专利名称：一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法
技术领域：
本发明涉及一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法。
背景技术：
秸秆栽培食用菌的突出问题是菌种问题、栽培技术问题和产品质量问题。目前应用的食用菌品种是以木屑原料驯化的，其对纤维素原料的利用和转化还不能达到理想的效果，因此造成了秸秆栽培食用菌管理难度加大和产品质量的下降。食用菌菌种在秸秆原料上的不适应，成为原料的筛选和利用的主要障碍。以往食用菌菌种优选是以栽培生产方式进行，就是使用规格16 17X33 35cm的栽培袋，设计含秸秆的培养料配方，拌料含水量 65%左右，每个菌袋装料1. 1 1. 25kg，灭菌时插棒封口，常压灭菌8 10h，或高压灭菌 1.5h，冷却至30°C以下接种，再用灭菌的棉花封口，25°C培养，观察结果。这种方法需要空间大，操作过程繁琐，而且至少需要20 40天才能观察到试验结果，周期长，观察结果不直观。
发明内容
本发明是要解决目前食用菌菌种的优选方法存在操作过程复杂、周期长、需要空间大、观察结果不直观的问题，提供一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法。本发明适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的秸秆，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向75 85°C、pH值为6 8的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为12 16g/L，秸秆粉的浓度为20 50g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌50 70分钟，然后冷却至50 60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将用于秸秆栽培的食用菌菌种切取2X2X2mm，接种到食用菌母种培养基中，于22 30°C培养，至长满食用菌母种培养基，得食用菌母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基， 将步骤三得到的食用菌母种切取2 X 2 X 2mm，接入平板培养基中央，每个食用菌母种至少做 3个重复，然后于20 30°C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。本发明以粉碎的秸秆为主要营养源，以琼脂为凝固载体，使用玻璃平皿，对适于秸秆栽培的食用菌菌种进行优选，用于秸秆原料栽培生产食用菌。本发明的周期短，10天之内即可确定结果；需要空间小，操作过程简单；由于菌种长在平板培养基的表面，因此观察食用菌菌种萌发、生长情况更直观，更明了。
图1为具体实施方式
十一中以玉米芯为主要营养源的黑木耳的优选结果；图2为具体实施方式
十一中以豆秸为主要营养源的黑木耳的优选结果；图3为具体实施方式
十一中以玉米芯为主要营养源的鸡腿菇的优选结果；图4为具体实施方式
十一中以稻草为主要营养源的草菇的优选结果。
具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式
，还包括各具体实施方式
间的任意组合。
具体实施方式
一本实施方式适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的秸秆，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向75 85°C、pH值为 6 8的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为12 16g/L，秸秆粉的浓度为20 50g/L,搅拌均勻后于121°C灭菌50 70分钟，然后冷却至50 60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将用于秸秆栽培的食用菌菌种切取2X 2X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于22 30°C培养，至长满食用菌母种培养基，得食用菌母种；四、将玻璃平皿灭菌， 将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的食用菌母种切取2 X 2 X 2mm，接入平板培养基中央，每个食用菌母种至少做3个重复，然后于20 30°C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。本实施方式以粉碎的秸秆为主要营养源，以琼脂为凝固载体，使用玻璃平皿，对适于秸秆栽培的食用菌菌种进行优选，用于秸秆原料栽培生产食用菌。本实施方式的周期短， 10天之内即可确定结果；需要空间小，操作过程简单；由于菌种长在平板培养基的表面，因此观察食用菌菌种萌发、生长情况更直观，更明了。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤二中向80°C的水中加入琼脂粉和秸秆粉。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一或二不同的是步骤二中琼脂粉的浓度为14g/L。其它与具体实施方式
一或二相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一至三之一不同的是步骤二中秸秆粉的浓度为30 40g/L。其它与具体实施方式
一至三之一相同。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一至四之一不同的是步骤二中冷却至55°C。其它与具体实施方式
一至四之一相同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一至五之一不同的是步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g切碎，加1000mL、pH值为6 8的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至IOOOmL,再加入20g葡萄糖和Hg琼脂粉，溶解后分装于试管中，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。其它与具体实施方式
一至五之一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
一至六之一不同的是步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1.证。其它与具体实施方式
一至六之一相同。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
一至七之一不同的是步骤四中玻璃平皿中的培养基A的体积为玻璃平皿的1/3 2/3。其它与具体实施方式
一至七之一相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
一至八之一不同的是步骤四中于 22 恒温培养。其它与具体实施方式
一至八之一相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
一至八之一不同的是步骤四中于 25°C恒温培养。其它与具体实施方式
一至八之一相同。
具体实施方式
十一本实施方式适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的玉米芯，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向80°C、pH值为 7的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为14g/L，秸秆粉的浓度为40g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌60分钟，然后冷却至60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将黑木耳菌种切取2 X 2 X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于25 °C培养，至长满食用菌母种培养基，得黑木耳母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的黑木耳母种切取2X2X 2mm，接入平板培养基中央，每个黑木耳母种做3个重复，然后于25°C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g 切碎，加1000mL、pH值为7的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至 lOOOmL，再加入20g葡萄糖和14g琼脂粉，溶解后分装于试管中，每个试管的分装量为试管体积的三分之一，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1.釙。本实施方式从6个黑木耳菌株中进行优选，优选结果如图1所示，其中菌株A2、A4 和A5的长势最好，选取用于扩大栽培。
具体实施方式
十二 本实施方式适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的豆秸，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向80°C、pH值为7的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为12g/L，秸秆粉的浓度为30g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌60分钟，然后冷却至50°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将黑木耳菌种切取2 X 2 X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于25°C培养，至长满食用菌母种培养基，得黑木耳母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的黑木耳母种切取2 X 2 X 2mm，接入平板培养基中央，每个黑木耳母种做3个重复，然后于25 °C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g 切碎，加1000mL、pH值为7的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至 lOOOmL，再加入20g葡萄糖和14g琼脂粉，溶解后分装于试管中，每个试管的分装量为试管体积的三分之一，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1.釙。本实施方式从6个黑木耳菌株中进行优选，优选结果如图2所示，其中菌株B5和B6的长势最好，选取用于扩大栽培。
具体实施方式
十三本实施方式适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的玉米芯，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向85°C、pH值为 6. 5的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为16g/L，秸秆粉的浓度为40g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌60分钟，然后冷却至60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基， 将鸡腿菇菌种切取2 X 2 X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于23°C培养，至长满食用菌母种培养基，得鸡腿菇母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的鸡腿菇母种切取2 X 2 X 2mm，接入平板培养基中央，每个鸡腿菇母种做3个重复，然后于23°C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g 切碎，加1000mL、pH值为7的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至 lOOOmL，再加入20g葡萄糖和14g琼脂粉，溶解后分装于试管中，每个试管的分装量为试管体积的三分之一，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1.釙。本实施方式从3个鸡腿菇菌株中进行优选，优选结果如图3所示，其中菌株C3的长势最好，选取用于扩大栽培。
具体实施方式
十四本实施方式适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的稻草，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、向851、？!1值为6.5 的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为16g/L，秸秆粉的浓度为40g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌60分钟，然后冷却至60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将草菇菌种切取2 X 2 X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于培养，至长满食用菌母种培养基，得草菇母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的草菇母种切取2 X 2 X 2mm，接入平板培养基中央，每个草菇母种做3个重复，然后于恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g 切碎，加1000mL、pH值为7的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至 lOOOmL，再加入20g葡萄糖和14g琼脂粉，溶解后分装于试管中，每个试管的分装量为试管体积的三分之一，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1.釙。本实施方式从3个草菇菌株中进行优选，优选结果如图4所示，其中菌株D2的长势最好，选取用于扩大栽培。
权利要求
1.一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，按以下步骤进行一、取无霉变的秸秆，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉； 二、向75 85°C、pH值为6 8的水中加入琼脂粉和秸秆粉，其中琼脂粉的浓度为12 16g/L，秸秆粉的浓度为20 50g/L，搅拌均勻后于121°C灭菌50 70分钟，然后冷却至 50 60°C，得到培养基A ；三、配制食用菌母种培养基，将用于秸秆栽培的食用菌菌种切取 2 X 2 X 2mm，接种到食用菌母种培养基中，于22 30°C培养，至长满食用菌母种培养基，得食用菌母种；四、将玻璃平皿灭菌，将步骤二得到的培养基A摇勻，倒入灭菌后的玻璃平皿中，待玻璃平皿中的培养基A冷却凝固后，得平板培养基，将步骤三得到的食用菌母种切取 2X2X2mm，接入平板培养基中央，每个食用菌母种至少做3个重复，然后于20 30°C恒温培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，用于扩大栽培，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。
2.根据权利要求1所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤二中向80°C的水中加入琼脂粉和秸秆粉。
3.根据权利要求1或2所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤二中琼脂粉的浓度为14g/L。
4.根据权利要求3所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤二中秸秆粉的浓度为30 40g/L。
5.根据权利要求4所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤二中冷却至55 °C。
6.根据权利要求5所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤三所述配制食用菌母种培养基的具体步骤为将马铃薯洗净去皮，称取200g切碎，加 1000mL、pH值为6 8的水煮沸30分钟，然后用纱布过滤，向滤液中加水定容至IOOOmL,再加入20g葡萄糖和14g琼脂粉，溶解后分装于试管中，于121°C灭菌30分钟，取出试管摆斜面，即得到食用菌母种培养基。
7.根据权利要求6所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤四所述将玻璃平皿灭菌的具体方法为将直径为9cm玻璃平皿洗净，自然干燥，然后用双层报纸包裹，于160°C灭菌1. 5h。
8.根据权利要求7所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤四中玻璃平皿中的培养基A的体积为玻璃平皿的1/3 2/3。
9.根据权利要求8所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤四中于22 恒温培养。
10.根据权利要求8所述的一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，其特征在于步骤四中于25°C恒温培养。
全文摘要
一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法，涉及一种适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选方法。要解决目前食用菌菌种的优选方法存在操作过程复杂、周期长、需要空间大、观察结果不直观的问题。方法一、取无霉变的秸秆，干燥后粉碎，过70目筛，得秸秆粉；二、配制培养基A；三、将食用菌菌种接种到食用菌母种培养基中，培养至长满食用菌母种培养基，得食用菌母种；四、将食用菌母种接入平板培养基培养，观察食用菌菌种的萌发和生长情况，选取萌发最快和长势最好的食用菌菌种，即完成适于秸秆栽培的食用菌菌种的优选。本发明周期短，需要空间小，操作过程简单；观察食用菌菌种萌发、生长情况更直观，更明了。用于食用菌菌种的优选。
文档编号A01G1/04GK102428835SQ20111028649
公开日2012年5月2日 申请日期2011年9月23日 优先权日2011年9月23日
发明者刘佳宁, 孔祥辉, 张丕奇, 张介驰, 戴肖东, 沙长青, 韩增华, 马庆芳 申请人:黑龙江省科学院微生物研究所