一种油料中百草枯的提取方法与流程

本发明涉及分析化学与农产品检测
技术领域：
，尤其涉及一种油料中百草枯的提取方法。
背景技术：
：百草枯是一种速效接触型灭生性除草剂，属于季铵盐类除草剂，使用遍及多个国家和地区，但它对人、畜均有较强的毒性，目前尚无特效治疗方法。曾作为油菜的催熟剂被使用，在油菜籽中的残留对人体健康存在严重危害。百草枯提取困难，现有的标准方法如epa549.2和aoac992.17标准等文献中，提取方法十分复杂，需要在9mol/l硫酸中回流5h以上。因此建立油菜籽中快速、高效的百草枯提取方法非常必要。百草枯为强极性化合物，极易溶于水，微溶于低相对分子质量的醇类，不溶于烃类溶剂，在酸性、中性溶液中稳定，在碱性溶液中易分解，一般采用水浸法提取或甲醇和盐酸溶液提取，而对于油料(如油菜籽、大豆)中的百草枯很难提取，回收率低，而且提取需要过固相萃取柱操作特别耗时，百草枯提取前处理方法一直是检测中的难点。因此，探寻一种简单、快速、回收率高的提取油料中百草枯的方法具有重要的意义。技术实现要素：本发明实施例提供一种油料中百草枯的提取方法，本发明提供的方法具有简单、快速，回收率高，无需过固相萃取柱等特点。本发明实施例提供一种油料中百草枯的提取方法，包括：将油料样品进行去除油脂处理，然后进行酸溶液提取及离心分层处理；其中，所述去除油脂处理包括：向所述油料样品中加入有机溶剂，进行超声处理或振荡处理。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述有机溶剂选自正己烷、氯仿、乙酸乙酯、石油醚、二氯甲烷中的一种或多种，优选为正己烷。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述酸溶液为易挥发性酸，优选为3％的甲酸水溶液。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述油料样品、有机溶剂和酸溶液的质量体积比为1～5g:5～15ml:5～40ml，优选为1～2g:10～15ml:10～15ml。本发明中，采用上述有机溶剂能确保油脂去除干净。同时通过采用上述种类的有机溶剂及酸溶液；尤其是在上述用量比下，能够获得更好的提取效果。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述超声处理的时间为15～30min；和/或，所述振荡处理的时间为20～60min；优选为超声处理，所述超声处理的时间为20～30min。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述超声功率为200～1000w，优选为400～600w。本发明中，通过采用上述超声处理，在特定超声时间参数下，能够提高回收率，同时提高提取方法的综合效益。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述离心分层处理中，转速为5000～20000r/min，时间为1～5min。本发明中，去除油脂结束后，需3％的甲酸水溶液，涡旋0.5～5min优选1min，再以转速为5000～10000r/min，离心1～5min，效果更好。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，离心分层处理后还包括：向水相中加入乙腈，进行离心沉淀或静置沉淀，然后过膜待测；优选的，所述水相与所述乙腈的体积比为1:2～5。本方法中，乙腈稀释沉淀静止，也可以利用离心沉淀，优选为离心沉淀。本发明利用乙腈稀释沉淀蛋白效果更好。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，离心沉淀的转速为4000～6000r/min，时间为1～4min；采用0.22μm有机相针式滤膜过膜待测。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，所述油料包括油菜籽、大豆、花生、蓖麻；优选为油菜籽或大豆；和/或，所述油料中油脂含量大于10％。本方法特别是对于其中脂肪含量较高，且对百草枯具有较强吸附作用的油菜籽及大豆，效果更好。根据本发明实施例提供的一种油料中百草枯的提取方法，还包括以下步骤：取油料500～1000g，粉碎处理20～60min，然后过10～20目筛，制备所述油料样品。本发明中，通过上述处理方式能更好保证提取效果。本发明所用粉碎机的刀头为陶瓷或不锈钢制。本发明的有益效果至少在于：本发明对油料中百草枯的提取提出的创新方案，具有简单、快速，回收率高，无需过固相萃取柱等特点；所得样品可直接利用lc-ms/ms对百草枯进行定量分析。该方法能保证百草枯不被油脂吸附，提取效率高，在食品监测
技术领域：
应用前景广阔。附图说明为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本发明实施例提供的方法的提取示意图。附图标记：1：离心管盖；2：离心管；3：有机层液体；4：酸的水溶液液体；5：有机层液体。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用仪器等未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。所述方法如无特别说明均为常规方法，所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径而得。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。图1为本发明实施例中的提取方法的示意图(离心管盖1、离心管2、有机层液体3、酸的水溶液液体4及样品5)。实施例1本实施例提供一种提取油菜籽中百草枯的方法，包括：(1)取油菜籽干样500～1000g，用带有陶瓷或不锈钢头的粉碎机粉20～60min，并过10～20目的尼龙筛；(2)用千分之一的天平称取样品2.000g，于50ml的离心管中，加入10ml的正己烷，以500w的功率，超声20min。(3)加入10ml3％的甲酸水溶液，采用涡旋30s充分混匀，以10000r/min，离心3min。(4)吸取水相1ml，加入3ml的乙腈，以5000r/min，离心2min。(5)采用0.22μm有机相针式滤膜过滤，待测。对比例1提取方法与实施例1相同，区别在于：将正己烷和3％的甲酸水溶液替换为水，只用纯水提取。对比例2提取方法与实施例1相同，区别在于：将正己烷替换为甲醇，3％的甲酸水溶液替换为0.1mol/l的盐酸溶液。对比例3提取方法与实施例1相同，区别在于：将正己烷替换为3％的甲酸水溶液，只用3％的甲酸水溶液提取。对比例4提取方法与实施例1相同，区别在于：将10ml的正己烷替换为正己烷(10ml)-3％的甲酸水溶液(10ml)。实验例1测试实施例1及对比例1-4中不同浸提剂提取的百草枯回收率，结果见表1。表1不同浸提剂提取的百草枯回收率(％)提取溶剂浸提方式百草枯回收率(％)实施例1正己烷-3％的甲酸水溶液分步提取超声90.8对比例1纯水超声0.0对比例2甲醇-0.1mol/l的盐酸溶液超声30.2对比例33％的甲酸水溶液超声35.4对比例4正己烷-3％的甲酸水溶液混合提取超声37.1由表1可见，实施例1的提取回收率明显高于对比例1-4。在不去除油脂的条件下，很难提取出来。这可能是因为百草枯被油脂吸附导致了回收率低甚至无法回收。为保证提取效率，须先去除油脂，以保证提取效果最佳。实施例2与实施例1所述方法相同，区别在于，超声的时间为15min。实施例3与实施例1所述方法相同，区别在于，超声的时间为25min。实施例4与实施例1所述方法相同，区别在于，超声的时间为30min。对比例5与实施例1所述方法相同，区别在于，超声的时间为5min。对比例6与实施例1所述方法相同，区别在于，超声的时间为10min。实验例2测试实施例2-4及对比例5和6中不同超声时间处理百草枯的回收率，见表2。表2不同提取时间下百草枯的回收率提取方式提取时间(min)百草枯回收率(％)实施例2超声1587.3实施例3超声2590.4实施例4超声3090.3对比例5超声545.7对比例6超声1062.3由表2可知，实施例2-4百草枯的提取回收率明显高于对比例5-6。其原因包括在超声低于15min时样品中的油脂还未充分被正己烷萃取彻底，会造成回收率偏低，因而超声时间选择15～30min更理想。实施例5与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为12ml。实施例6与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为15ml。实施例7与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为20ml。对比例7与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为2ml。对比例8与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为5ml。对比例9与实施例1所述方法相同，区别在于，正己烷的体积为8ml。实验例3测试实施例5-7及对比例7-9中不同正己烷体积处理处理百草枯的回收率，见表3。表3不同正己烷体积处理百草枯的回收率(％)提取方式正己烷体积(ml)百草枯回收率(％)实施例5超声1287.3实施例7超声1588.2实施例8超声2088.3对比例7超声238.9对比例8超声567.8对比例9超声872.4从表3可以看出，正己烷体积为10ml以上提取效率趋于稳定，选择正己烷体积为15ml更利于节能原则。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。当前第1页12