青蒿血清指纹图谱及其建立方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药材指纹图谱技术领域，具体涉及青蒿血清指纹图谱及其建立方法。
【背景技术】
[0002]中药虽然已经有几千年的应用发展历史，但如何有效的评价中药材质量的好坏，一直是中药材研宄与应用的重点和难点。随着科技的发展，指纹图谱质控技术在中药领域被提出并得到广泛认可，其在中药材质控中的应用也越来越多；中药材指纹图谱是指中药材经过适当处理后，采用一定的分析手段和检测仪器得到的，能够标示该中药材特性的图谱，它是现阶段可以较全面地反映中药材内在质量的最有效的手段之一，也得到了国际社会的认可。
[0003]中药由于种类繁多、来源复杂，因此在质量控制方面需要采用现代先进的分析技术来分析中药的活性成分及其整体特性，制定统一标准和规范的质量控制，保证中药的质量和疗效。
[0004]从中药质量控制方法的发展来看，模仿化学合成药物的质量控制模式是目前普遍采用的一种质量控制方法，即采用中药中已知的某种、或者某几种主要活性成分或有效成分作为该药材质量控制的指标，通过常用的分析方法对其进行定性定量的描述，借以判断其是否达到药用的标准。然而任何单一的活性成分或指标成分均不能反应中医用药所体现的整体疗效，所以仅仅对单一成分指标进行检测控制，难以真正控制中药疗效。因此从中医理论辨证论治、随证加减的治疗和用药原则出发，强调天然药物成分产生药效的“整体性”，具有综合的、宏观的、非线性分析观念的质量控制模式才是具有生命力的发展方向。天然药物色谱指纹图谱具有整体性、模糊性和可以量化等特点，能够全面地反映中药的整体质量，已成为国际上公认的控制天然药物质量的有效手段。
[0005]中药指纹图谱是指借助于现代分析及检测技术来表达植物药(主要是次生代谢产物)化学信息特征的指纹图谱。欧洲对草药的质量控制采用了指纹图谱方法。美国最近几年制定的植物草药指南中已经明确把指纹图谱作为这类混合物质群的质量控制方法。英国草药典、印度草药典以及德国药学植物学会也把指纹图谱作为质控标准的内容之一。
[0006]高效毛细管电泳(HighPerformance Capillary Electrophoresis，HPCE)具有以下几个方面的优势，主要有:①它分离效能高、分析速度快、样品前处理简单，有时甚至无需处理；?毛细管柱便宜、分析成本低、对环境影响小；③分离模式多，常用的有六种分离模式(CZE，MECC或MEKC，CIEF, CGE, CITP)，它适用于多组分复杂样品的分离分析！④进样量少、应用范围广，不仅能分析水溶性和脂溶性的小分子组分，还能分析大分子化合物，在化学、药学、生命科学、临床医学、法医学等领域应用广泛。可以实现从无机离子到中性物质，从各类小分子、有机化合物、手性分子到天然大分子的分离分析，应用范围广泛，特别适合于含复杂成分的样品的快速分析。
[0007]近年来HPCE发展非常迅速，在药物分析以及指纹图谱的建立中已越来越受到相关专业人士的高度重视。如HPCE方法建立的黄芩、半夏、枳壳等单味药材指纹图谱以及复方心舒口服液、益母草注射液等中药复方及制剂的指纹图谱，这些指纹图谱的建立能更全面地反映该药材、复方、制剂的整体质量，从而实现质量控制的目的。鉴于重庆道地药材所含成分的复杂性，采用HPCE来研宄其指纹图谱具有极大的优势。
[0008]我国天然药物指纹图谱研宄起步较晚，主要是采用色谱技术建立的反映天然药物注射剂质量的化学成分的指纹图谱，并对其进行方法学研宄。这些研宄手段虽然和传统的质量控制模式相比取得了很大的进步，但仍处于指纹图谱研宄开发的初级阶段，多以谱图中的峰面积与组分的量之间建立关系。事实上，有效成分不等于主要成分，复杂的天然药物仅用组分的量，以及组分之间的相对含量来进行质量控制是远远不够的。目前，指纹图谱技术已发展成为国际上公认的控制中药或天然药物质量最有效的模式。
[0009]而“回归自然”、崇尚天然药物正在成为一种世界性潮流，我国中药现代化事业因此面临新的机遇与挑战。国家为了发展和改造传统中药业，把中药产业作为国民经济发展的支柱产业之一，投入巨资推动中药现代化和产业化，使中药走向国际。随着国际医药市场的持续增长，植物药市场的规模也在快速增长，加之当今疾病谱和医疗模式的根本性变化、人们自我保健意识的增强，为中药进入国际市场创造了千载难逢的机遇。提高中药产品的国际竞争力，并不断研制、生产具有自主知识产权产品，中药产业必将成为我国国民经济中的新的经济增长点。目前该产业目前正在向现代化、国际化发展，呈现出前所未有的良好发展势头，显示了广阔的市场前景。但中药具有产地来源多样、药用部位繁多、化学成分众多、基体复杂的特点，在我国已经有几千年的历史，这种传统药物在应用上却受到多方面的限制，其主要原因之一就是缺乏公认的质量评价体系。另一方面，当前，中药指纹图谱技术在国内外己成为一种发展趋势。首先是美国食品药品管理局(FDA)开始承认指纹图谱，在申报 IND (Inviestgiatin New Drug)的 CMC (Chemistry Manufaeture and Control)资料时，植物药、原料药和植物药产品的质量控制可以采用指纹图谱。世界卫生组织(WHO)在1990年草药评价指导原则中也规定:如果草药的活性成分不明，可以提供指纹图谱以证明产品质量的一致。
[0010]采用指纹图谱对天然药物进行质量控制起源于国外。日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代就在企业内部使用高效液相指纹图谱控制质量。欧共体也将指纹图谱监控技术应用于植物药质量控制，德国对制药公司所生产的银杏叶制剂(EGb 761)进行高效液相色谱指纹图谱研宄。美国FDA最近几年制定的植物草药指南中已经明确把指纹图谱作为这类混合物质群的质量控制方法。美国草药药典(AHP)已确定和发布了美国市场上流通的热点植物药和中药如贯叶连翘、五味子、甘草等的TLC、HPLC指纹图谱，为该类药材的生产和应用提供依据。国际上采用指纹图谱对植物药进行质量控制的国家有韩国、日本、德国等，色谱指纹图谱的质量控制方法已经得到了英国草药典、印度草药典、美国DFA、加拿大和德国药用植物学会的认可。
[0011]指纹图谱从进入我国开始就得到了大力的发展，2000年《中药注射剂色谱指纹图谱试验操作规程指南》的颁布实施表明我国正式推行中药指纹图谱，以此来控制中药注射剂的质量。广大的科技工作者在实践中不断地探索、完善，实现了 “新技术”与“老传统”的结合，在对中药指纹图谱质量稳定性的评判中，提出了相似度的概念，并总结出一整套计算方法，设计、开发出“计算机辅助中药指纹图谱相似度计算软件”，使中药色谱指纹图谱作为质量标准更加科学化。
[0012]由此可见，指纹图谱已经成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。中药指纹图谱的研宄是对中药质量进行控制和监督的有益探索，为中药新药的研宄提供了新的模式。开展中药指纹图谱的研宄是最终解决中药质量评价科学性的关键，为加快我国中药及其制剂走向国际市场提供科学的依据和奠定坚实的基础。
[0013]国内外同类项目研宄存在的问题:目前中药的指纹图谱研宄仅仅停留在体外单纯的“化学特征信息”的研宄，而中药传统的口服给药形式决定了那些被吸收入血的物质才能产生活性。且由于中