侣疗法和/ 或底物减少疗法）。在多个实施方案中，所述生物样品是外周样品。在一些实施方案中，所述 生物样品可以是血浆、全血(例如干血斑）、血清和/或尿的样品。使用外周样品来测量溶血-SPM水平可避免对于侵入性方法如肝活检的需要。
【附图说明】
[0016] 图1A是展示在来自NPD-A和NPD-B患者的干血斑(DBS)中SPM浓度与来自正常对照 样品的DBS中的平均浓度值的比率的点线图。图1B是展示来自NPD-A和NPD-B患者的DBS中溶 血-SPM的浓度与来自正常对照样品的DBS中的平均浓度值的比率的点线图。
[0017]图2是柱状图，展示在所示时间点（给药后1、2、4、6、24、48和72小时）来自ASM敲除 小鼠的DBS中溶血-SPM浓度(纵轴）与0、3或20mg/kg rhASM单剂量施用5分钟后浓度相比的 升高倍数。
[0018] 图3展示施用单剂量（10mg/kg)或减少剂量方案（debulking dosing regimen) (3mg/kg)随后为20mg/kg的rhASM剂量后，从野生型(C57BL/6)或ASM敲除型(ASMK0)小鼠获 得的DBS中溶血-SPM(ng/ml)的浓度。血液样品在下列时间点提取:给药后5分钟、4小时、6小 时、24小时和72小时。10mg/kg剂量组的动物在24小时时间点后不得不进行安乐死。
[0019] 图4的柱状图表明在26周时间段内在rhASM给药前、和施用rhASM剂量24、48和72小 时后来自人尼曼-皮克患者DBS中溶血-SPM(ng/ml)的浓度。所述剂量(0.1、0.3、0.6、1、2或 3mg/kg)和施用日期(第1天、第2、4、6、8、10、12、14和26周)在水平轴上表示。在26周，仅在给 药前和给药后的24和48小时取样。
[0020] 一些例示性实施方案的说明
[0021] 根据本发明的公开提述内容将以一些例示性的实施方案详细阐述，其中的一些实 例阐述于附图中。在可能之处，贯穿附图将使用相同的引用编号以指代相同或类似的部分。
[0022] 在本申请中，除非另外具体表明，否则单数的使用包括复数。在本申请中，除非另 外表明，"或"的使用意为"和/或"。此外，术语"包括"的使用以及其他形式如"包含"和"含 有"并非是限制性的。本文描述的任何范围将理解为包括终点和在终点间的全部值。
[0023] 本文使用的章节标题仅出于编排目的且不应理解为对主题的限制。在本申请中引 用的全部文件或文件部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书和条约通过提述以其全 文明确并入此处用于任何目的。
[0024] 本文公开的是筛选、诊断、监测治疗进展和/或调整用于治疗ASM病症如NPD的治疗 剂的剂量的方法。"ASM病症"可涵盖任何伴有酸性鞘磷脂酶的降低表达或受损功能的病症。 ASM病症还可涵盖任何其他与鞘磷脂在组织中的积累相关的病症。
[0025]在一些实施方案中，所述方法可包括将具有第一浓度的用于治疗ASM病症的第一 剂量的治疗剂施用至受试者;且随后如果在所述第一剂量施用后已确定所述受试者具有少 于或等于参照水平(例如，来自不具有ASM病症的对照受试者的样品中的水平，或在治疗前 于患者中测量的基线水平）的溶血-SPM水平，则将具有等于或大于所述第一浓度的第二浓 度的第二剂量的治疗剂施用至受试者。
[0026] -些方面，所述方法包括收集和测量来自人受试者的生物样品中的溶血-鞘磷脂 (溶血-SPM)。测量的溶血-SPM水平可用于筛选、诊断、监测治疗进展和/或调整用于治疗ASM 病症的治疗剂的剂量。所述方法是基于溶血-SPM在来自具有ASM病症如NH)的患者的外周组 织的生物样品中显著升高的发现，其允许对于这些患者的非侵入性评估，包括筛选和诊断 ASM病症和对于ASM病症的疗法的监测/校准/管理。所述方法还基于以下发现:积累的ASM在 治疗过程中的分解可导致为毒性或有害代谢物的产生传递信号的标志物(例如溶血-SPM) 水平的升高，且这些代谢物的有害水平可通过以预防过多代谢物产生的剂量施用经设计以 降低SPM水平的治疗剂(例如ERT、分子伴侣和/或底物减少疗法）的方法来避免。升高的溶 血-SPM浓度的测量可用于检测这些代谢物的产生，且可用于校准疗法以避免代谢物过度升 高的水平(例如毒性水平)的产生。在一些实施方案中，溶血-SPM在接受对于ASM病症治疗的 患者中的水平决定剂量是否增加、减少、重复、延迟或中止。
[0027]在具有ASM病症（例如NPD患者）的受试者中升高的溶血-SPM水平的检测可用作对 于在治疗过程中不良副作用的监测方法的一部分。举例来说，所述方法可包括从受试者收 集生物样品、测量样品中溶血-鞘磷脂(溶血-SPM)的水平，将测量的样品中溶血-SPM的水平 与参照水平比较，且如果在所述样品中溶血-SPM的水平升高则检测到副作用。在一些实施 方案中，如果溶血-SPM的水平与参照样品（例如，来自不具有ASM病症的对照受试者的样品 中的参照水平)相比升高预先确定的量，或如果受试者中溶血-SPM的水平在治疗过程中增 加预先确定的量（即在治疗前患者中测量的基线水平之上的增加，在本文也称作参照水 平），则测量的溶血-SPM水平可用作来自治疗的不良副作用的指示。在一些实施方案中，所 述治疗是酶替代疗法(ERT)且ERT的剂量如下来管理：收集一种或多种来自患者的生物样 品，测试每个样品的溶血-SPM的升高，并将ERT的剂量设置为不产生高于预先确定阈值的升 高的溶血-SPM的水平。管理治疗剂的剂量可包括增加、降低或维持治疗剂的浓度和/或中止 治疗。在一些实施方案中，一剂治疗剂施用后和/或在施用随后剂量的治疗剂之前的即刻， 收集一种或多种生物样品。在一些实施方案中，如果生物样品中的溶血-SPM的水平(例如血 液样品如血浆、血清或干血斑)大于约100_700ng/ml的参照水平(例如大于约100、200、250、 300、400、500、600或700ng/ml或其间的任何浓度），或如果生物样品中的溶血-SPM的水平在 参照之上增加至少约1·1、1·5、2、2·5、3、3·5、4、4·5、5、5·5、6、6·5、7、7·5、8、8·5、9、9·5或10 倍或更多(或其间的任何值），则可检查到不良副作用。举例来说，增加可为至少约3倍。参照 水平可以是例如来自不具有ASM病症的对照受试者的生物样品中的水平或在用治疗剂的剂 量治疗前在患者中测量的基线水平。
[0028]本文还公开了治疗具有ASM病症(例如NPD)的受试者的方法。在多个实施方案中， 所述方法包括以渐增浓度的连续剂量施用用于治疗ASM病症的治疗剂(例如ERT、分子伴侣 疗法和/或底物减少疗法)并在每次剂量后(例如给药后的1分钟、5分钟、10分钟、30分钟、或 45分钟或1、2、3、4、5、10、12、15或20小时，或1天、2天、5天、1周、2周、3周或4周，或期间的任 何时间段)或在下次给药之前的即刻，监测受试者生物样品中升高的溶血-SPM水平。对受试 者的监测可包括从受试者收集生物样品、测量所述样品中的溶血-SPM的水平、将样品中的 溶血-SPM的水平与参照水平(例如来自不具有ASM病症的供体的样品中的水平，或治疗前 ASM患者中的水平）比较，和与参照水平比较检测所述样品中升高的溶血-SPM水平。在一些 实施方案中，参照水平是在来自不具有ASM病症的对照受试者的生物样品中测量的溶血-SPM的水平。在一些实施方案中，参照水平是在之前较低剂量的ERT施用后或施用任何ERT之 前取自受试者的样品中测量的溶血-SPM的水平。在一些实施方案中，生物样品（例如血液样 品如血清样品、血浆样品或干血斑）中升高的溶血-SPM水平是大于参照水平的水平，上述参 照水平例如约100_700ng/ml。在一些实施方案中，生物样品中升高的溶血-SPM水平是比参 照水平多至少约1.1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10倍， 或更多（或其间的任何值)的水平。举例来说，所述水平为至少约3倍高。在一些实施方案中， 如果在施用了之前的剂量后检测到升高的溶血-SPM水平，则不施用更高浓度剂量的ERT。 [0029]除监测疗法和治疗方法，本文还公开了对受试者中的ASM病症(例如NPD)进行筛选 和/或诊断的方法。在多个实施方案中，所述方法包括从受试者中收集生物样品、测量样品 中溶血-SPM的水平，将所述样品中溶血-SPM的水平与参照水平比较，且如果所述样品中溶 血-SPM的水平相对参照样品升高，则检测/诊断ASM病症。在一些实施方案中，参照样品是来 自不具有ASM病症的对照受试者的样品。在一些实施方案中，如果生物样品中溶血-SPM的水 平相比参照水平高至少约1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或 10倍或更多（或其间的任何值），或比至少约200_2000ng/ml的参照水平高，如比至少约 200ng/m、至少约250ng/ml、至少约300ng/ml、至少约400ng/ml、至少约500ng/ml、至少约 525ng/ml、至少约575ng/ml、至少约700ng/ml和/或至少约900ng/ml的参照水平高（例如高 于约 200、250、300、350、400、450、500、525、550、575、600、625、650、700、750、800、850、900、 950、1000、1050、1100、1150、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900或2000ng/ml或 其间的任何浓度），则可对ASM病症进行筛选和/或诊断。在一些实施方案中，来自正常受试 者的生物样品可包含范围在约25-200ng/ml的溶血-SPM水平（例如约25、50、75、100、125、 150、175或200即/1111，或其间的任何浓度）。
[0030] 溶血-SPM的测量
[0031] 对于溶血-SPM化学结构的讨论，参见例如I to等，11101.(^6111.270:24370-4 (1995);还参见Caymen Chemical Co.产品编号10007947,如在其产品目录中提供：
[0032] https://www.caymanchem.com/app/template/Product.vm/catalog/10007947 [0033]本文公开的方法涉及从多种生物样品中测量溶血-SPM，包括来自外周组织的样 品。可使用任何用于收集、制备和定量来自生物样品中的溶血-SPM的水平的方法。生物样品 中溶血-SPM的水平可使用光谱定量、如质谱、例如LC/MS/MS，或电磁频谱，例如UV-VIS、IR或 匪R。在一些实施方案中，定量溶血-SPM的水平的方法可包括收集生物样品（例如通过动脉 或静脉穿刺、组织活检、颊拭、尿样等），检测溶血-SPM和/或将溶血-SPM与所述样品的其他 组分分离（例如使用抗体、指示剂化学品、质谱如LC/MS/MS，或电磁频谱如UV-VIS、IR或 NMR)，并将溶血-SPM的水平与参照样品中的水平比较。
[0034] 溶血-SPM水平可用本文描述的方法在来自多种组织的生物样品中测量。举例来 说，可收集来自外周组织的生物样品，如血浆、全血(例如干血斑）、血清、皮肤和/或尿用于 检测升高的溶血-SPM水平。也可使用来自其他组织的生物样品，例如脾、肺、心、肝、肾和/或 脑组织。可使用来自两种或多种组织(例如2、3、4、5或更多种组织）的组合样品。在一些实施 方案中，使用来自外周组织的生物样品可避免对侵入性方法如肝活检的需要。
[0035] 在一些实施方案中，在检测和/或测量样品中的溶血-SPM前，对生物样品进行一种 或多种预处理步骤。在一些实施方案中，所述样品通过离心、过滤、沉淀、透析或色谱，或通 过这些预处理步骤的组合进行预处理。在其他实施方案中，所述样品通过冷冻、化学固定、 石蜡包埋、脱水、透化和/或匀质化进行预处理，随后进行离心、过滤、沉淀、透析和/或色谱。 在一些实施方案中，所述样品通过在评估溶血-SPM前去除来自样品中的一些细胞类型或去 除来自样品中的碎片进行预处理。
[0036]在多个实施方案中，生物样品使用用于定量或半定量一种或多种所述样品中的标 志物的装置进行评估。举例来说，溶血-SPM的水平和/或样品中的其他标志物可定量或半定 量地评估。在一些实施方案中，可使用用于定量生物样品中溶血-SPM和/或其他标志物的水 平的装置如串联液相质谱(例如LC/MS/MS)。在一些实施方案中，可使用一种或多种抗体或 其他检测剂以结合生物样品中的溶血-SPM和/或其他标志物。可应用一种或多种与检测剂 反应的作用剂(例如显色剂）以发射可检测的信号，其信号的强度、密度、颜色等可用于半定 量或定量确定样品中的溶血-SPM和/或其他标志物的水平(例如，通过比较来自一种或多种 参照样品的信号）。也可使用用于定量生物样品中溶血-SPM和/或其他标志物的其他方法， 例如免疫测试如ELISA、免疫沉淀和蛋白免疫印迹，以及