及的银杏内酯K晶K型的制备方法，其特征在于，使用甲醇、乙醇、丙 酮、或四氢呋喃的单一溶剂，或由甲醇、乙醇、水、丙酮及四氢呋喃中任意两种或多种经不同 配比组合制成的混合溶剂，在20°C~60°C温度下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温度10 °〇~301，放置1至10天获得。
[0034] 2.2本发明涉及的的银杏内酯K晶K型的制备方法，其特征在于，使用银杏内酯K溶 剂合物，经环境温度l〇°C~30°C、环境相对湿度50%~95%、放置1至10天获得。
[0035] 3.银杏内酯K的晶型成分、给药剂量及药物制剂组合物特征：
[0036] 3.1本发明涉及的银杏内酯K的混合晶型固体物质，其特征在于，含有任意非零比 例的银杏内酯K晶K型。
[0037] 3.2本发明涉及的药物组合物，其特征在于，含有银杏内酯K晶K型，或含有银杏内 酯K的混晶固体物质和药学上可接受的载体。
[0038] 3.3本发明涉及的药物组合物，银杏内酯K的每日用药剂量在50yg~100mg范围内。
[0039] 3.4本发明涉及的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物是片剂、胶囊、丸 剂、针剂、缓释制剂或控释制剂。
[0040] 3.5本发明涉及的银杏内酯K晶K型，或银杏内酯K的混合晶型固体物质，或药物组 合物在制备各种心脑血管疾病、糖尿病、免疫系统疾病及神经系统疾病防治药物中的应用。 [0041 ] 4.银杏内酯K无溶剂合物成分口服给药的优势吸收和血药浓度特征：
[0042] 4.1银杏内酯K晶K型在高温（60°C)，高湿（25°C，RH90 % ± 5 % )，光照（45001x 土 5001x)的条件下放置10天，均不发生转晶现象，表现出良好的稳定性。
[0043] 4.2银杏内酯K晶K型不含任何结晶溶剂，具有良好的安全性。
【附图说明】
[0044] 图1银杏内酯K晶K型的粉末X射线衍射图谱
[0045] 图2银杏内酯K晶K型的红外吸收光谱图 [0046]图3银杏内酯K晶K型的差示扫描量热图谱 [0047]图4银杏内酯K晶K型的热重图谱
【具体实施方式】
[0048]为更好说明本发明的技术方案，特给出以下实施例，但本发明并不仅限于此。
[0049] 实施例1
[0050] 银杏内酯K晶K型的制备方法1:
[0051] 使用四氢呋喃溶剂在20°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温度20°C，放置2 天，重结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射图谱与图1 一致， 表明所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0052] 银杏内酯K晶K型的制备方法2:
[0053]使用丙酮溶剂在20°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温度20°C，放置5天，重 结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射图谱与图1 一致，表明 所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0054] 银杏内酯K晶K型的制备方法3:
[0055] 使用乙醇溶剂在45°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温度10°C，放置6天，重 结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射图谱与图1 一致，表明 所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0056] 银杏内酯K晶K型的制备方法4:
[0057]使用甲醇溶剂在40°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温度10°C，放置8天，重 结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射图谱与图1 一致，表明 所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0058]银杏内酯K晶K型的制备方法5:
[0059] 使用甲醇-水(v/v = 2:1)混合溶剂在50°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境温 度l〇°C，放置10天，重结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射 图谱与图1 一致，表明所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0060] 银杏内酯K晶K型的制备方法6:
[0061] 使用甲醇-乙醇(v/v=l:l)混合溶剂在50°C下将银杏内酯K样品完全溶解，经环境 温度l〇°C，放置8天，重结晶获得银杏内酯K固体物质。对其进行粉末X射线衍射分析，其衍射 图谱与图1 一致，表明所得样品为银杏内酯K晶K型。
[0062] 银杏内酯K晶K型的制备方法7: