一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂及制备工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及组织细胞学特殊染色技术领域，具体是一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂及制备工艺。
【背景技术】
[0002]上皮组织特殊染色液是宫颈脱落细胞的组织细胞学特殊染色技术，近年来迅速发展起来的一项氧化显色技术;能够提高组织细胞学染色的质量，使用方便、操作简单、可广泛应用于脱落细胞的组织细胞学特殊染色，特别是针对宫颈、阴道、外阴等临床常规病变的粗筛检查人群，也可作为健康人群常规自检。
[0003]目前，用于对人体上皮组织肿瘤细胞进行活体染色的方法主要有基于乙酸白化反应的方法、碘实验、甲苯胺蓝实验、亚甲基蓝染色、苏木素染色等。乙酸白化反应是通过将乙酸溶液，例如3-5%的乙酸溶液，涂抹在宫颈/阴道上皮组织上，等待一段时间之后观察所涂抹的上皮组织有无乙酸白化反应区，如果有白化区，则该上皮组织怀疑有肿瘤细胞;然而，此方法虽然敏感性高，但是特异性差，因为除了肿瘤细胞之外，部分炎症细胞也可以产生乙酸白化反应，因而产生假阳性的结果，并且该方法的特异性受操作者的技术水平和经验影响较大。碘实验的原理是糖原反应，是将卢戈氏碘液涂抹在宫颈上皮组织上，然后通过观察上皮细胞的碘染现象来进行的检测。其中，正常上皮呈赤棕色或黑色，而异常上皮呈厚的芥末黄或土黄色。但是，在上皮有炎症时，这些区域可能不会受到染碘，或是呈现无色的装填，所以碘实验对上皮细胞染色的特异性较低。使用甲苯胺蓝的方法易使中性白细胞和细菌的核碎片着色，导致较多假阳性，对表面有角化的粘膜白斑和癌不易着色，易造成假阴性。上皮组织苏木素染色后需要借助高倍显微镜进行观察，操作相对复杂，对操作者的专业技术和经验要求较高，且检查费时较长。亚甲基蓝与癌细胞的亲和性使恶性组织易于染成蓝色，有研究将其用于食道上皮组织的定位活检取材，其具有提高活检阳性率的作用。
[0004]上述项目颜色只能靠经验和文字说明，准确度低。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种操作简单、储存期长的一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂及制备工艺，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0006]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.1-1.5%、亚甲基蓝0.02-1%、乙酸2-4.5%、果糖0.1-15%、半乳糖0.1_15%、葡萄糖0.1_15%、纯化水49.5-97.58%o
[0007]作为本发明进一步的方案:所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.5-1.2%、亚甲基蓝0.2-0.8%、乙酸2.5_4%、果糖5_10%、半乳糖5_10%、葡萄糖5-10%、纯化水64-81.8%。
[0008]作为本发明再进一步的方案:所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.8%、亚甲基蓝0.5%、乙酸3.2%、果糖8%、半乳糖8%、葡萄糖8%、纯化水71.5%。
[0009]所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂的制备工艺，具体步骤如下:
(I)按照重量百分比称取各原料；
(I)将果糖、半乳糖和葡萄糖溶于纯化水中，搅拌至溶解；
(3)将亚甲基蓝加入至步骤(2)搅拌好的溶液中再次搅拌溶解；
(4)将叶酸加入至步骤(3)搅拌好的溶液中再次搅拌25-35min至溶解；
(5)将乙酸加入至(4)得到的溶液中并继续均匀搅拌8-12min得到成品。
[0010]与现有技术相比，本发明的有益效果是:
本发明在检测和染色后与对比色卡进行对比可准确知道上皮细胞病变程度，利用叶酸受体介导的宫颈异常病变普查新技术，操作简单、使用卫生、方便，储存期长，适用于各类医疗单位作为上皮组织细胞特殊染色和体外诊断特殊染色时使用，也可为健康适龄人群的宫颈、阴道、外阴等临床常规病变的家庭自检粗筛，自带比色卡，使常规人群也知道检测结果的正确意义，减少医疗费用。
【具体实施方式】
[0011 ]下面结合【具体实施方式】对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
[0012]实施例1
一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.1%、亚甲基蓝0.02%、乙酸2%、果糖0.1%、半乳糖0.1%、葡萄糖0.1%、纯化水97.58%。
[0013]所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂的制备工艺，具体步骤如下:
(I)按照重量百分比称取各原料；
(I)将果糖、半乳糖和葡萄糖溶于纯化水中，搅拌至溶解；
(3)将亚甲基蓝加入至步骤(2)搅拌好的溶液中再次搅拌溶解；
(4)将叶酸加入至步骤(3)搅拌好的溶液中再次搅拌25min至溶解；
(5)将乙酸加入至(4)得到的溶液中并继续均匀搅拌Smin得到成品。
[0014]实施例2
一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.5%、亚甲基蓝0.2%、乙酸2.5%、果糖5%、半乳糖5%、葡萄糖5%、纯化水81.8%。
[0015]所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂的制备工艺，具体步骤如下:
(I)按照重量百分比称取各原料；
(I)将果糖、半乳糖和葡萄糖溶于纯化水中，搅拌至溶解；
(3)将亚甲基蓝加入至步骤(2)搅拌好的溶液中再次搅拌溶解；
(4)将叶酸加入至步骤(3)搅拌好的溶液中再次搅拌28min至溶解；
(5)将乙酸加入至(4)得到的溶液中并继续均匀搅拌9min得到成品。
[0016]实施例3
一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸0.8%、亚甲基蓝0.5%、乙酸3.2%、果糖8%、半乳糖8%、葡萄糖8%、纯化水71.5%。
[0017]所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂的制备工艺，具体步骤如下: (I)按照重量百分比称取各原料；
(I)将果糖、半乳糖和葡萄糖溶于纯化水中，搅拌至溶解；
(3)将亚甲基蓝加入至步骤(2)搅拌好的溶液中再次搅拌溶解；
(4)将叶酸加入至步骤(3)搅拌好的溶液中再次搅拌30min至溶解；
(5)将乙酸加入至(4)得到的溶液中并继续均匀搅拌1min得到成品。
[0018]实施例4
一种上皮组织病变细胞特殊染色试剂，按重量百分比的原料包括:叶酸1.2%、亚甲基蓝
0.8%、乙酸4%、果糖10%、半乳糖10%、葡萄糖10%、纯化水64%。
[0019]所述上皮组织病变细胞特殊染色试剂的制备工艺，具体步骤如