一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及食品安全检测领域，尤其涉及一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡。
【背景技术】
[0002]盐酸克伦特罗，简称克伦特罗，是一种人工合成的肾上腺素兴奋剂，白色结晶粉末，易溶于水，甲醇，乙醇，微溶于氯仿，不溶于苯。
[0003]克伦特罗能促进动物生长，减少脂肪率，使胴体瘦肉率增加10%以上，因此，常作为生长促进剂被广泛应用于畜禽生长中。实际上，其作为饲料添加剂的用量是治疗剂量的5?10倍，消费者因食用克伦特罗残留食品而中毒的事件，国内外已发生多起。各国已禁止将克伦特罗作为生长促进剂使用，我国农业部第235号《动物性食品中兽药最高残留限量》公告中规定克伦特罗及其盐、酯在所有食品动物中均禁止使用，但屡禁不止。因此，除了控制源头，加强法规的宣传，禁止在饲料中掺入克伦特罗外，加强对上市动物食品的检测势在必行。
[0004]目前，国内外克伦特罗的检测方法主要有高效液相色谱法、液/质联用分析法、气/质联用分析法和酶联免疫吸附法等。利用色谱/质谱技术原理的几大检测方法具有灵敏度高、重复性好、准确度高等优点，但操作繁琐、所需仪器昂贵、操作人员需要专业培训；酶联免疫吸附法具有成本低、灵敏度高等优点，但检测步骤多，需要适宜的实验环境及配备一些相关仪器，对操作人员有一定的要求。因此，以上方法无法实现现场检测，不利于基层推广使用。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的在于针对上述问题，提供一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡，其能够快速、简单、灵敏、准确的检测动物尿液中盐酸克伦特罗的含量。
[0006]本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现:
[0007]一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡，包括卡壳及设置于卡壳内的检测底板，所述检测底板上沿液体流动方向依次设置有聚酯膜、样品结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述硝酸纤维素膜上邻近样品结合垫的一端设置有检测线，且硝酸纤维素膜上邻近吸水垫的一端设置有质控线，所述检测线上包被有盐酸克伦特罗-载体蛋白偶联物，所述质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体，所述样品结合垫上包被有抗盐酸克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物。
[0008]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳由塑料材料制成，所述检测底板由聚氯乙稀材料制成。
[0009]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳的正面开有加样孔，所述加样孔位于检测底板的聚酯膜上方。
[0010]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳的正面开有观察窗，所述观察窗位于检测底板的硝酸纤维素膜的上方。
[0011]作为本实用新型的优选方案，所述卡壳的正面印刷有二维条形码，所述二维条形码中记录有用于计算盐酸克伦特罗浓度的标准曲线。
[0012]作为本实用新型的优选方案，所述样品结合垫上包被的抗盐酸克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物中胶体金颗粒大小为20nm?40nm。
[0013]作为本实用新型的优选方案，所述检测线上包被有盐酸克伦特罗-载体蛋白偶联物中的载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵白蛋白或血蓝蛋白。
[0014]作为本实用新型的优选方案，所述吸水垫为滤纸。
[0015]本实用新型的有益效果为，所述一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡操作简单，成本低，通过将样品垫、结合物垫合二为一制成样品结合垫，在保证不影响产品性能的前提下，大大降低了生产及检测成本，且通过增设聚酯膜，对样品起到过滤作用，进一步降低基质干扰，提高检测准确度，能快速、简单、灵敏、准确地用于动物尿液中盐酸克伦特罗残留量的高通量在线定量检测。
【附图说明】
[0016]图1为本实用新型一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡的结构示意图；
[0017]图2为本实用新型检测底板的结构示意图。
[0018]图中:
[0019]1、卡壳；11、观察窗；12、加样孔；13、二维条形码；2、检测底板；21、聚酯膜；22、样品结合垫；23、硝酸纤维素膜；24、吸水垫；25、检测线；26、质控线。
【具体实施方式】
[0020]下面结合附图并通过【具体实施方式】来进一步说明本实用新型的技术方案。可以理解的是，此处所描述的实施例仅仅用于解释本实用新型，而非对本实用新型的限定。
[0021]请参照图1及图2所示，图1为本实用新型一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡的结构示意图；图2为本实用新型检测底板的结构示意图。
[0022]于本实施例中，一种定量检测盐酸克伦特罗的胶体金检测卡，包括由塑料材料制成的卡壳I及设置于卡壳I内的检测底板2，所述检测底板2由聚氯乙烯材料制成，检测底板2上沿液体流动方向依次设置有聚酯膜21、样品结合垫22、硝酸纤维素膜23、吸水垫24，所述样品结合垫22与硝酸纤维素膜23的连接处、硝酸纤维素膜23与吸水垫24的连接处均设置有2_的交叠区域，所述样品结合垫22的二分之一区域覆盖在聚酯膜21之下，所述卡壳I的正面开有加样孔12、观察窗11，所述加样孔12位于检测底板2的聚酯膜21上方，所述观察窗11位于检测底板2的硝酸纤维素膜23的上方，卡壳I正面还设置有二维条形码13，该二维条形码13中记录有标准曲线，所述吸水垫24为滤纸，所述硝酸纤维素膜23上邻近样品结合垫22的一端设置有检测线25，且硝酸纤维素膜23上邻近吸水垫24的一端设置有质控线26，所述检测线25上包被有盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白，所述质控线26上包被有羊抗鼠IgG抗体，所述样品结合垫22上包被有抗盐酸克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物，且样品结合垫22上包被的抗盐酸克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物中胶体金颗粒大小为30nmo
[0023]值得一提的是，虽然上述实施例中，检测线25上包被有盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白，但是本实用新型不限于此，检测线25上也可包被盐酸克伦特罗-鸡卵白蛋白或盐酸克伦特罗-血蓝蛋白。
[0024]一、胶体金的制备
[0025]胶体金的制备采用柠檬酸三钠还原法:99mL超纯水中加入ImL 1%氯金酸，加热煮沸，迅速加入0.7mL I %柠檬酸三钠，继续煮沸15min，冷却后用超纯水恢复原来的体积，4 °C保存备用。
[0026]二、抗盐酸克伦特罗鼠单抗-胶体金结合物的制备
[0027](I)取已制备的胶体金30mL，加入0.2M K2CO3调节pH，磁力搅拌5min ；
[0028](2)在磁力快速搅拌的条件下，逐滴加入抗盐酸克伦特罗鼠单抗，