一种水产品中2-甲基异茨醇的检测方式的制作方法

本发明涉及食品品质检测技术领域，具体涉及一种水产品中致腥物质2-甲基异茨醇的检测方法。

背景技术：

水产品富含多种维生素和矿物质，是健康膳食所需的各种宏量和微量元素的较好来源，随着人们对水产品营养价值的认识不断深入，水产品市场和消费群体逐步扩大，需求量逐年增加。但无论是自然捕捞的鱼类还是人工养殖的水产品，都不同程度地存在土腥味，这种土腥味既降低水产品的食用价值和养殖效益，又存在食用安全问题，这种腥味影响了水产品的品质和口感，让部分消费者望而却步，对水产品的销售及养殖效益产生了一定的影响。因此，水产品的腥度检测在水产品市场中就显得尤为重要。

土腥味常见于淡水养殖的水产品中，根据报道，能引起土腥味的物质主要有2-甲基异茨醇和土臭味素等。目前检测致腥物质的手段有感官分析法和仪器分析法等。感官分析法具有低成本、高效率的优点，但该法主观因素影响太大，无法进行精确的定量分析。而仪器分析法对异味物质的检测主要以气相色谱进行分离后用氢火焰离子检测器或质谱仪进行检测，仪器分析的优点在于灵敏度和准确度都非常高，缺点是样品前处理对仪器分析法来说十分关键且非常耗时，且所用仪器非常昂贵，对操作人员要求高。

技术实现要素：

根据上述现有技术存在的缺陷，本发明提供一种准确测定水产品中致腥物质2-甲基异茨醇浓度的方法，检测准确、且较为客观。

为达到上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种水产品中2-甲基异茨醇的检测方法，操作步骤为：

(1)样品处理：将一定量的水产品样品，捣碎后在甲醇中超声进行提取，过滤后得到提取液。

(2)纳米金溶液的制备：取红花石蒜的叶子，放入粉碎机粉碎后得到粉末；取红花石蒜叶子粉末，投入适量的氯金酸溶液，在室温下均匀混合进行反应；反应一段时间后得到金纳米粒子水溶液，离心烘干后得纳米金；将定量金纳米粒子移入离心管，同时加入甲醇，盖上管盖后置于超声机中，超声5min后得到分散均匀的纳米金甲醇溶液。

(3)电化学检测：将纳米金甲醇溶液滴在玻碳电极表面，甲醇挥发后，金纳米粒子成功修饰在玻碳电极表面；将样品提取液滴加在修饰过的玻碳电极上；对置于不同2-甲基异茨醇的磷酸缓冲液中的电极进行循环伏安扫描，测定2-甲基异茨醇氧化电位和对应不同浓度的氧化电流值，计算线性方程a。

(4)实际水产品中2-甲基异茨醇浓度的电化学测定：将一定量的步骤(1)中的水产品提取液加入磷酸缓冲溶液之中，利用步骤(3)中的纳米金修饰玻碳电极进行循环伏安扫描，测定2-甲基异茨醇氧化电位的电流值，根据线性方程a计算样品中2-甲基异茨醇的浓度a。

(5)zeta电位检测：将不同浓度的2-甲基异茨醇加入一定量的纳米金甲醇溶液，混合均匀后，使用zeta电位仪测定此时溶液的表面电势，得到zeta电位值后计算线性方程b。

(6)实际水产品中2-甲基异茨醇浓度的zeta电位测定：将一定量的步骤(1)中的水产品提取液加入纳米金粒子甲醇分散液，混合均匀后，使用zeta电位仪测定此时溶液的表面电势。得到zeta电位值后代入标准线性方程b求出样品中的2-甲基异茨醇浓度b。

(7)待测样品中2-甲基异茨醇浓度为n＝(a+b)/2。

优选地，所述步骤(1)中超声功率为200-500w，超声频率为20khz。

优选地，所述步骤(2)中所用的氯金酸溶液浓度为(0.001～0.01)mol/l。

优选地，所述步骤(2)中红花石蒜叶子粉末与氯金酸溶液的投料比为(0.4～1)g:(50～100)ml。

优选地，所述步骤(2)中移入离心管的金纳米粒子与甲醇的投料比为(0.5～2)mg：(0.5～2)ml。

优选地，所述步骤(3)中修饰玻碳电极表面时所滴加的纳米金甲醇溶液为1～3μl。

优选地，所述步骤(3)中滴加的样品提取液的量为1～5μl。

优选地，所述步骤(3)中磷酸缓冲液中磷酸二氢钾和磷酸二氢钠的浓度独立地为0.05～0.2mol/l。

优选地，所述步骤(3)中循环伏安法扫描区间为0.2～-0.9v，扫描速率为20～150mv/s，采样时间为1～5mv。

优选地，所述步骤(5)中纳米金粒子分散液的浓度为1mg/ml，待测样品提取液与分散液的体积比为0.01～0.1：1。

相比于现有技术，本发明具备以下有益效果：

本发明所述方法首先利用红花石蒜对前驱体氯金酸进行还原，得到纳米金粒子，用纳米金粒子修饰玻碳电极，然后利用观察待测样品在经修饰过的玻碳电极上的电化学变化，与线性曲线进行对照，得到2-甲基异茨醇浓度a，再以zeta电位分析法测得2-甲基异茨醇浓度b，以a，b的算术平均值作为待测样品的所测浓度。检测方法所使用的仪器较为经济实惠，适合推广，所需样品的量不大，检出限低；提高了客观评价的准确性。

附图说明

图1为循环伏安法所测得的2-甲基异茨醇标准浓度曲线。

图2为zeta电位值法所作的标准浓度曲线。

具体实施方式

以下实施例是对本发明提供的方法与技术方案的进一步说明，但不应理解成对本发明的限制。

标准2-甲基异茨醇浓度-循环伏安法线性方程a的建立方法如下：

(1)用移液枪将1mg/ml的纳米金甲醇溶液滴涂在玻碳电极表面，甲醇挥发后，金纳米粒子成功修饰在玻碳电极表面。

(2)配置缓冲溶液：配置ph为5～9的磷酸缓冲溶液。

(3)分别往成功修饰纳米金粒子的玻碳电极上滴加梯度浓度的2-甲基异茨醇甲醇溶液后，用循环伏安法对置于缓冲液中的金修饰玻碳电极进行检测。循环伏安法扫描区间为0.2～-0.9v，扫描速率为20～100mv/s，采样时间为1～5mv。得到每个浓度所对应的电位峰值。

(4)对上述数据进行分析处理后，得到标准峰值-浓度图1，拟合后得到标准线性方程a。

标准2-甲基异茨醇浓度-zeta电位标准线性方程b的建立方法如下：

(1)将纳米金粒子分散至水溶液中，使用zeta电位仪测得此时分散液的表面电势+20mv为背景值。

(2)在等浓度纳米金粒子分散液中分别加入梯度浓度的2-甲基异茨醇后测溶液的表面电势。得到每个浓度对应的zeta电位。

(3)对上述数据进行分析处理后，制作zeta电位-浓度图2，拟合后得到标准线性方程b。

实施例1：

(1)样品处理：取5g鲥鱼鱼鳃部位的鱼肉，捣碎后在20ml甲醇中超声进行提取，得到提取液。超声功率为200w，超声频率为20khz，超声时间为2min。

(2)纳米金溶液的制备：取红花石蒜的叶子，放入粉碎机粉碎后得到粉末；取2g的红花石蒜叶子粉末，投入100ml的氯金酸溶液，在室温下均匀混合进行反应；反应一段时间后得到金纳米粒子水溶液，离心烘干后得纳米金；将定量金纳米粒子移入离心管，同时加入甲醇，盖上管盖后置于超声机中，超声5min后得到1mg/ml的纳米金甲醇溶液。

(3)电化学检测：用移液枪将1μl纳米金甲醇溶液滴在玻碳电极表面，甲醇挥发后，金纳米粒子成功修饰在玻碳电极表面；将2μl样品提取液加入磷酸缓冲溶液中；对置于磷酸缓冲液中的电极进行循环伏安扫描。循环伏安法扫描区间为0.2～-0.9v，扫描速率为20mv/s，采样时间为1mv；得到峰值后，利用已有的标准线性方程a求出样品中的2-甲基异茨醇浓度140ng/l。

(4)zeta电位检测：将待测样品提取液滴入纳米金粒子分散液，混合均匀后，使用zeta电位仪测定此时溶液的表面电势。得到zeta电位值后代入标准线性方程b求出样品中的2-甲基异茨醇浓度195ng/l。

(5)待测样品中mib浓度为n＝167.5ng/l。

实施例2：

(1)样品处理：取10g中华绒螯蟹鳃部位的肉，捣碎后在10ml甲醇中超声进行提取，得到提取液。超声功率为200w，超声频率为20khz，超声时间为2min。

(2)纳米金溶液的制备：取红花石蒜的叶子，放入粉碎机粉碎后得到粉末；取2g的红花石蒜叶子粉末，投入100ml的氯金酸溶液，在室温下均匀混合进行反应；反应一段时间后得到金纳米粒子水溶液，离心烘干后得纳米金；将定量金纳米粒子移入离心管，同时加入甲醇，盖上管盖后置于超声机中，超声5min后得到1mg/ml的纳米金甲醇溶液。

(3)电化学检测：用移液枪将1μl纳米金甲醇溶液滴在玻碳电极表面，甲醇挥发后，金纳米粒子成功修饰在玻碳电极表面；将2μl样品提取液滴加在修饰过的玻碳电极上；对置于磷酸缓冲液中的电极进行循环伏安扫描。循环伏安法扫描区间为0.2～-0.9v，扫描速率为20mv/s，采样时间为1mv；得到峰值后，利用已有的标准线性方程a求出样品中的2-甲基异茨醇浓度370ng/l。

(4)zeta电位检测：将待测样品提取液滴入纳米金粒子分散液，混合均匀后，使用zeta电位仪测定此时溶液的表面电势。得到zeta电位值后代入标准线性方程b求出样品中的2-甲基异茨醇浓度420ng/l。

(5)待测样品中mib浓度为n＝395ng/l。

由以上实施例可知，本发明提供了一种基于电化学知识测定水产品中致腥物2-甲基异茨醇的方法。首先利用红花石蒜对前驱体氯金酸进行还原，得到纳米金粒子，用纳米金粒子修饰玻碳电极。然后利用观察待测样品在经修饰过的玻碳电极上的电化学变化，与线性曲线进行对照，得到2-甲基异茨醇浓度a。再以另一种方法zeta电位分析法测得2-甲基异茨醇浓度b。以a，b的算术平均值作为待测样品的所测浓度。本方法提供的检测方法能更准确有效检测水产品中2-甲基异茨醇。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求保护范围内。